康海燕，董江龍，李 健，陳 蕾，葉立紅，王 艷，王曉靜，王晨雪

(1. 河北省石家莊市第五醫(yī)院，河北 石家莊 050021；2. 河北醫(yī)科大學(xué)第三醫(yī)院，河北 石家莊 050051)

臨床研究

醫(yī)用臭氧自體血回輸對(duì)慢性乙型肝炎患者HBeAg、HBsAg及FibroScan的影響

康海燕1，董江龍2，李 健1，陳 蕾1，葉立紅1，王 艷1，王曉靜1，王晨雪1

(1. 河北省石家莊市第五醫(yī)院，河北 石家莊 050021；2. 河北醫(yī)科大學(xué)第三醫(yī)院，河北 石家莊 050051)

目的觀察醫(yī)用臭氧對(duì)慢性乙型肝炎患者HBeAg、HBsAg及瞬時(shí)肝彈性測(cè)定(FibroScan)的影響，評(píng)估醫(yī)用臭氧在慢性乙型肝炎患者中的抗病毒、抗纖維化作用。方法將120例HBeAg陽性的慢性乙肝患者隨機(jī)分成2組，治療組給予醫(yī)用臭氧自體血回輸治療(采集患者靜脈抗凝全血100 mL，在其中緩慢注入100 mL 30 μg/mL醫(yī)用臭氧，然后再回輸?shù)届o脈)，每周3次；對(duì)照組給予聚乙二醇干擾素α-2a 180 μg皮下注射，每周1次。觀察2組治療4周、8周、12周時(shí)血清HBsAg、HBeAg定量及FibroScan的變化。結(jié)果2組在治療4周、8周、12周時(shí)血清HBsAg、HBeAg定量及FibroScan均逐漸下降(P均<0.05)；2組間各指標(biāo)比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05)；患者血清HBsAg定量、HBeAg定量與FibroScan之間呈正相關(guān)(r=0.764,0.779，P均<0.05)。結(jié)論醫(yī)用臭氧自體血回輸治療慢性乙型肝炎與聚乙二醇干擾素α-2a效果相當(dāng)，其抗病毒、抗纖維化效果確切。

乙型肝炎；醫(yī)用臭氧；聚乙二醇干擾素α-2a；HBeAg定量；HBsAg定量；FibroScan

慢性乙型肝炎在乙型肝炎病毒(HBV)及多種因素作用下，會(huì)導(dǎo)致患者發(fā)生肝細(xì)胞炎癥性損傷，反復(fù)發(fā)作可導(dǎo)致肝纖維化、肝硬化等嚴(yán)重后果，甚至威脅患者生命，因此慢性乙型肝炎的抗病毒、抗纖維化治療日益引起人們重視。目前臨床中常用抗病毒藥物主要為聚乙二醇干擾素和核苷(酸)類似物，聚乙二醇干擾素α-2a是干擾素與分子量為40 kDa聚乙烯二醇的結(jié)合物，是目前乙型肝炎抗病毒治療標(biāo)準(zhǔn)方案中的基礎(chǔ)藥物，其在基因的復(fù)制、表達(dá)等多個(gè)環(huán)節(jié)中發(fā)揮抗病毒作用，主要通過免疫調(diào)節(jié)作用來清除腎臟、肝臟、淋巴結(jié)等重要靶器官的病毒[1]。醫(yī)用臭氧是醫(yī)用氧氣與醫(yī)用純氧通過臭氧發(fā)生器而產(chǎn)生的臭氧混合氣體[2]，由3個(gè)氧原子組成，在空氣中不穩(wěn)定，常溫常壓下約45 min可轉(zhuǎn)化成氧氣。近年醫(yī)用臭氧對(duì)感染性疾病的治療越來越受到關(guān)注。本研究觀察了醫(yī)用臭氧自體血回輸與聚乙二醇干擾素α-2a治療慢性乙型肝炎患者抗病毒、抗纖維化效果，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1 臨床資料

1.1一般資料 選取2013年1月—2015年1月在石家莊第五醫(yī)院診治的慢性乙型肝炎患者120例，均符合《慢性乙型肝炎防治指南》(2010年版)[3]診斷標(biāo)準(zhǔn)：HBV DNA≥1×104IU/mL；HBsAg、HBeAg均陽性；2×正常值上限(ULN)≤ALT≤4×ULN，TBil<2×ULN(40 μmol/L)；肝穿刺組織病理檢查顯示肝組織學(xué)炎癥壞死≥G2，纖維化指數(shù)≥2；治療前6個(gè)月內(nèi)均未抗病毒治療，12個(gè)月內(nèi)未接受免疫調(diào)節(jié)治療。排除失代償期肝硬化者，妊娠期及哺乳期者，合并甲型、丙型、戊型肝炎者，有精神病史、癲癇、惡性腫瘤及自身免疫性疾病者，吸毒或酗酒史者，有癥狀的心臟病者。將患者隨機(jī)分成2組：治療組60例，男28例，女32例；年齡(33.2±11.8)歲；體質(zhì)量(66.8±10.2)kg。對(duì)照組60例，男31例，女29例；年齡(34.1±10.9)歲; 體質(zhì)量(67.1±11.1)kg。2組年齡、性別、體質(zhì)量比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05)。

1.2治療方法 治療組采用醫(yī)用臭氧自體血回輸方法治療。采取患者靜脈抗凝全血100 mL，在其中緩慢注入100 mL 30 μg/mL醫(yī)用臭氧[由醫(yī)用純氧經(jīng)過臭氧發(fā)生器(德國哈斯樂OZONESAN alpha Plus 1107)制備，是純氧與臭氧的混合氣體]，體外與全血充分混合后再回輸給患者，每周3次。對(duì)照組給予聚乙二醇干擾素α-2a(上海羅氏公司，規(guī)格：180 μg/0.5 mL/PFS)180 μg皮下注射，每周1次。2組均治療12周。

1.3檢測(cè)指標(biāo) 觀察2組治療前及治療第4周、第8周、第12周HBsAg定量、HBeAg定量、瞬時(shí)肝彈性測(cè)定(FibroScan)情況。HBsAg、HBeAg定量檢測(cè)試劑盒由美國羅氏公司提供，并采用Elescys Ⅱ檢測(cè)系統(tǒng)檢測(cè)。FibroScan參照FibroScan用戶手冊(cè)操作由我院功能科接受過專業(yè)培訓(xùn)的醫(yī)師來操作，檢測(cè)儀器購自法國ECHOSENS公司。檢測(cè)部位一般選擇右側(cè)腋前線至腋中線第7，8，9肋間，每位患者進(jìn)行連續(xù)10次的彈性回波檢測(cè)，取10次的中位數(shù)為最終結(jié)果。因FibroScan受轉(zhuǎn)氨酶影響較大，故在選取患者入組時(shí)限定轉(zhuǎn)氨酶于2～4倍。

2 結(jié) 果

2.12組治療前及治療4周、8周、12周血清HBsAg定量比較 隨治療時(shí)間的延長，2組HBsAg定量均逐漸下降(P均<0.05)。2組間各治療時(shí)間點(diǎn)比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05)。見表1。

表1 2組治療前及治療4周、8周、12周血清HBsAg定量比較

2.22組治療前及治療4周、8周、12周血清HBeAg的S/CO值比較 隨治療時(shí)間的延長，2組血清HBeAg的S/CO值均逐漸下降(P均<0.05)。2組間各治療時(shí)間點(diǎn)比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05)。見表2。

表2 2組治療前及治療4周、8周、12周血清HBeAg的S/CO值比較

2.32組治療前及治療4周、8周、12周FibroScan比較 隨治療時(shí)間的延長，2組FibroScan均逐漸下降(P均<0.05)。2組間各時(shí)間點(diǎn)FibroScan比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05)。見表3。

表3 2組治療前及治療4周、8周、12周FibroScan比較

2.4相關(guān)性分析 患者血清HBsAg定量、血清HBeAg定量與FibroScan之間呈正相關(guān)(r=0.764，0.779，P均<0.05)。

2.5不良反應(yīng) 2例患者在行醫(yī)用臭氧自體血回輸過程中出現(xiàn)輕微皮疹；36例患者在皮下注射聚乙二醇干擾素初期出現(xiàn)發(fā)熱，體溫最高達(dá)38 ℃，持續(xù)1～3 d后自行緩解。2組均未發(fā)生嚴(yán)重不良反應(yīng)。

3 討 論

慢性乙型肝炎在我國有較高的發(fā)病率，嚴(yán)重威脅患者生命健康和生活質(zhì)量，為控制乙型肝炎患者病情進(jìn)展，提高生存質(zhì)量，延長生存期，需要對(duì)慢性乙型肝炎患者進(jìn)行抗病毒治療。聚乙二醇干擾素是干擾素與聚乙烯二醇的結(jié)合物，半衰期大約為普通干擾素的10 倍，因而治療間期可延長為每周1 次，二者結(jié)合后并不影響干擾素的活性中心，同時(shí)還能降低其免疫原性，延緩干擾素被酶水解失活的速度，從而使得干擾素抗體產(chǎn)生率減小。

醫(yī)用臭氧近年逐漸應(yīng)用于肝病領(lǐng)域，具有安全、多作用效應(yīng)特點(diǎn)，其可以通過誘導(dǎo)人體產(chǎn)生大量免疫細(xì)胞、細(xì)胞因子如干擾素、白細(xì)胞介素、轉(zhuǎn)化生長因子等來發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用，進(jìn)而激活免疫系統(tǒng)，抑制并殺滅部分病毒感染細(xì)胞的作用；醫(yī)用臭氧還能提高紅細(xì)胞的代謝，增加血紅蛋白攜氧能力，進(jìn)而改善肝臟的供氧，其還可以誘導(dǎo)激活細(xì)胞產(chǎn)生抗氧化酶，提高腺苷量和降低黃嘌呤水平的作用來清除慢性炎癥過程中形成的自由基，對(duì)肝臟有保護(hù)作用。此外，臭氧本身及其產(chǎn)生的過氧化物可以直接作用于病毒外膜結(jié)構(gòu)，影響病毒對(duì)于宿主細(xì)胞的感染能力[4]。

HBV DNA是HBV感染及傳染的直接標(biāo)志，HBsAg是HBV的外膜蛋白，在病毒感染肝細(xì)胞中起主要作用，本身不具有傳染性。有研究表明血清HBsAg效價(jià)與共價(jià)閉合環(huán)狀DNA(cccDNA)和肝內(nèi)HBV DNA水平顯著相關(guān)[5]。cccDNA是HBV DNA在宿主細(xì)胞核內(nèi)的存在形式，是HBV持續(xù)感染的關(guān)鍵因素，其在一定程度上代表著肝細(xì)胞的病毒感染數(shù)量，導(dǎo)致了慢性乙型肝炎的發(fā)生。HBeAg是HBV核心基因的一部分，在HBV復(fù)制過程中，前C 基因與C 基因一起形成的P25 前體多肽鏈在蛋白酶作用下，將前C RNA編碼前C蛋白裂解為HBeAg，血清HBeAg滴度與慢性乙型肝炎的免疫狀態(tài)及病毒抑制程度有關(guān)， HBeAg可阻斷細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞，影響免疫宿主活性，可以引起HBcAg特異性T細(xì)胞耐受，導(dǎo)致宿主對(duì)HBV感染的免疫應(yīng)答減弱，促使HBV持續(xù)性感染[6]。本研究結(jié)果顯示，2組治療4周、8周、12周時(shí)血清HBsAg定量、HBeAg定量均逐漸下降，而2組間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說明2種治療方法均可有效降低肝細(xì)胞內(nèi)的病毒活動(dòng)，促進(jìn)肝細(xì)胞修復(fù)，且2種治療方法的抗病毒效果無優(yōu)劣之分。

肝纖維化是指肝細(xì)胞發(fā)生炎癥壞死時(shí)，肝臟中的細(xì)胞外基質(zhì)發(fā)生增生和降解的失衡，進(jìn)而引起肝細(xì)胞外基質(zhì)沉積所致，隨病情進(jìn)展，當(dāng)肝纖維化達(dá)到一定程度，會(huì)導(dǎo)致假小葉形成，這就是肝硬化的病理基礎(chǔ)[7]。慢性乙型肝炎遷延不愈會(huì)引起肝纖維化，因此抗纖維化是阻滯病情發(fā)展的重要環(huán)節(jié)。FibroScan是由法國EchosensSA公司發(fā)明并生產(chǎn)的新型肝纖維化體外檢測(cè)設(shè)備，是基于超聲原理下，通過超聲探頭的瞬時(shí)彈性成像技術(shù)，超聲轉(zhuǎn)換器獲取剪切波信號(hào)，并測(cè)量剪切波的速度，計(jì)算出肝臟的硬度數(shù)值，進(jìn)而對(duì)慢性肝病、肝纖維化起到一個(gè)無創(chuàng)檢測(cè)的目的。已有研究證明FS值與慢性乙型肝炎肝纖維化分期有較好相關(guān)性[8]。本研究結(jié)果顯示，2組治療4周、8周、12周時(shí)FibroScan逐漸下降，2組間各治療節(jié)點(diǎn)間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說明2種方法均可有效改善患者的肝纖維化程度，但2種方法抗纖維化效果無優(yōu)劣之分。本研究結(jié)果還表明，血清HBsAg定量、HBeAg定量與FibroScan呈正相關(guān)性，提示患者病毒復(fù)制水平較前下降，同時(shí)纖維化程度亦較前減輕，進(jìn)而反映醫(yī)用臭氧自體血回輸與聚乙二醇干擾素α-2a治療慢性乙型肝炎的抗病毒、抗纖維化療效確定。

綜上所述，醫(yī)用臭氧自體血回輸與聚乙二醇干擾素α-2a治療慢性乙型肝炎的抗病毒、抗纖維化近期療效相當(dāng)。但醫(yī)用臭氧應(yīng)用較為安全，可以用于有干擾素治療禁忌證患者，如有精神病史、癲癇、吸毒或酗酒史者，為慢性乙型肝炎患者的臨床治療多了一個(gè)選擇途徑。但本研究觀察時(shí)間短，繼續(xù)治療的抗病毒、抗纖維化效果及停藥后的持續(xù)應(yīng)答情況有待確定。

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Effect of medical ozone autologous blood transfusion on FibroScan, HBsAg and HBeAg in patients with chronic hepatitis B

KANG Haiyan1, DONG Jianglong2, LI Jian1, CHEN Lei1, YE Lihong1, WANG Yan1, WANG Xiaojing1, WANG Chenxue1

Objective It is to observe the influence of medical ozone on HBeAg, HBsAg and transient liver elasticity (FibroScan) in patients with chronic hepatitis B, and evaluate the antiviral and anti fibrosis effects of medical ozone in the treatment of chronic hepatitis B patients. Methods 120 patients with HBeAg positive chronic hepatitis B were randomly divided into two groups. The patients in the treatment group was treated with medical ozone autologous blood transfusion (anticoagulant venous blood 100 mL was collected from patients, which was slowly injected into the 100 mL 30 μg/mL of medical ozone, and then returned to the vein), three times a week; the patients in the control group were treated with the polyethylene glycol interferon α-2a 180 μg by subcutaneous injection, once a week. The changes of serum HBeAg, HBsAg quantification and FibroScan value in the treatment of 4 weeks, 8 weeks, and 12 weeks were observed. Results The serum HBsAg, HBeAg quantification and FibroScan value in the treatment of 4 weeks, 8 weeks, 12 weeks were gradually decreased in the two groups (allP<0.05); and there was no significant difference between the two groups (P>0.05). There was positive correlation between serum HBsAg, HBeAg quantification with FibroScan value (r=0.764, 0.779, allP<0.05). Conclusion The effcet of medical ozone autologous blood transfusionin in the treatment of chronic hepatitis B is similar to polyethylene glycol interferon α-2a, and it has the definite effect of anti viral and anti fibrosis.

hepatitis B; medical ozone; polyethylene glycol interferon α-2a; HBeAg quantification; HBsAg quantification; FibroScan

10.3969/j.issn.1008-8849.2015.33.009

R512.62

B

1008-8849(2015)33-3675-03

2015-03-30

(The 5th Hospital of Shijiazhuang City, Shijiazhuang 050021, Hebei, China; 2.The 3rd Hospital of Hebei Medical University, Shijiazhuang 050051, Hebei, China)