毛姍

·藥物與臨床·

GC法測定人血漿中卵磷脂絡(luò)合碘藥物濃度及生物等效性的研究

毛姍

目的 對氣相色譜法(GC)測定人血漿中卵磷脂絡(luò)合碘藥物濃度及生物等效性進行研究。方法 6例健康受試者作為研究對象, 隨機分別服用受試制劑和參比制劑。結(jié)果 使用曲線下面積(AUCO-t)進行計算, 卵磷脂絡(luò)合碘膠囊的相對生物利用率93.4%~120.0%；使用AUCO-∞進行計算, 卵磷脂絡(luò)合碘膠囊的相對生物利用率59.9%~134.7%。結(jié)論 GC法測定人血漿中卵磷脂絡(luò)合碘藥物濃度可行性強, 適合于臨床推廣應(yīng)用；兩種制劑體內(nèi)生物總用等效, 臨床應(yīng)給予高度重視。

氣相色譜法；血漿監(jiān)測；卵磷脂絡(luò)合碘；生物等效性

由于含有碘元素的藥物性質(zhì)比較特殊, 人們通常會使用電化學(xué)法、動力學(xué)光譜法等手段檢測含碘藥物中, 碘元素的濃度。不過, 截止到目前為止, 有關(guān)人血漿中卵磷脂絡(luò)合碘濃度測定的課題報道仍然十分少見［1］。為此, 本文采用GC法,通過對人血漿中卵磷脂絡(luò)合碘的定量分析, 對卵磷脂絡(luò)合碘的生物等效性進行研究, 為進一步臨床研究奠定良好基石?，F(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 本次試驗經(jīng)南陽醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校倫理委員會批準(zhǔn)后, 正式啟動。在所有志愿者中, 選取6例健康男性受試者, 全體受試者均知曉本次實驗詳情, 簽署知情同意書后正式參與本次研究。6例健康男性受試者年齡23~31歲, 平均年齡(27.0±5.8)歲；體重63~74 kg, 平均體重(68.5±5.2)kg；身高175~184 cm, 平均身高(179.5±4.5)cm。全體受試者經(jīng)體檢, 未發(fā)現(xiàn)血常規(guī)、尿常規(guī)、心電圖、肝、腎功能異常。經(jīng)詢問調(diào)查, 所有受試者均無煙酒嗜好, 參與實驗前4周內(nèi)未服用任何藥物。

1.2 方法 使用雙制劑雙周期隨機交叉試驗, 將6例健康男性以自身為對照, 隨機交叉, 分別服用受試制劑和參比制劑。全體受試者在正式參與研究前1 d, 飲食以清淡、易消化食物為主, 晚上8：30以后禁止進食。研究開始當(dāng)日, 所有受試者晨起在空腹?fàn)顟B(tài)下服用藥物, 服用藥物為卵磷脂絡(luò)合碘受試劑或參比制劑各8片(粒)［含碘100 μg/片(粒)］。服藥后5 h內(nèi)不可進食, 5 h后可食用無碘、低碘一類的食物。實驗過程中, 醫(yī)護人員應(yīng)密切關(guān)注患者生命體征, 做好充分的搶救工作, 以便不時之需。

血藥濃度測定：精取空白血漿0.45 ml, 加入碘化鉀系列標(biāo)準(zhǔn)溶液0.05 ml, 制成濃度為0.04、0.12以及0.2 μg/ml的質(zhì)量控制樣品。精取血樣0.05 ml并加入0.45 ml空白血漿。兌入5 ml蒸餾水均勻攪拌后加入2.5 mol/L硫酸0.1 ml。搖勻后加入0.2 ml濃度為0.5 g/L的硫代硫酸鈉, 搖勻后加入0.5 ml丁酮, 混合均勻后加入1 ml濃度為0.5 g/L重鉻酸鉀, 混合均勻后靜置。10 min后加入1 ml環(huán)己烷, 反復(fù)搖勻后靜置,待混合液分層后取上清液1 μl進樣分析。各濃度至少進行6樣本分析, 連續(xù)測定3 d, 并結(jié)合當(dāng)日標(biāo)準(zhǔn)曲線, 計算質(zhì)量控制樣品的測的濃度。

色譜條件：毛細管色譜柱OV-1701(50 m×0.53 mm)；氣化室溫度：250℃；柱溫：110℃；檢測器溫度：280℃；載氣：高純氮氣；進樣量：1 μl；載氣流速：10 ml/min。

1.3 觀察指標(biāo) 將受試者服用受試制劑以及參比制劑后,不同時間段血漿中卵磷脂絡(luò)合碘濃度檢測結(jié)果, 錄入計算機內(nèi)。利用梯形法計算AUCO-t值以及AUCO-∞值。結(jié)合受試劑與參比制劑中卵磷脂絡(luò)合碘的AUCO-t值, 計算相對的生物利用度。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS11.0統(tǒng)計學(xué)軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析。計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差( x-±s)表示, 采用t檢驗；計數(shù)資料采用χ2檢驗。P＜0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

6例健康男性受試者通過隨機交叉法, 分別口服受試制劑與參比制劑后, 血漿內(nèi)卵磷脂絡(luò)合碘的Tmax分別為(1.053±0.21)h和(1.053±0.21)h；Cmax分別為(2.84±0.85) μg/ml和(2.67±0.96) μg/ml?；颊呖诜茉囍苿┡c參比制劑后, AUCO-t分別為(19.54±6.32)(μg·h)/ml和(18.54±4.87)(μg·h)/ml；AUCO-∞值分別為(46.54±18.31)(μg·h)/ml和(50.52±23.18)(μg·h)/ml。使用AUCO-t進行計算, 卵磷脂絡(luò)合碘膠囊的相對生物利用率93.4%~120.0%；使用AUCO-∞進行計算, 卵磷脂絡(luò)合碘膠囊的相對生物利用率59.9%~134.7%。6例受試者口服受試制劑后各時間段血漿樣品監(jiān)測結(jié)果顯示, 服藥后, 第1位受試者0~2 h內(nèi)血漿樣品檢測結(jié)果依次為：ND、0.93 μg/ml、1.61 μg/ml、0.86 μg/ml、0.71 μg/ml；第2位受試者：ND、1.79 μg/ml、2.33 μg/ml、1.87 μg/ml、1.27 μg/ml；第3位受試者：0.6 μg/ml、2.29 μg/ml、2.56 μg/ml、3.76 μg/ml、2.34 μg/ml；第4位受試者：0.8 μg/ml、1.27 μg/ml、1.70 μg/ml、1.20 μg/ml、0.99 μg/ml；第5位受試者：ND、1.46 μg/ml、1.62 μg/ml、1.40 μg/ml、1.44 μg/ml；第6位受試者：0.64 μg/ml、1.86 μg/ml、3.71 μg/ml、1.86 μg/ml、0.99 μg/ml。

6例受試者口服參比制劑后各時間段血漿樣品監(jiān)測結(jié)果顯示, 服藥后, 第1位受試者0~2 h內(nèi)血漿樣品檢測結(jié)果依次為：ND、0.73 μg/ml、1.60 μg/ml、0.82 μg/ml、0.82 μg/ml；第2位受試者：ND、1.45 μg/ml、1.79 μg/ml、1.24 μg/ml、1.12 μg/ml；第3位受試者：0.73 μg/ml、2.01 μg/ml、2.68 μg/ml、3.62μg/ml、2.02 μg/ml；第4位受試者：0.81 μg/ml、1.27 μg/ml、1.70 μg/ml、1.20 μg/ml、0.99 μg/ml；第5位受試者：ND、1.92 μg/ml、2.25 μg/ml、1.51 μg/ml、1.56 μg/ml；第6位受試者：0.72 μg/ml、0.72 μg/ml、2.75 μg/ml、1.07 μg/ml、1.06 μg/ml。

3 討論

卵磷脂絡(luò)合碘藥物經(jīng)口服, 會經(jīng)消化道分解并被血液吸收。多數(shù)卵磷脂絡(luò)合碘藥物經(jīng)消化道分解后, 都是以無機碘的形式存在的, 并由機體運送至甲狀腺, 參與到甲狀腺素的合成與釋放過程。多余的碘則以無機碘的形式, 經(jīng)排泄物排出體外。目前, 研究人員多使用紫外分光光度法以及滴定法,測定碘制劑的含量, 考慮到這些檢測方式均容易受到多方面因素的影響, 所以檢測準(zhǔn)確度還有待考究。而GC測定法的出現(xiàn), 則有效解決了這一問題。相較于其他檢測方法, GC檢測法操作便捷, 對實驗環(huán)境無過多要求, 同時樣品耗損量少,微量檢測準(zhǔn)確率高, 具備于臨床推廣應(yīng)用的意義與價值［2］。

另外, 在本組研究中, 結(jié)合AUCO-∞以及峰深度Cmax值, 發(fā)現(xiàn)使用AUCO-t進行計算, 卵磷脂絡(luò)合碘膠囊的相對生物利用率93.4%~120.0%；使用AUCO-∞進行計算, 卵磷脂絡(luò)合碘膠囊的相對生物利用率59.9%~134.7%。故推斷受試制劑與參比制劑生物等效性, 該研究結(jié)果與朱余兵等［3］報道內(nèi)容基本一致。

綜上所述, GC法適用于測定人血漿中卵磷脂絡(luò)合碘藥物濃度, 參比制劑與受試制劑存在生物等效性。

［1］ 王曉琳, 張麗娜, 杜愛華, 等.液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定人血漿中格列喹酮及其2種片劑的生物等效性研究.藥物分析雜志, 2013, 15(2):250-254.

［2］ 張丹, 何杰, 楊漫, 等.LC-MS/MS法測定人血漿氯雷他定濃度及生物等效性研究.中國新藥雜志, 2013, 13(8):1560-1565.

［3］ 朱余兵, 張晶晶, 鄒建軍, 等.高效液相色譜熒光法測定人血漿中唑吡坦?jié)舛燃吧锏刃匝芯?中國藥師, 2010, 18(1):33-35.

10.14163/j.cnki.11-5547/r.2015.17.091

2015-01-09］

473000 南陽醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校