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        具有突變和血緣關(guān)系的親子鑒定案例分析

        2015-03-05 02:51:06任靜妮龔肖清張倍銘黃湘婷梁睿熙辛麗梅

        喻 芳 任靜妮 龔肖清 張倍銘 朱 江 黃湘婷 王 馨 梁睿熙 辛麗梅

        貴州省人口和計(jì)劃生育科學(xué)研究技術(shù)指導(dǎo)所(貴陽(yáng),550004)

        親子鑒定主要是通過(guò)對(duì)遺傳基因的檢測(cè),根據(jù)孟德?tīng)栠z傳規(guī)律判定被檢者之間是否存在生物學(xué)親生關(guān)系。短串聯(lián)重復(fù)序列(STR)的應(yīng)用極大地提高了親子鑒定能力[1],已成為親子鑒定的主要手段[2],但與傳統(tǒng)的遺傳標(biāo)記(如紅細(xì)胞血型、酶型和血清蛋白型等)相比,STR基因座突變率較高[2-3],遺傳突變使親子之間的遺傳關(guān)系不符合遺傳規(guī)律;當(dāng)爭(zhēng)議父(母)與真父(母)有血緣關(guān)系時(shí),爭(zhēng)議父(母)與孩子之間(如祖孫、叔侄、姨甥等)就會(huì)有同源基因,而且血緣越近,有同源基因的STR基因座就會(huì)越多。這種情況下就會(huì)給親子鑒定尤其是單親案件的分析鑒定帶來(lái)困難?,F(xiàn)就本單位受理的兩例典型案例作一淺析。

        1 資料背景

        1.1 資料

        2例親子鑒定案例均系紀(jì)檢部門委托,案例1要求鑒定爭(zhēng)議父1和爭(zhēng)議父2與孩子的親生血緣關(guān)系,爭(zhēng)議父1和爭(zhēng)議父2是親兄弟;案例2要求鑒定父母與孩子親生血緣關(guān)系,有領(lǐng)養(yǎng)其親戚小孩的背景。

        1.2 方 法

        應(yīng)用無(wú)錫中德美聯(lián)公司 AGCU EX-22、21+1加上性別基因共40個(gè)STR基因座,用Genomappe軟件將等位基因標(biāo)準(zhǔn)Ladder中的片段與樣本進(jìn)行比較,確定樣本的基因分型。

        1.3 判斷標(biāo)準(zhǔn)

        根據(jù)《親權(quán)鑒定技術(shù)規(guī)范》(SF/Z JD0105001-2010),3個(gè)以上基因座不符合遺傳規(guī)律可排除親權(quán)關(guān)系,若基因座符合遺傳規(guī)律,計(jì)算親權(quán)指數(shù)PI,累計(jì)親權(quán)指數(shù)CPI≥10000支持親權(quán)關(guān)系存在;“二聯(lián)體親權(quán)指數(shù)計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)”、“二聯(lián)體中存在不符合遺傳規(guī)律的遺傳標(biāo)記時(shí)親權(quán)指數(shù)計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)”參照《親權(quán)鑒定技術(shù)規(guī)范》和單親案鑒定的判斷標(biāo)準(zhǔn)[4]。

        2 結(jié)果

        2.1 案 例1

        STR基因座分型見(jiàn)表1。從表1檢測(cè)結(jié)果分析,AGCU EX22STR復(fù)合擴(kuò)增體系結(jié)果顯示爭(zhēng)議父1排除2個(gè)位點(diǎn),不能下排除結(jié)論;爭(zhēng)議父2在vWA基因座不符合遺傳規(guī)律,通常會(huì)考慮發(fā)生突變,按突變基因座計(jì)算 PI值,CPI 3.2146E+04>10000,可下認(rèn)定親權(quán)關(guān)系。但因考慮到爭(zhēng)議父1、父2是親兄弟關(guān)系,僅做AGCU EX22STR復(fù)合擴(kuò)增體系下結(jié)論有風(fēng)險(xiǎn),我們加做AGCU 21+1體系,40個(gè)STR基因座分型結(jié)果顯示爭(zhēng)議父1排除3個(gè)位點(diǎn)以上,可排除爭(zhēng)議父1;爭(zhēng)議父2僅一個(gè)位點(diǎn)不符合,按突變基因座計(jì)算PI值,累計(jì)親權(quán)指數(shù) >10000,不排除親生關(guān)系,支持親權(quán)關(guān)系存在。

        2.2 案 例2

        STR基因座分型見(jiàn)表2。從表2檢測(cè)結(jié)果分析,爭(zhēng)議父很明顯排除親緣關(guān)系,爭(zhēng)議母在AGCU EX22體系中只排除2個(gè)位點(diǎn),不能下排除結(jié)論。慮到爭(zhēng)議母和孩子親生母親有可能具有血緣關(guān)系,我們加做AGCU21+1后排除位點(diǎn)達(dá)3個(gè)以上,可下排除結(jié)論。

        表1 爭(zhēng)議父1、父2和孩子40個(gè)STR基因座分型結(jié)果

        表2 爭(zhēng)議父、母和孩子40個(gè)STR基因座分型結(jié)果

        3 討論

        在單親親子鑒定時(shí),由于父子(或母子)組合缺少母親(或父親)的遺傳信息,勢(shì)必在排除信息親權(quán)指數(shù) (似然率)和RCP值等方面都要低于父、母、子組合的親子鑒定,影響到親子鑒定的準(zhǔn)確性。而且,在實(shí)踐中經(jīng)常會(huì)遇到是爭(zhēng)議父(或母)和孩子親生父(或母)具有較近的血緣關(guān)系,若不注意咨詢委托方或當(dāng)事人,很可能將面臨的是具有血緣關(guān)系且是單親的親子鑒定,如果再遇上有突變位點(diǎn),將面臨較大風(fēng)險(xiǎn)。

        STR基因座具有高度多態(tài)性,有很高的非父排除率,同時(shí)STR的突變率也很高,使本來(lái)是親生的父子之間也會(huì)出現(xiàn)不符合遺傳規(guī)律的現(xiàn)象(即出現(xiàn)矛盾基因座),使得解釋實(shí)驗(yàn)結(jié)果變得困難。在實(shí)施親子鑒定時(shí)發(fā)現(xiàn)矛盾基因座現(xiàn)象時(shí),需要設(shè)法確定是突變?cè)斐傻模€是被檢查者之間本來(lái)就不存在親生關(guān)系(特別是具有血緣關(guān)系單親案件),也是用STR進(jìn)行親子關(guān)系鑒定可能潛在錯(cuò)誤的原因之一。如果所檢驗(yàn)的男子(或者女子)與孩子的真父(母)可能有親緣關(guān)系時(shí),會(huì)減少矛盾基因座的數(shù)量。有血緣關(guān)系時(shí),爭(zhēng)議父(母)與孩子之間(如祖孫、叔侄、姨甥等)就會(huì)有同源基因,而且血緣越近有同源基因的STR基因座就會(huì)越多。本文案例1爭(zhēng)議父1和爭(zhēng)議父2在AGCU EX22STR復(fù)合擴(kuò)增體系有20個(gè)同源基因,因此,鑒定時(shí)要充分考慮到血緣關(guān)系的影響再下結(jié)論。

        STR產(chǎn)生突變的機(jī)制是復(fù)制時(shí)的模板滑動(dòng)。突變時(shí)產(chǎn)生1個(gè)重復(fù)單位的變化占突變總數(shù)的90%以上[6]。如果在矛盾基因座上爭(zhēng)議父所能提供的等位基因和孩子的生父基因之間相差超過(guò)1個(gè)重復(fù)單位,更傾向于排除他們之間有親生關(guān)系。父系突變高于母系突變(相差約6倍),在母子親權(quán)鑒定時(shí)應(yīng)該應(yīng)用不同的策略。

        因此,在受理親子鑒定司法案件時(shí),盡量要求提供父、母樣本。單親親子鑒定應(yīng)檢驗(yàn)更多的STR基因座,若遇到有STR突變不要輕易下排除,有血緣關(guān)系時(shí)不要輕易下肯定。單親案在無(wú)法否定爭(zhēng)議父或爭(zhēng)議母是真父或真母的近親屬時(shí),即使沒(méi)有發(fā)現(xiàn)矛盾基因座,也只作出“不排除親生關(guān)系”的結(jié)論。單親案鑒定起碼要檢測(cè)18個(gè)STR基因座以上,若發(fā)現(xiàn)矛盾基因座,要增加檢測(cè)至≥40個(gè)。按公式計(jì)算PI值>10 000后,才可以做出“不排除親生關(guān)系”或“支持存在親生關(guān)系”的結(jié)論;若發(fā)現(xiàn)3個(gè)以上矛盾基因座,則應(yīng)作出否定“親生關(guān)系”的結(jié)論[4]。目前法醫(yī)學(xué)廣泛使用的 Powerplex、IdentifilerTM、SinofilerTM、DNATyper TM15Plus、ACGU EX22、基點(diǎn)20A復(fù)合擴(kuò)增體系均具有較高的個(gè)體識(shí)別率和非父排除率,通常檢測(cè)這些試劑盒的STR基因座已能基本滿足法醫(yī)物證中個(gè)體識(shí)別和親子鑒定的檢測(cè)要求,但在單親鑒定出現(xiàn)了突變、有血緣關(guān)系可能的案件中,我們的經(jīng)驗(yàn)通常若只單做一個(gè)STR試劑盒或加做以上常用STR試劑盒很難下結(jié)論,因?yàn)樗麄兌加?3個(gè)CODIS基因座重復(fù),加做ACGU 21+1擴(kuò)增體系,往往可提高系統(tǒng)效能,滿足鑒定需求[7]。

        [1] Collete D,Sabine F,ceclle F,et al.A comprehensive genetic map of the human genome based on 5264microsatellites[J].Nature,1996,380(14):152-154.

        [2] America Association of Blood Banks.Annual report summary for testing in 2002 [DB/OL].http://www.aabb.org/about_the_AABB/stds_and_Accred/ptannrpt02.pdf.2003-11-01.

        [3] Brinkman B,klintschar M,Neuhuber F,et al.Mutation rate in human microsatellites:influence of the structureand length of the tandem repeat[J].Am J Hum Genet,1998,62(6):1408-1415.

        [4] 伍新堯,童大躍,朱運(yùn)良,等.用STR分型技術(shù)作親權(quán)鑒定時(shí)判斷標(biāo)準(zhǔn)的研究 [J].中山大學(xué)學(xué)報(bào),2010,31(1):1-6.

        [5] 侯一平,吳瑾,顏靜,等.考慮突變影響的親子鑒定父權(quán)指數(shù)計(jì)算[J].中華醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)雜志,2008,25(2):176-178.

        [6] 朱運(yùn)良,黃艷梅,伍新堯,等.單親案親權(quán)鑒定結(jié)果判定策略[J].法醫(yī)學(xué)雜志,2006,22(4):281-284.

        [7] 邵偉波,張素華,李莉,等.21個(gè)非CODIS STR基因座的遺傳多態(tài)性 [J].法醫(yī)學(xué)雜志,2011,27(1):36-38.

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