胡麗霞 李艷麗

河北省唐山市灤縣畜產(chǎn)品檢測(cè)中心，河北灤縣 063700

快速檢測(cè)技術(shù)在生鮮乳質(zhì)量安全檢測(cè)中的應(yīng)用

胡麗霞 李艷麗

河北省唐山市灤縣畜產(chǎn)品檢測(cè)中心，河北灤縣 063700

乳制品由于其自身營(yíng)養(yǎng)成分豐富，對(duì)人類健康有益，越來(lái)越被更多人認(rèn)可、消費(fèi)，其自身質(zhì)量安全與人民群眾健康息息相關(guān)，如何保證其質(zhì)量安全成為人民群眾最關(guān)心的問題之一?？焖贆z測(cè)技術(shù)因其出具結(jié)果迅速，操作簡(jiǎn)便，靈敏度高等優(yōu)點(diǎn)而被廣泛應(yīng)用于生鮮乳質(zhì)量安全檢測(cè)中。本文著重描述了幾種快速檢測(cè)技術(shù)在生鮮乳質(zhì)量安全檢測(cè)中的應(yīng)用現(xiàn)狀和實(shí)際工作中的一些體會(huì)，供同行參考。

快速檢測(cè)技術(shù)；生鮮乳；質(zhì)量安全；應(yīng)用

隨著人民生活水平的提高，人民的膳食結(jié)構(gòu)也由過(guò)去的以植物性食物供給的溫飽模式向以動(dòng)物性食品為主的富裕模式轉(zhuǎn)變，乳制品等畜產(chǎn)品在飲食結(jié)構(gòu)中所占的比例越來(lái)越大。有人對(duì)60歲以上的老人進(jìn)行過(guò)調(diào)查，其日常飲食結(jié)構(gòu)中，蛋白質(zhì)攝入量不足，建議增加牛奶等含鈣豐富的食品攝入。而液態(tài)奶由于其飲用方便、營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高成為乳制品的最常見商品形式，生鮮乳作為乳制品生產(chǎn)廠家的基本原料，其質(zhì)量的好壞對(duì)乳制品的質(zhì)量起著至關(guān)重要的影響。如何保證其質(zhì)量，多種檢測(cè)方法應(yīng)需而生，如先進(jìn)分析儀器檢測(cè)，或?qū)⑸飳W(xué)技術(shù)應(yīng)用的蛋白質(zhì)芯片、生物傳感器、基于抗原抗體特異性反應(yīng)的酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)法及快速檢測(cè)卡等。本文著重介紹應(yīng)用于生鮮乳質(zhì)量安全檢測(cè)的幾種快速檢測(cè)方法。

1 生鮮乳質(zhì)量可能存在的問題

目前，生鮮乳的質(zhì)量可能存在以下問題。一是不法商人因擔(dān)心生鮮乳的蛋白含量不達(dá)標(biāo)，而唯利是圖，向其中添加可以提高其蛋白含量的劣質(zhì)物品，如三聚氰胺、氯化銨、尿素、皮革等非蛋白氮，或其他非奶物質(zhì)。二是生鮮乳中含有對(duì)人體健康有害的物質(zhì)，如養(yǎng)殖過(guò)程中用于治療疾病的獸藥殘留，為了取得理想檢測(cè)結(jié)果而人為向其中添加的其他有害物質(zhì)，如堿類物質(zhì)、硫氰酸根、β-內(nèi)酰胺酶等。此外，還有由于飼養(yǎng)管理不規(guī)范而使生鮮乳中含有對(duì)人體有害的黃曲霉等有害物質(zhì)。

2 幾種常見快速檢測(cè)方法比較

生鮮乳中摻假以提高蛋白含量的真假蛋白的檢測(cè)可用紫外分光光度法及近紅外光譜檢測(cè)法。三聚氰胺可用高效液相色譜法、液相色譜——串聯(lián)質(zhì)譜方法、拉曼光譜分析法及酶聯(lián)免疫法和快速檢測(cè)卡來(lái)檢測(cè)。紫外分光光度法的實(shí)驗(yàn)原理是利用乳與乳制品的蛋白質(zhì)中有游離的酪氨酸、色氨酸和苯丙氨酸存在的緣故，在280 nm波長(zhǎng)處有特征的最大吸收，且其吸收強(qiáng)度與樣品中蛋白質(zhì)含量呈正比這個(gè)現(xiàn)象，280 nm波長(zhǎng)處，用紫外分光光度計(jì)，通過(guò)吸光度值來(lái)測(cè)定真蛋白質(zhì)量濃度。還有針對(duì)一些不法奶農(nóng)或收奶站為牟取暴利在鮮乳中添加非奶物質(zhì)如植物奶油等勾兌出與牛乳成分接近的假乳，以及通過(guò)劣質(zhì)奶粉調(diào)制的還原乳來(lái)冒充生鮮乳的近紅外光譜檢測(cè)法。液相色譜法成本較高，所用儀器設(shè)備為高效液相色譜儀。本實(shí)驗(yàn)方法的優(yōu)點(diǎn)是前處理較簡(jiǎn)單，約1 h即可得到實(shí)驗(yàn)結(jié)果，且實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性高，人為影響較小。液相色譜——串聯(lián)質(zhì)譜這種新方法使得動(dòng)物組織等復(fù)雜樣品的快速和有效分析更容易。這種檢測(cè)方法靈敏度高，并且非常耐用。拉曼光譜分析法是基于印度科學(xué)家C.V.拉曼（Raman）所發(fā)現(xiàn)的拉曼散射效應(yīng)，對(duì)與入射光頻率不同的散射光譜進(jìn)行分析以得到分子振動(dòng)、轉(zhuǎn)動(dòng)方面信息，并應(yīng)用于分子結(jié)構(gòu)研究的一種分析方法。該方法的優(yōu)點(diǎn)是重現(xiàn)性良好，其檢測(cè)費(fèi)用相對(duì)于液相色譜分析來(lái)說(shuō)較低檢，設(shè)備操作相對(duì)簡(jiǎn)捷，樣品無(wú)需制備，沒有前處理過(guò)程，出具結(jié)果快，適合質(zhì)量安全監(jiān)管部門和乳制品生產(chǎn)企業(yè)現(xiàn)場(chǎng)快速測(cè)定。酶聯(lián)免疫技術(shù)是三大經(jīng)典標(biāo)記免疫技術(shù)之一，是以酶標(biāo)記抗體或抗原為主要試劑的一種標(biāo)記免疫分析技術(shù)。基本原理是將酶與試劑抗原或抗體用交聯(lián)劑結(jié)合起來(lái)，此種酶標(biāo)記抗原或抗體與標(biāo)本中相應(yīng)抗體或抗原發(fā)生特異反應(yīng)，并牢固結(jié)合，在加入相應(yīng)的酶的底物時(shí)，底物被酶催化生成呈色產(chǎn)物，在免疫組化染色時(shí)可指示待測(cè)反應(yīng)物的存在和定位，在酶免疫測(cè)定中，則可根據(jù)呈色物的有無(wú)和呈色深淺作定性或定量觀察。由于此技術(shù)是建立在抗原抗體反應(yīng)和酶的高效催化作用的基礎(chǔ)上，故而該技術(shù)具有檢測(cè)靈敏度高、特異性強(qiáng)、準(zhǔn)確性好等特點(diǎn)。其所需儀器為酶標(biāo)儀，即配套的試劑盒。不同生產(chǎn)廠家的試劑盒的檢測(cè)限有所區(qū)別，一般都低于國(guó)家相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)。其優(yōu)點(diǎn)是特異性高，成本較液相色譜儀低，也能達(dá)到定量檢測(cè)的目的，前處理較簡(jiǎn)單，一次可進(jìn)行多個(gè)樣品的檢測(cè)。其缺點(diǎn)是點(diǎn)板過(guò)程要求嚴(yán)格，各步驟之間銜接性強(qiáng)，前期抗體或抗原固相化不一致對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果影響大。此外常用的快速檢測(cè)卡，其優(yōu)點(diǎn)是無(wú)需其他任何特殊儀器，出具結(jié)果快，美中不足是只能定性不能定量，且實(shí)驗(yàn)操作受外界環(huán)境，例如溫度影響較大。此外還有針對(duì)生鮮乳中的有毒有害物質(zhì)的顯色法、沉淀法等。

3 生鮮乳中常見違禁物質(zhì)的檢測(cè)方法

生鮮乳中常見的有害物質(zhì)有三聚氰胺，可以采用液相色譜法、拉曼光譜法、酶聯(lián)免疫法和膠體金試劑卡來(lái)進(jìn)行檢測(cè)。實(shí)際工作中常用快速檢測(cè)卡進(jìn)行初篩，對(duì)于疑似陽(yáng)性樣品可采用液相色譜法或酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)進(jìn)行復(fù)檢。

生鮮乳中的β-內(nèi)酰胺酶的快速檢測(cè)方法，有報(bào)道建立起了酶聯(lián)免疫法，且檢測(cè)限較低，重復(fù)性較好，前處理簡(jiǎn)單。但是目前這項(xiàng)技術(shù)尚停留在實(shí)驗(yàn)室研究階段還未商品化。實(shí)際工作中多采用快速檢測(cè)卡和杯碟法進(jìn)只能定性檢測(cè)。

生鮮乳中的硫氰酸根的檢測(cè)有離子色譜法、酶聯(lián)免疫法等。離子色譜法由于其操作簡(jiǎn)便，檢測(cè)成本低，可快速出具結(jié)果，較酶聯(lián)免疫法應(yīng)用廣泛。

生鮮乳中皮革水解物的檢測(cè)方法有紫外分光廣度計(jì)法、顯色環(huán)法、氨基酸自動(dòng)分析儀法等。由于紫外分光光度計(jì)法可用于定量檢測(cè)，但是其前處理復(fù)雜，需要在110℃左右水解過(guò)夜，在實(shí)際檢測(cè)中應(yīng)用不廣泛常作為實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)的方法。而顯色環(huán)法前處理簡(jiǎn)單，實(shí)驗(yàn)程序簡(jiǎn)單，短時(shí)間內(nèi)可得出結(jié)果，有的廠家已將其制成商品推廣應(yīng)用，效果不錯(cuò)，但其也有不能定量的缺點(diǎn)。

生鮮乳中黃曲霉M1的檢測(cè)方法有酶聯(lián)免疫法和快速檢測(cè)卡法，這2種方法可配合使用，先用快檢卡初篩，再用酶標(biāo)儀定量。至于生鮮乳中抗生素殘留的檢測(cè)方法有很多，可根據(jù)檢測(cè)目的不同選擇不同的檢測(cè)方法。例如乳制品生產(chǎn)企業(yè)可采用快速檢測(cè)卡對(duì)生鮮乳中的總抗生素量進(jìn)行快速檢測(cè)。而酶聯(lián)免疫和儀器分析法可針對(duì)具體某一種或某一類抗生素進(jìn)行定量檢測(cè)。

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2015-09-08

胡麗霞，女，1980年生，碩士，獸醫(yī)師。