陳平潔，韓 雪，孫彥偉，萬(wàn)美梅，盧受昇，薛念波，熊 穎，周志東，鄒頌平，顧建新

（1.廣東省動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督總所，廣東廣州 510230；2.中國(guó)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，北京 100125；3.廣東省四會(huì)市畜牧獸醫(yī)局，廣東肇慶 526200）

一起水牛出血性敗血癥的暴發(fā)調(diào)查

陳平潔1，韓 雪2，孫彥偉1，萬(wàn)美梅1，盧受昇1，薛念波1，熊 穎3，周志東3，鄒頌平3，顧建新3

（1.廣東省動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督總所，廣東廣州 510230；2.中國(guó)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，北京 100125；3.廣東省四會(huì)市畜牧獸醫(yī)局，廣東肇慶 526200）

2013年8月28日，廣東省四會(huì)市某村報(bào)告了水牛死亡事件。為了弄清水牛發(fā)病的狀況，查明發(fā)病原因，有效控制疫情，開展了本次現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查。調(diào)查表明：本次疫情的襲擊率為9.48%（11/116）、病死率為81.82%（9/11）、群流行率為11.54%（6/52）。初步診斷為多殺性巴氏桿菌引起的牛出血性敗血癥。通過病例-對(duì)照研究發(fā)現(xiàn)，出現(xiàn)病例前的舍飼點(diǎn)（P＜0.01）、養(yǎng)牛戶同時(shí)飼養(yǎng)犬（P＜0.01）與水牛發(fā)病有關(guān)聯(lián)。本次疫情具有舍飼點(diǎn)聚集性，購(gòu)入牛只可能導(dǎo)致疫病傳入，村內(nèi)犬的活動(dòng)可能對(duì)疫病傳播起著媒介作用，氣象因素對(duì)該病的發(fā)生起著誘導(dǎo)作用。建議引進(jìn)牛只應(yīng)先隔離觀察，加強(qiáng)對(duì)牛多殺性巴氏桿菌的免疫接種，做好糞便的無(wú)害化處理。

水牛；出血性敗血癥；調(diào)查；分布；病例-對(duì)照研究；多殺性巴氏桿菌

牛出血性敗血癥（簡(jiǎn)稱牛出?。怯商禺愌鍋喰偷亩鄽⑿园褪蠗U菌引起的牛高發(fā)病率和致死率傳染病，是亞洲和非洲國(guó)家的主要牛疫病之一[1-4]。在亞洲地區(qū)，該病主要發(fā)生于高溫高濕的季風(fēng)季節(jié)。水牛對(duì)該病最易感，我國(guó)也有奶牛[6]、豬[7]、黃牛[8]感染的報(bào)道。

2013年8月28日，廣東省四會(huì)市治安村和廣才塘村向當(dāng)?shù)孬F醫(yī)部門報(bào)告死牛事件，初步懷疑為牛出敗。為了弄清水牛發(fā)病的狀況，查明發(fā)病的原因，有效控制水牛死亡，防止疫情擴(kuò)散，2013年9月3日，廣東省動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督總所有關(guān)人員和獸醫(yī)現(xiàn)場(chǎng)流行病學(xué)培訓(xùn)項(xiàng)目學(xué)員先后兩次開展了現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查。

1 方法

1.1 病例定義

2013年8月—9月期間，在四會(huì)市龍甫鎮(zhèn)治安村和廣才塘村區(qū)域內(nèi)，出現(xiàn)下列一種或多種臨床表現(xiàn)的水牛：精神沉郁、食欲不振或不食、流涎、流鼻液、咳嗽、呼吸困難或喘氣、腹脹、急性死亡。每個(gè)農(nóng)戶有一個(gè)水牛群。陽(yáng)性群為出現(xiàn)1例病例的牛群。

1.2 研究設(shè)計(jì)

采用非配對(duì)病例-對(duì)照研究，病例、對(duì)照比為1∶3。兩村的養(yǎng)牛戶在規(guī)模、飼養(yǎng)條件、環(huán)境衛(wèi)生等方面較相似，對(duì)照組從未發(fā)病的養(yǎng)牛戶中隨機(jī)抽樣。調(diào)查問卷包括：牛群的基本信息，發(fā)病牛的現(xiàn)況調(diào)查，放牧點(diǎn)、舍飼點(diǎn)，出現(xiàn)病例前兩個(gè)月可能暴露的危險(xiǎn)因素，如：近2個(gè)月購(gòu)入牛只、其他易感動(dòng)物或產(chǎn)品，飲用水源，常去的放牧點(diǎn)，發(fā)病前的放牧點(diǎn)，出現(xiàn)病例后是否繼續(xù)放牧，發(fā)病前的舍飼點(diǎn)，牛舍農(nóng)具是否共用，畜主是否到過其他牛場(chǎng)和活畜交易市場(chǎng)，配種情況，牛糞及其他污染物的處理，是否有營(yíng)銷人員、獸醫(yī)到訪，車輛外出，農(nóng)戶同時(shí)飼養(yǎng)雞、水禽、豬、犬，其他動(dòng)物是否與牛同舍，疫苗免疫情況等。

1.3 現(xiàn)場(chǎng)勘查與信息收集

在出現(xiàn)病牛的治安村、廣才塘村進(jìn)行實(shí)地勘察，了解當(dāng)?shù)氐酿B(yǎng)殖場(chǎng)環(huán)境、衛(wèi)生狀況、飼養(yǎng)管理、動(dòng)物的發(fā)病、死亡和病死動(dòng)物處置情況。通過氣象部門了解疫情發(fā)生期間當(dāng)?shù)氐臍庀笠蛩亍?/p>

1.4 實(shí)驗(yàn)室診斷

采集1頭病死牛的4份組織，送廣東省動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督總所進(jìn)行細(xì)菌分離鑒定。采用常規(guī)細(xì)菌分離純化，經(jīng)VITEK細(xì)菌鑒定及藥敏測(cè)試儀GN卡鑒定。在放牧地溪水的上游和下游，由四會(huì)市環(huán)境保護(hù)監(jiān)測(cè)站采集兩處水樣，進(jìn)行pH酸堿度、總鎳、總銅、總氰化物、六價(jià)鉻檢測(cè)。

1.5 統(tǒng)計(jì)分析

一般信息采用Excel進(jìn)行描述性統(tǒng)計(jì)，計(jì)算襲擊率、病死率，描述時(shí)間分布、地理分布，以及其他特性的分布，如主要臨床癥狀、年齡等。對(duì)病例-對(duì)照研究收集的數(shù)據(jù)進(jìn)行χ2分析或f sher精確概率檢驗(yàn)，以P值小于0.05判斷風(fēng)險(xiǎn)因素。

2 結(jié)果

2.1 總體情況

治安村、廣才塘村共有52家農(nóng)戶飼養(yǎng)了116頭水牛，為役用兼肉用，均未免疫多殺性巴氏桿菌疫苗。牛的飼養(yǎng)方式為白天放養(yǎng)，晚上圈養(yǎng)，豬為圈養(yǎng)，部分家禽為放養(yǎng)。本次疫情的總發(fā)病數(shù)11頭，死亡數(shù)9頭，襲擊率9.48%，病死率81.82%。群發(fā)病數(shù)6戶，群流行率11.54%。發(fā)病牛體溫升高至41.5℃，剖檢病死?？梢姡盒厍环e液，肺有纖維性滲出物，且大面積出血，嚴(yán)重的胸膜肺炎；心包膜有彌漫性出血性；肝臟有大面積出血斑；腎臟出血；腹膜有出血點(diǎn)等病理變化。

2.2 時(shí)間分布

8月26日在治安村發(fā)現(xiàn)第一頭病牛，并與當(dāng)天晚上死亡。8月30日新發(fā)病例最多（5頭），9月2日死亡病例最多（3頭）。9月2日采取治療、消毒等干預(yù)措施，9月3日后未再出現(xiàn)新發(fā)病例和死亡病例。流行病學(xué)曲線見圖1。

8月14日～24日，四會(huì)地區(qū)曾受臺(tái)風(fēng)“尤特”及“潭美”影響，出現(xiàn)持續(xù)降雨，造成龍江水位上漲。臺(tái)風(fēng)結(jié)束不久即發(fā)現(xiàn)第1例病例。

2.3 地理分布

疫情首先出現(xiàn)在治安村，隨后出現(xiàn)在廣才塘村，兩疫點(diǎn)相距0.4公里，疫點(diǎn)與高速公路直線距離約2.56公里（地理分布見圖2）。病例主要集中在廣才塘村一隊(duì)牛舍，有5群9頭水牛發(fā)病，另外1群2頭發(fā)病水牛發(fā)現(xiàn)于治安村。

2.4 其他特性的分布

11頭發(fā)病水牛的臨床表現(xiàn)為：精神不振（81.82%）、食欲減退或不食（100%）、流涎（100%）、腹脹（81.82%）、氣喘或呼吸困難（54.55%）、流鼻液（54.55%）、水腫（18.18%）、臥地不起（27.27%）、咳嗽（36.36%）、急性死亡（18.18%）、嘔吐（9.09%）等。因農(nóng)戶不能判斷病牛是否發(fā)熱，沒有逐個(gè)調(diào)查體溫。發(fā)病水牛的年齡中位值為3歲（0.8-12歲），病程中位值為3天（Q1=1.5天，Q2=4天）。

圖1 四會(huì)市牛出敗疫情流行曲線

圖2 四會(huì)市牛出敗疫點(diǎn)地理分布圖

2.5 實(shí)驗(yàn)室診斷

共檢測(cè)病牛組織4份，均為多殺性巴氏桿菌陽(yáng)性。檢測(cè)兩個(gè)取水點(diǎn)的水樣2份，PH值、總鎳、總銅、總氰化物、六價(jià)鉻等指標(biāo)均在《地表水環(huán)境質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》（GB3838-2002）四類極限值之內(nèi)。

2.6 病例-對(duì)照研究

共調(diào)查了6個(gè)陽(yáng)性群和18個(gè)對(duì)照群（見表1）。在發(fā)病前的2個(gè)月，養(yǎng)牛戶均未購(gòu)入羊及其產(chǎn)品、牛產(chǎn)品，均購(gòu)入了豬及其產(chǎn)品，12.5%的養(yǎng)牛戶購(gòu)入家禽及其產(chǎn)品（P=0.546），僅有一戶引進(jìn)牛只（P=0.250）；95.83%的牛群飲用河水（P=1.000）；75%的牛群常在芙蓉溪牧場(chǎng)放牧（P=0.277），出現(xiàn)病例前70.83%的牛群在芙蓉溪牧場(chǎng)放牧（P=0.130），50%的牛群在出現(xiàn)病例后仍在此放牧（P=0.64）；20.83%牛群晚上舍飼點(diǎn)在廣才塘村一隊(duì)牛舍（P=0.000141）。牛舍農(nóng)具均不共用，畜主也未到過其他牛場(chǎng)，但有8.33%的養(yǎng)牛戶到過其他活畜交易市場(chǎng)（P=0.446）。95.83%的養(yǎng)牛戶采取與本村牛配種的繁殖方式（P=1.000）；50%的養(yǎng)牛戶將牛糞及污染物散放在牛舍外（P=0.684）。出現(xiàn)病例前2個(gè)月沒有營(yíng)銷人員到訪，但8.33%的農(nóng)戶表示有獸醫(yī)到訪（P=1.000），也有外來車輛來訪（20.83%，P=0.263）和本戶車輛出入（58.33%，P=0.341）。91.67%的養(yǎng)牛戶還飼養(yǎng)了雞（P=1.000），33.33%的養(yǎng)牛戶飼養(yǎng)了水禽（P=0.362），75%的養(yǎng)牛戶飼養(yǎng)了豬（P=0.277），45.83%的養(yǎng)牛戶飼養(yǎng)了犬（P=0.003）；8.33%的養(yǎng)牛戶還在牛舍飼養(yǎng)了其他動(dòng)物（P=1.000）。

數(shù)據(jù)經(jīng)f sher精確概率檢驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，出現(xiàn)病例前舍飼點(diǎn)的P值為0.000141，養(yǎng)牛戶同時(shí)飼養(yǎng)犬的P值為0.003，因而認(rèn)為出現(xiàn)病例前的舍飼點(diǎn)、養(yǎng)牛戶同時(shí)飼養(yǎng)犬與水牛發(fā)病有關(guān)聯(lián)（P＜0.05）。

表1導(dǎo)致出現(xiàn)牛出敗病例的風(fēng)險(xiǎn)因素

2.7 干預(yù)性防控效果

9月2日，開始進(jìn)行干預(yù)性治療，采用青霉素、鏈霉素、柴胡注射液、30%安乃近等藥物，對(duì)發(fā)病牛進(jìn)行靜脈注射，對(duì)未發(fā)病水牛采取預(yù)防性肌肉注射，同時(shí)對(duì)發(fā)病水牛的排泄物和污染物進(jìn)行無(wú)害化處理，對(duì)環(huán)境進(jìn)行了消毒。9月3日后未見新發(fā)病例和死亡病例，發(fā)病水牛逐步康復(fù)。9月13日，對(duì)所有水牛使用牛多殺性巴氏桿菌病滅活疫苗的進(jìn)行緊急免疫接種，該地區(qū)牛出敗疫情得到了控制。

3 討論

3.1 水質(zhì)污染問題

根據(jù)氣象資料分析，出現(xiàn)疑似病例前的8月14日～24日，四會(huì)地區(qū)受到臺(tái)風(fēng)“尤特”及“潭美”襲擊，河水漫過了芙蓉溪牧場(chǎng)，而發(fā)病水牛均在芙蓉溪牧場(chǎng)放牧，村民由此認(rèn)為可能是芙蓉溪上游污染，水牛吃了被污染的草發(fā)病，我們對(duì)水樣進(jìn)行了銅、鎳、氰化物和鉻的檢測(cè)，水樣檢測(cè)的5項(xiàng)指標(biāo)均符合《地表水環(huán)境質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》（GB3838-2002）四類標(biāo)準(zhǔn)，但由于存在采樣與發(fā)病的時(shí)間差，因而該結(jié)果不能完全排除水質(zhì)發(fā)生污染的可能。但經(jīng)病例對(duì)照研究發(fā)現(xiàn)，在芙蓉溪放牧與水牛發(fā)病關(guān)聯(lián)性不大（P=0.130），出現(xiàn)疑似病例的初期，人們?nèi)匀焕^續(xù)放牧，直到獸醫(yī)部門介入調(diào)查。

3.2 疫病原發(fā)疫點(diǎn)問題

從地理分布看，病例主要集中在廣才塘村一隊(duì)牛舍，病例-對(duì)照研究也發(fā)現(xiàn)，在出現(xiàn)病例前，舍飼點(diǎn)與水牛發(fā)病有密切關(guān)聯(lián)（P=0.000141），說明病例有明顯的舍飼點(diǎn)聚集性。廣才塘村的水牛均養(yǎng)在集體牛舍，每個(gè)養(yǎng)牛戶有1-3間，治安村的水牛均飼養(yǎng)在農(nóng)戶各自家中。廣才塘村一隊(duì)牛舍有6群17頭水牛，其中5群發(fā)病。對(duì)這6群水牛逐一調(diào)查，發(fā)現(xiàn)健康群的陳姓畜主在出現(xiàn)疑似病例前，將水牛暫時(shí)舍飼在自己家里，未在集體牛舍舍飼，也未放出去放牧?？梢酝茢?，病原引入一隊(duì)牛舍后，迅速在該舍飼點(diǎn)傳播，而恰好未在集體牛舍飼養(yǎng)的水牛未被感染。現(xiàn)場(chǎng)發(fā)現(xiàn)，養(yǎng)牛戶將牛糞攤放在牛舍門口晾曬，雖然與疫病發(fā)生沒有密切關(guān)聯(lián)，但牛踩踏被污染的糞便，有傳播疫病的可能，因而懷疑這是造成疫病在廣才塘村一隊(duì)牛舍聚集傳播的原因。此外，在村間道路、田基、空地等，也能觀察到散落牛和家禽糞便。

3.3 疫病來源問題

盡管分析購(gòu)入的易感動(dòng)物及其產(chǎn)品與發(fā)病關(guān)聯(lián)不大（P＞0.05），但引入疫病的風(fēng)險(xiǎn)仍然存在，特別是有一戶曾經(jīng)引進(jìn)牛只。經(jīng)追蹤調(diào)查，該養(yǎng)牛戶在發(fā)病前10天左右購(gòu)入一頭小水牛，于8月26日發(fā)病，為第一例病例，牛舍位于治安村，在芙蓉溪牧場(chǎng)放牧。隨后的8月28日，他家的另一頭母牛發(fā)病。8月29日，廣才塘村的水牛陸續(xù)開始發(fā)病。從發(fā)病時(shí)間及引進(jìn)水牛的時(shí)間推測(cè)，該群牛為傳染源，本次疫情為輸入性。

3.4 疫病散播因素問題

由于多殺性巴氏桿菌是多種動(dòng)物的易感菌，牛呼吸道來源的多殺性巴氏桿菌單序列型又具有同源性，牛的非呼吸道株和非牛株還存在niche關(guān)系[8]，本研究還調(diào)查了村內(nèi)其他易感動(dòng)物，如豬、雞、水禽、犬。除犬外，沒發(fā)現(xiàn)與其他易感動(dòng)物有關(guān)連。出現(xiàn)病例的養(yǎng)牛戶均養(yǎng)了犬，且飼養(yǎng)犬與水牛發(fā)病有密切聯(lián)系（P=0.003）。在農(nóng)村，部分犬和雞白天散養(yǎng)晚上圈養(yǎng)，犬因覓食、模仿、母性或條件反射等原因可能有食糞行為[10]，且犬在活動(dòng)中可能踩踏到牛糞便，對(duì)疫病傳播可能起到媒介作用。犬有相對(duì)獨(dú)立的活動(dòng)范圍，雖然牛舍與農(nóng)戶居住的房屋不在一處，但牛舍涵蓋在一隊(duì)犬的活動(dòng)范圍內(nèi)，這也是病例集中在廣才塘村一隊(duì)的原因。

3.5 氣象問題

多殺性巴氏桿菌為條件性致病菌，存在于表觀健康動(dòng)物的呼吸道中[11]，應(yīng)激和環(huán)境因素可引起出血性敗血癥暴發(fā)[1]。在出現(xiàn)疑似病例的前10天，有臺(tái)風(fēng)伴隨持續(xù)強(qiáng)降雨的天氣，氣象因素可能對(duì)多殺性巴氏桿菌病的發(fā)生起著誘導(dǎo)作用。

3.6 研究誤差問題

由于在進(jìn)行病例-對(duì)照研究時(shí)，僅有6個(gè)病例，數(shù)據(jù)比較極端，樣本數(shù)過少可能會(huì)導(dǎo)致在尋找風(fēng)險(xiǎn)因素時(shí)產(chǎn)生誤差。

4 結(jié)論與建議

結(jié)合發(fā)病水牛的臨床癥狀、病理剖檢和實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)，確定本次水牛死亡事件為由多殺性巴氏桿菌引起的牛出敗疫情，病因是外購(gòu)水牛導(dǎo)致疫病傳入，村內(nèi)犬的活動(dòng)對(duì)疫病傳播起著媒介作用，氣象因素對(duì)該病的發(fā)生起著誘導(dǎo)作用。

建議引進(jìn)牛只時(shí)應(yīng)先隔離飼養(yǎng)，不要馬上混群，防止將攜帶的病原微生物傳染給其他動(dòng)物；搞好糞便、墊料等廢棄物的無(wú)害化處理，引導(dǎo)養(yǎng)牛戶改變鋪地晾曬牛糞的習(xí)慣，推薦將牛糞收集起來堆積發(fā)酵；慎重選擇放牧場(chǎng)地，遠(yuǎn)離人畜糞便處理池或其他污染源，雨季應(yīng)遠(yuǎn)離河涌、低洼積水地，選擇地勢(shì)較高、牧草未受污染的場(chǎng)所；定期免疫牛多殺性巴氏桿菌滅活疫苗。

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農(nóng)業(yè)部深入推進(jìn)生豬屠宰質(zhì)量安全專項(xiàng)整治活動(dòng)

農(nóng)業(yè)信息網(wǎng) 2014年11月28日，全國(guó)畜禽屠宰監(jiān)管及生豬屠宰專項(xiàng)整治工作會(huì)議在北京召開。農(nóng)業(yè)部部長(zhǎng)韓長(zhǎng)賦強(qiáng)調(diào)，畜禽屠宰是肉產(chǎn)品走上餐桌的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，在保障食品安全工作中具有十分重要的地位。各級(jí)農(nóng)業(yè)部門要全面貫徹落實(shí)十八屆三中、四中全會(huì)和全國(guó)治理“餐桌污染”現(xiàn)場(chǎng)會(huì)精神，加強(qiáng)調(diào)查研究、加強(qiáng)法規(guī)標(biāo)準(zhǔn)建設(shè)、加強(qiáng)監(jiān)管執(zhí)法，努力確保人民群眾“舌尖上的安全”。

農(nóng)業(yè)部副部長(zhǎng)于康震指出，畜禽屠宰監(jiān)管要以保障畜禽產(chǎn)品質(zhì)量安全為根本目標(biāo)，以優(yōu)化布局、轉(zhuǎn)型升級(jí)、規(guī)范經(jīng)營(yíng)、強(qiáng)化監(jiān)管為首要任務(wù)，以推進(jìn)工廠化屠宰、品牌化經(jīng)營(yíng)、冷鏈化流通、冰鮮化上市、一體化管理為主攻方向，不斷增強(qiáng)畜禽屠宰監(jiān)管能力，加快建立肉品質(zhì)量安全保障體系。要始終堅(jiān)持以確保不發(fā)生屠宰環(huán)節(jié)重大畜禽產(chǎn)品質(zhì)量安全事件為目標(biāo)，突出抓好畜禽屠宰產(chǎn)業(yè)發(fā)展和行業(yè)監(jiān)管這兩個(gè)重點(diǎn)，推動(dòng)落實(shí)地方政府屬地化管理責(zé)任、部門監(jiān)管責(zé)任和屠宰企業(yè)質(zhì)量安全主體責(zé)任，進(jìn)一步強(qiáng)化屠宰企業(yè)設(shè)立審批管理、宰前檢疫、屠宰過程質(zhì)量安全控制和屠宰違法行為查處這四個(gè)環(huán)節(jié)。

Outbreak Investigation of Pasteurella multocida Infection in Buffalo in Sihui，Guangdong

Chen Pingjie1，Han Xue2，Sun Yanwei1，Wan Meimei1，Lu Shousheng1，Xue Nianbo1，Xiong Ying3，Zhou Zhidong3，，Zou Songping3，Gu Jianxin3
（1.Guangdong Animal Health Supervision Institute，Guangzhou，Guangdong 510230；2.China Animal Disease Control Center，Beijing，100026；3.Sihui Bureau of Animal Husbandry and Veterinary，Zhaoqing，Guangdong 526200）

Dead buffalo cases were reported in two villages of Sihui city，Guangdong province on Aug 28，2013. In order to make clear the epidemic situation，f nd out the source of infection and control the disease spread，f eld investigations were carried out. The investigation showed that the attack rate was 9.48%（11/116），the morbidity was 81.82%（9/11），and herd prevalence was 11.54%（6/52）. The disease was diagnosed as hemorrhagic septicemia caused by Pasteurella multocida. By case-control study，it was found that the disease was associated with housing location（P＜0.01） and dogs raised at the farm（P＜0.01）. The outbreak was characterized by housing cluster. Purchasing buffalo might introduce the disease to the villages；dog movement might spread the disease；and the meteorological factors induced the disease outbreak. Some suggestions were proposed such as quarantine，vaccination，biosafety disposal of feces.

buffalo；hemorrhagic septicemia；outbreak investigation；distribution；case-control study；Pasteurella multocida

S858.28

：B

：1005-944X（2015）01-0008-05