黃盛芳 羅盛娟 阮錚艷 孟麗萍 莫承燕 蘆 平 金維俊 袁 平

貴州省都勻市計劃生育婦幼保健服務(wù)中心(558000)

·調(diào)查研究·

貴州省都勻市布依族中學(xué)生地中海貧血基因攜帶率調(diào)查

黃盛芳 羅盛娟 阮錚艷 孟麗萍 莫承燕 蘆 平 金維俊 袁 平

貴州省都勻市計劃生育婦幼保健服務(wù)中心(558000)

目的：了解貴州省黔南州都勻市布依族中學(xué)生地中海貧血攜帶率及常見突變基因類型和頻率。 方法：對1700名3代以上均為布依族的布依族中學(xué)生進行地中海貧血血液學(xué)篩查。血液學(xué)表型運用邁瑞DC-5390型血細胞分析儀進行檢測。對靜脈血平均紅細胞體積≤82 fl和平均紅細胞含量≤27 pg的436人進行地中海貧血基因檢測。結(jié)果：在1700人中檢出①α-地中海貧血基因缺失184人，基因缺失率10.8%，依次為α-地貧1基因(SEA)(45.1%)、α-地貧2基因(3.7)(39.1%)、α-地貧2基因(4.2)(13.1%)、α-地貧1基因+α-地貧2基因1.63%、α-地貧2基因(3.7+4.2)雙重雜合子1.07%。②β-地中海貧血突變基因119人，攜帶率7.0%，檢測突變基因4種，依次為CD17(52.94%)、CD41-42(42.86%)、BE(2.52%)、-28(1.68%)。結(jié)論：貴州省都勻市布依族中學(xué)生α-地中海貧血基因缺失率10.8%，β-地中海貧血攜帶率為7.0%。實施群體篩查、遺傳咨詢、改變舊的婚育觀念，指導(dǎo)合理婚配，對預(yù)防重癥地貧兒的出生，提高出生人口素質(zhì)，具有深遠的意義。

地中海貧血；攜帶率；布依族 ； 中學(xué)生；遺傳；篩查

地中海貧血(簡稱地貧)為常染色體隱性遺傳病，由于目前缺乏對重癥地貧的有效治療方法，因此實施群體篩查、遺傳咨詢、改變舊的婚育觀念，指導(dǎo)合理婚配，孕前優(yōu)生健康檢查，對防止重癥地貧患兒的出生具有重要意義。我國南方屬于地貧的高發(fā)區(qū)，其中廣東、廣西兩省區(qū)的β-地貧發(fā)生率為2.54%～3.36%[1]和4.8%～6.78%[2]，a-地貧發(fā)生率為8.53%和14.90%[2]。貴州省黔南布依族苗族自治州都勻市是一個多民族聚居地區(qū)，少數(shù)民族占67.8%，而布依族占總?cè)丝诘?0%。本課題組于2014年8～12月對都勻市12～17歲的1700名3代以上均為布依族的布依族中學(xué)生進行地貧篩查。

1 對象與方法

1.1 研究對象

納入都勻市轄區(qū)，布依族聚居的墨沖鎮(zhèn)、河陽鄉(xiāng)、良畝鄉(xiāng)、沙寨鄉(xiāng)、平浪鎮(zhèn)、凱口鎮(zhèn)、石龍鄉(xiāng)、甘塘鎮(zhèn)、沙包堡鎮(zhèn)、江州鎮(zhèn)的10所鄉(xiāng)鎮(zhèn)中學(xué)3代及以上均為布依族的布依族學(xué)生，男女不限，研究對象均自愿參加此項目檢查。

1.2 標本采集

整群抽樣的方法抽取1700名布依族學(xué)生，靜脈取血2.0ml。所有樣品均進行紅細胞參數(shù)分析。運用邁瑞DC-5390型血細胞分析儀進行血液學(xué)表型檢測。靜脈血平均紅細胞體積≤82fl且平均紅細胞含量≤27pg,為地貧初篩陽性。對其進行地貧基因檢測。首先用GAP-PCR法檢測3種常見缺失(-α3.7，-α4.2，--SEA)，然后用PCR結(jié)合反向斑點雜交法檢測17個常見突變位點(β0包括Int,CD41-42,CD31,CD14-15,CD17,CD71-72,IVS-I-1,CD43,CD27/28和β+包括IVS-II-654,-28,-29,-30,-32,CAP,IVS-I-5,BE)。

2 結(jié)果

2.1 α-地貧基因型分析

在1700份外周靜脈血樣品中，血液學(xué)參數(shù)檢出表型陽性446例，對436例進行地貧基因分型(10例失訪)。檢測出α-地貧基因缺失184人，基因缺失率10.8%。依次為α-地貧1基因(--SEA)83例(45.1%)，α-地貧2基因(-α3.7)72例(39.1%)，α-地貧2基因(-α4.2)24例(13.1%)，α-地貧1基因+α-地貧2基因3例(1.63%)，α-地貧2基因(-α3.7和-α4.2)雙重雜合子2例(1.07%)。在184例α-地貧攜帶者中有104例紅細胞數(shù)超過正常值范圍，占56.5%。見表1。

表1 184例α-地貧基因型分析

2.2 β-地貧基因型分析

地貧分型分析時檢測出β-地貧基因突變119例，檢出突變基因4種，攜帶率7%。其中，β-地貧基因CD17位點突變比例最高為63例，占52.94%；其次β-地貧基因CD41-42位點突變?yōu)?1例，占42.86%；β-地貧基因BE位點突變3例,占2.52%；β-地貧基因-28位點突變2例，占1.68%。在119例β地貧攜帶者中血紅蛋白低于正常值范圍的有87例, 其中76例紅細胞數(shù)超過正常值范圍，占87.4%，32例血紅蛋白在正常范圍內(nèi)，只有3例紅細胞數(shù)在正常范圍，占9.38%。見表2。在未檢測出α-地貧基因缺失(-α3.7、-α4.2、--SEA)和β-地貧基因突變(17種突變)的153例中，有90.8%血紅蛋白正常，紅細胞數(shù)也在正常范圍內(nèi)。提示我們在血常規(guī)檢查過程中，平均紅細胞體積≤82fl和平均紅細胞含量≤27pg, 血紅蛋白低于正常范圍，而紅細胞數(shù)超過正常范圍，地貧基因攜帶可能性較大。

表2 119例β-地貧基因型分析

3 討論

本研究發(fā)現(xiàn)都勻市布依族中學(xué)生地中海貧血攜帶率為16.65%，其中α-地貧攜帶率為10.8%，β-地貧攜帶率為7.0%，α+β-地貧攜帶率為1.18%。因重型α-地貧多在孕后期或出生后即死亡，現(xiàn)針對β-地貧加以討論。

都勻市布依族中學(xué)生β-地貧攜帶率(7%)高于貴州省少數(shù)民族地區(qū)人群平均攜帶率(5.4%)[3]，亦明顯高于全國平均水平(0.67%)[4]，低于貴州黔西布依族檢出率(7.4%)[5]。突變基因分析結(jié)果顯示以CD17雜合子占首位，其次是CD41-42雜合子，占所有突變的95.8%，BE和-28位點基因突變列第3。同時16.8%的β-地貧攜帶者合并有α-地貧。

以上結(jié)果表明同一國家、不同地區(qū)、不同民族因其特有的遺傳背景，地貧基因突變的構(gòu)成也不相同。在經(jīng)濟落后的少數(shù)民族地區(qū)，應(yīng)用血常規(guī)進行地貧初篩，實施未婚青年群體篩查、遺傳咨詢、指導(dǎo)合理婚配和孕前、孕期檢查中及產(chǎn)前診斷上要有針對性。既是把預(yù)防措施落實在妊娠之前，也是推動出生缺陷預(yù)防關(guān)口前移。不僅能增強群眾的優(yōu)生意識，還能從源頭上降低重癥地貧發(fā)生的風(fēng)險。對預(yù)防重癥地貧兒的出生，提高出生人口素質(zhì)和少數(shù)民族地區(qū)政府部門制定優(yōu)生健康及惠民政策提供科學(xué)依據(jù)具有深遠的意義。

[1] 徐湘民，廖燦，劉忠英,等β地中海貧血的人群篩查及產(chǎn)前診斷[J].中華醫(yī)學(xué)遺傳雜志，1996,13(5)：258.

[2] 蔡稔，李莉艷，梁昕，等.柳州市城鎮(zhèn)人群α和β地中海貧血的發(fā)生率調(diào)查和基因型鑒定[J].中華流行病學(xué)雜志,2002,23(4):281-284.

[3] 喻芳，鐘春琍，周強，等.貴州少數(shù)民族地區(qū)β-地中海貧血的分子流行病學(xué)研究[J].中華醫(yī)學(xué)遺傳雜志,2010,27(6):700-703.

[4] 全國血紅蛋白病研究協(xié)作組. 20省、市、自治區(qū)60萬人血紅蛋白病調(diào)查[J].中華醫(yī)藥雜志，1983，63:382-385.

[5] 馬驕，謝淵，齊曉嵐，等.貴州黔西部分少數(shù)民族β-地中海貧血血液學(xué)篩查[J].貴陽醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2004,29(1):218-220.

[責(zé)任編輯：王麗娜]

Research on the rate of thalassaemia gene carrying in the middle school students of Bouyei Nationality in Duyun city of Guizhou Province

HUANG Shengfang, LUO Shengjuan, RUAN Zhengyan, MENG Liping, MO Chengyan, LU Ping, JIN Weijun, YUAN Ping

MaternalandChildHealthCareandFamilyPlanningServiceCenterofDuyunCity,Duyun,Guizhou558000

Objective: To study the thalassaemia gene carrying rate, common mutation types, and its frequency in middle school students of Bouyei Nationality from Duyun of Qiannan Prefecture in Guizhou Province. Methods: 1700 middle school students who all up to three generations Bouyei people were screened for thalassaemia hematology. Testing haematological phenotype by MINDRAY DC-5390 blood cell analyzer was used. Mediterranean anaemia gene was detected in 436 people, whose average red blood cells in venous blood volume were ≤ 82 fl and average content of erythrocyte were ≤ 27 pg. Results: In the 1700 students, 184 of them were found the alpha thalassemia gene deletion, rate of 10.8%, which including alpha thalassemia I gene (SEA) (42.86%), alpha thalassemia II gene(3.7) (32.2%), alpha thalassemia II gene(4.2)(13.1%), alpha thalassemia and alpha thalassemia II gene(1.63%), and alpha thalassemia double heterozygote gene(3.7+4.2)(1.07%). 119 of them were found the beta thalassemia mutation gene, carrying rate of 7% and four kinds of mutation gene were CD17 (52.94%), D41-42 (42.86%), BE (2.52%), -28 (1.68%). Conclusion: The alpha thalassemia gene deletion rate and the beta thalassaemia carrying rate in Bouyei middle school students were 10.8% and 7%. It is important for controlling the birth of children with thalassemia major and improving the quality of the newborn by population screening, genetic counseling, the old concept of marriage and childbirth change, and rational marriage guiding.

Thalassaemia gene carrying rate carrying rate； Bouyei Nationality； Middle school students

2015-02-02

2015-05-08

10.3969/j.issn.1004-8189. 2015.10