侯繼院 張松 劉興安 單國(guó)用

伽瑪?shù)吨委煂?duì)原發(fā)性肝癌患者外周血Th17淋巴細(xì)胞的影響

侯繼院 張松 劉興安 單國(guó)用

目的 觀察原發(fā)性肝癌患者伽瑪?shù)吨委熐昂骉h17細(xì)胞的變化。方法 43例接受伽瑪?shù)吨委煹脑l(fā)性肝癌患者作為研究組；43例健康體檢者作為正常對(duì)照組；采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)其外周血T細(xì)胞、T細(xì)胞、T細(xì)胞、Th17細(xì)胞水平及比值。結(jié)果 原發(fā)性肝癌患者細(xì)胞、T細(xì)胞及比值均顯著低于對(duì)照組(P＜0.05)；細(xì)胞和Th17細(xì)胞分別高于對(duì)照組(P＜0.05)；放療后1個(gè)月,T細(xì)胞、T細(xì)胞及比值均較治療前上升, 而細(xì)胞和Th17細(xì)胞比例下降, 差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。結(jié)論 原發(fā)性肝癌患者處于免疫抑制狀態(tài), 伽瑪?shù)吨委熆山档推渫庵苎猅h17細(xì)胞水平, 調(diào)節(jié)T細(xì)胞亞群平衡, 增強(qiáng)機(jī)體免疫功能。

肝腫瘤；伽瑪?shù)叮涣魇郊?xì)胞術(shù)；T淋巴細(xì)胞亞群；Th17細(xì)胞

原發(fā)性肝癌是我國(guó)常見的惡性腫瘤, 致死率在所有惡性腫瘤中占第三位, 70%的患者就診時(shí)為中晚期無(wú)手術(shù)機(jī)會(huì),且術(shù)后復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移率高。Th17細(xì)胞是一種新的CD4+T淋巴細(xì)胞亞群, 在多種腫瘤組織中高表達(dá), 抑制細(xì)胞免疫, 使腫瘤細(xì)胞發(fā)生免疫逃逸, 促進(jìn)腫瘤復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移［1］。體部伽瑪?shù)妒且环N新型的立體定向三維適形放療技術(shù), 多項(xiàng)臨床研究證實(shí)原發(fā)性肝癌伽瑪?shù)吨委熀缶植靠刂坡矢? 并發(fā)癥少［2］。臨床上已觀察到伽馬刀治療后, 肝癌患者免疫能力增強(qiáng)甚至使遠(yuǎn)處的轉(zhuǎn)移灶縮小或消失, 但這種免疫增強(qiáng)的具體機(jī)制仍不清楚, 本研究通過檢測(cè)肝癌患者伽瑪?shù)吨委熐昂笸庵苎猅h17細(xì)胞數(shù)量及T淋巴細(xì)胞亞群的變化, 探討伽瑪?shù)秾?duì)肝癌免疫功能的影響及可能機(jī)制。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2013年1月~2014年6月在本院接受體部伽瑪?shù)吨委煹?3例原發(fā)性肝癌患者為研究對(duì)象(研究組), 所有患者均符合2001年第八屆全國(guó)肝癌學(xué)術(shù)會(huì)議通過的原發(fā)性肝癌診斷標(biāo)準(zhǔn), 臨床診斷為原發(fā)性肝癌或行肝穿活檢病理學(xué)明確診斷。其中男25例, 女18例；年齡27~65歲,平均年齡(49.5±6.28)歲, 肝功能Child-Pugh分級(jí)A級(jí)31例, B級(jí)12例；甲胎蛋白(AFP) >20 μg/L者33例；有肝區(qū)疼痛者21例, 門靜脈癌栓者11例, 少量腹水者9例。病例選擇排除合并有影響機(jī)體免疫功能疾病的患者, 且未使用影響機(jī)體免疫功能的藥物。同時(shí)選43例健康體檢者作為正常對(duì)照組,男28例, 女15例, 年齡25~60歲, 平均年齡(47.3±5.1)歲。

1.2 治療方法 采用OUR-QGD型三維立體定向伽瑪射線體部治療系統(tǒng)。治療的總劑量及時(shí)間分割根據(jù)腫瘤大小、部位、全身狀況、周圍組織放射敏感性決定, 采用50%~70%等劑量曲線包繞靶區(qū), 通過劑量-體積直方圖進(jìn)行評(píng)估, 靶區(qū)周邊總劑量4000~6000 cGy, 單次劑量260~600 cGy, 分割10~18次, 每周照射3~5次。

1.3 檢測(cè)方法 伽瑪?shù)吨委熐? d、放療后1周、1個(gè)月分別抽空腹外周血送檢, 采用流式細(xì)胞計(jì)數(shù)儀( XL/XL-MCL, 美國(guó)貝克曼公司)檢測(cè)細(xì)胞、T細(xì)胞、T細(xì)胞及比值、比值；放療期間觀察患者疼痛及胃腸道癥狀變化, 每周復(fù)查血常規(guī)、肝腎功能；治療后4周行腹部增強(qiáng)CT、AFP檢查, 評(píng)價(jià)療效。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示, 采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率(%)表示, 采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 T細(xì)胞亞群、Th17細(xì)胞免疫功能變化比較。見表1。

表1 體部伽瑪?shù)吨委熐昂骉細(xì)胞亞群、Th17細(xì)胞免疫功能變化比較s, %)

注：與研究組治療前比較,aP＜0.05,bP>0.05

組別例數(shù)CD3Th17對(duì)照組43 73.7±17.3a49.8±10.9a26.4±9.8a1.9±0.7a1.1±0.2a研究組治療前4361.3±15.735.1±8.630.8±7.31.4±0.42.4±0.6研究組治療后1周43 64.5±13.4b37.3±8.8b28.9±6.7b1.5±0.5b1.9±0.4a研究組治療后1個(gè)月43 70.1±15.0a45.2±9.1a26.1±5.4a1.8±0.5a1.3±0.5a+ CD4+CD8+CD4+/CD8+

2.2 臨床療效及并發(fā)癥 治療后4周行腹部增強(qiáng)CT檢查,腫瘤明顯縮小者32例, 近期有效率74.4%；AFP均有不同程度下降, <20 μg/L者19例；21例肝區(qū)疼痛患者中, 完全消失13例, 減輕8例；11例門脈癌栓患者中, 4例癌栓消失。

治療后, 13例出現(xiàn)了Ⅲ度骨髓抑制, 以白細(xì)胞、血小板下降為主, 予以細(xì)胞白介素(IL)-11、粒細(xì)胞集落刺激因子等治療恢復(fù)正常；26例治療后谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、總膽紅素(TBIL)一過性輕中度升高, 血清白蛋白下降,予以保肝、補(bǔ)充人血白蛋白后1~2周恢復(fù)正常；17例出現(xiàn)低熱、輕中度惡心、嘔吐, 經(jīng)抗炎、補(bǔ)液、保護(hù)胃黏膜及止吐等對(duì)癥處理好轉(zhuǎn)。

3 討論

伽瑪?shù)蹲鳛橐环N立體定向三維適形放療技術(shù), 在不增加正常組織照射劑量的情況下提高了腫瘤有效生物劑量, 取得良好的臨床療效。本研究對(duì)43例原發(fā)性肝癌患者采用伽瑪?shù)吨委? 近期有效率為74.4%, 并發(fā)癥少, 與孫全新等［8］的報(bào)道相近, 近年來(lái)伽瑪?shù)吨委熢l(fā)性肝癌已被多家腫瘤中心采用［2］。有關(guān)肝癌患者伽瑪?shù)吨委熀竺庖吖δ茏兓膱?bào)道較少, 該研究發(fā)現(xiàn)伽瑪?shù)吨委熀?周細(xì)胞數(shù)量及比值升高, 與治療前相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05), 而Th17細(xì)胞數(shù)量下降明顯, 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05), 提示伽瑪?shù)吨委熀? 機(jī)體細(xì)胞免疫功能未受抑制, 而作為促癌效應(yīng)的Th17細(xì)胞下降明顯；伽瑪?shù)吨委熀?月細(xì)胞數(shù)量及比值升高明顯, Th17細(xì)胞數(shù)量持續(xù)下降, 與治療前相比差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05), 提示伽瑪?shù)吨委熀蠡颊呒?xì)胞免疫功能是逐漸增強(qiáng)的, 與免疫抑制細(xì)胞Th17的下降, T淋巴細(xì)胞亞群趨向平衡有關(guān)。推測(cè)其可能機(jī)制為：短療程, 高分割劑量的伽瑪?shù)吨委?在腫瘤局部造成炎性環(huán)境, 首先使免疫抑制T淋巴細(xì)胞及其分泌的免疫抑制因子下降, 抑制腫瘤血管的生成, 動(dòng)物試驗(yàn)證實(shí)IL-17-/-鼠在MCA誘導(dǎo)的致癌模型中, 降低了血管生成,成瘤率低；隨著放療后瘤細(xì)胞的增殖性死亡、抗原決定簇暴露,有利于抗原提呈細(xì)胞識(shí)別、提取、加工腫瘤抗原, 促進(jìn)前體T細(xì)胞向細(xì)胞分化, 打破免疫耐受, 從而提高機(jī)體細(xì)胞免疫功能。

腫瘤細(xì)胞與各免疫細(xì)胞之間的相互作用復(fù)雜, Th17細(xì)胞在肝癌發(fā)生、發(fā)展中如何抑制免疫, 促腫瘤逃逸及伽瑪?shù)秾?duì)肝癌患者免疫功能影響的具體機(jī)制還需更深入研究。

［1］ Wang J, Xu K, Wu J, et al.The changes of Th17 cells and the related cytokines in the progression of human colorectal cancers.BMC cancer, 2012(12):418.

［2］ 張江靈, 陳少誼, 陳運(yùn)萍.伽瑪?shù)吨委熢l(fā)性肝癌對(duì)肝功能的影響.四川醫(yī)學(xué), 2011, 32(8):1214-1216.

［3］ Huber M, Heink S, Grothe H, et al.A Th17-like developmental process lead to CD8+Tc17 cells with reduced cytotoxic activity.Eur J Immmunol, 2009, 39(7):1716-1725.

［4］ Wakita D, Sumida K, Iwakura Y, et al.Tumorinfiltrating IL-17 producing T cells support progression of tumor by promoting angiogenesis.J Immunol, 2010, 1(7):1927-1937.

［5］ 王平, 武傳星, 呂凌, 等.IL-17在原發(fā)性肝癌組織中的表達(dá)及其臨床意義.中國(guó)腫瘤生物治療雜志, 2011, 18(2):216-219.

［6］ 闞曉, 潘家超, 荊燕, 等.原發(fā)性肝癌患者微波消融治療后外周血T淋巴細(xì)胞亞群的變化.實(shí)用肝臟病雜志, 2014, 17(1):71-73.

［7］ 鄧俊, 陳衛(wèi), 陸忠華, 等.原發(fā)性肝癌患者射頻消融治療前后外周血T細(xì)胞亞群及NK細(xì)胞的變化.實(shí)用腫瘤雜志, 2013, 16(5):416-418.

［8］ 孫全新, 張業(yè)嵩.56例原發(fā)性肝癌的伽瑪?shù)吨委煼治?現(xiàn)代診斷與治療, 2013, 24(3):612-613.

10.14163/j.cnki.11-5547/r.2015.17.059

2015-01-04］

450000 鄭州人民醫(yī)院放療科