王娟霞 周永寧 鄒紹靜 任濤文 張志鎰

·論著·

胃癌組織Tiam1表達(dá)及其與臨床病理特征和生存的關(guān)系

王娟霞 周永寧 鄒紹靜 任濤文 張志鎰

目的 探討胃癌組織Tiam1在胃癌的發(fā)生、發(fā)展過程中的作用。方法 運(yùn)用免疫組化法結(jié)合組織芯片技術(shù)聯(lián)合檢測(cè)189例胃癌、54例癌旁、30例正常組織及59例對(duì)應(yīng)的淋巴結(jié)中的Tiam1蛋白表達(dá)情況。結(jié)果 Tiam1蛋白在胃癌組織、癌旁組織及正常胃黏膜的表達(dá)陽性率分別為85.7%、74.1%和16.7%, 比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=67.448, P＜0.001)。Tiam1蛋白表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、分化程度及浸潤(rùn)深度密切相關(guān)(P＜0.05)。胃癌原發(fā)灶Tiam1蛋白表達(dá)陽性率(85.0%)高于相對(duì)應(yīng)的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶(65.0%) (χ2=4.267, P＜0.05)。Tiam1蛋白表達(dá)陽性具有顯著的生存危險(xiǎn), 是獨(dú)立的生存期預(yù)測(cè)因子。結(jié)論 Tiam1蛋白表達(dá)與臨床病理特征密切相關(guān), 其表達(dá)方式與患者的生存期密切相關(guān), 可作為獨(dú)立的生存期預(yù)測(cè)因子。

胃癌組織；Tiam1蛋白；免疫組化；臨床病理特征；生存期

Tiam1可以在PH功能區(qū)參與下誘導(dǎo)細(xì)胞膜皺褶, 細(xì)胞膜皺褶是腫瘤細(xì)胞運(yùn)動(dòng)和轉(zhuǎn)移的一個(gè)指標(biāo)［1,2］。本研究檢測(cè)189例胃癌、54例癌旁、30例正常組織及59例對(duì)應(yīng)的淋巴結(jié)中Tiam1蛋白的表達(dá)情況, 以研究其表達(dá)與胃癌的相關(guān)性?，F(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 癌組織189例, 相對(duì)應(yīng)淋巴結(jié)為59例(其中有轉(zhuǎn)移灶40例), 癌旁54例［取材距癌組織邊緣≥6 cm,經(jīng)蘇木精-伊紅染色(HE染色)證實(shí)均無癌細(xì)胞］。所有標(biāo)本均為武威市腫瘤醫(yī)院1999～2004年保存完好胃癌術(shù)后的石蠟標(biāo)本。Tiam1蛋白一抗購(gòu)自美國(guó)Santa Cruz公司 , 免疫組化試劑盒購(gòu)自北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司。取30例胃癌的陰性切斷(胃正常黏膜)與胃癌組織作對(duì)照。男145例,女44例。年齡30～73歲, 中位年齡55歲。根據(jù)WHO分類法, 低分化型100例, 高中分化型89例；T1(局限于黏膜層)7例, T2(侵及肌層)39例, T3(侵及漿膜層)86例, T4(侵及漿膜外)57例；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移116例, 無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移73例。依據(jù)Lauren分型, 腸型97例, 彌漫型85例, 混合型7例。腫瘤直徑≥5 cm者119例, 腫瘤直徑＜5 cm者70例。

1.2 方法 所選蠟塊制成4 μm厚切片, 免疫組化染色按試劑盒步驟操作。用已知表達(dá)抗體的組織做陽性對(duì)照, 用磷酸鹽緩沖液(PBS緩沖液)代替一抗作為陰性對(duì)照。免疫組化染色陽性表達(dá)主要位于細(xì)胞漿或細(xì)胞膜, 呈淡黃色或棕黃色或棕褐色顆粒。按半定量評(píng)分方法如下：根據(jù)腫瘤細(xì)胞的染色范圍, 陽性細(xì)胞數(shù)＜5%、5%～25%、26%～50%、＞50%分別標(biāo)記為0、1、2、3分；對(duì)每張切片陽性細(xì)胞的染色強(qiáng)度按無著色、淡黃色、棕黃色和棕褐色分別標(biāo)記為0、1、2、3分, 根據(jù)兩項(xiàng)評(píng)分之和判斷結(jié)果, ≥3分者為陽性, ＜3分者為陰性。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS15.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件整理分析數(shù)據(jù)。計(jì)數(shù)資料以率(%)表示, 采用χ2檢驗(yàn)。采用Kaplan-Meier曲線分析單因素生存分析, 生存期預(yù)測(cè)相關(guān)性采用COX回歸分析。P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 Tiam1表達(dá) Tiam1在胃癌組、癌旁組及正常對(duì)照組的表達(dá)陽性率分別為85.7%(162/189)、74.1%(40/54)和16.7% (5/30)。可見, Tiam1蛋白主要在細(xì)胞漿表達(dá), 少有胞膜表達(dá), 呈棕黃色或棕褐色染色顆粒。胃癌組Tiam1表達(dá)陽性率與癌旁組和對(duì)照組相比差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=4.057、68.172, P＜0.05)。癌旁組和對(duì)照組相比, 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=25.554, P＜0.001)。

2.2 Tiam1表達(dá)與臨床病理特征 胃癌中Tiam1的表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、浸潤(rùn)深度以及分化程度關(guān)系緊密(P＜0.05), 而與年齡、腫瘤大小、Borrman分型和Lauren分型無顯著相關(guān)性。見表1。

2.3 淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶Tiam1表.19例未轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)(59例淋巴結(jié))Tiam1的表達(dá)陽性率為15.8%(3/19), 40例淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶Tiam1的表達(dá)陽性率為65.0%(26/40)。與之相對(duì)應(yīng)的40例原發(fā)灶胃癌組織Tiam1的表達(dá)陽性率為85.0%(34/40), 兩者比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=4.267, P＜0.05)。

2.4 Tiam1與生存期 Kaplan-Meier生存曲線分析顯示.101例隨訪胃癌手術(shù)患者的半數(shù)生存期為28個(gè)月.3年與5年的平均生存率分別為46.3%和39.6%。Tiam1表達(dá)陽性者的半數(shù)生存期是20.000(個(gè)月), 胃癌患者中Tiam1表達(dá)陰性者生存優(yōu)勢(shì)明顯強(qiáng)于表達(dá)陽性者(χ2=8.659, P=0.003)。見圖1。COX多因素回歸分析顯示Tiam1蛋白表達(dá)陽性具有顯著的生存危險(xiǎn), 是獨(dú)立的生存期預(yù)測(cè)因子。

3 討論

本研究發(fā)現(xiàn), 在胃癌組織、癌旁組織及正常對(duì)照中Tiam1均有表達(dá), 研究結(jié)果與續(xù)薇等［3］一致。在胃癌組織中, Tiam1的表達(dá)陽性率(85.7%)明顯高于其在癌旁組織(74.1%)和正常對(duì)照組(16.7%)的表達(dá)(P均＜0.05)；癌旁組織和正常對(duì)照組的Tiam1表達(dá)相比, 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.001)。因此Tiam1很有可能是胃癌的早期分子事件, 其表達(dá)在胃癌的發(fā)生、發(fā)展以及惡性轉(zhuǎn)化中起促進(jìn)作用。

在結(jié)腸癌、肺癌、乳腺癌、卵巢癌、喉癌等多種惡性腫瘤組織中, Tiam1呈陽性表達(dá), 并與其分化程度、侵襲轉(zhuǎn)移密切相關(guān)［4-7］。本研究發(fā)現(xiàn)Tiam1蛋白陽性表達(dá)率隨胃癌組織分化程度的降低、浸潤(rùn)深度的增加及伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的發(fā)生呈逐漸增強(qiáng)趨勢(shì), 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05或P＜0.01)。因?yàn)門iam1是Rac1的特異性鳥苷酸轉(zhuǎn)換因子(GEF), 能夠促進(jìn)二磷酸鳥苷(GDP)的釋放以及三磷酸鳥苷(GTP)的結(jié)合,進(jìn)而激活Rac1, 再經(jīng)激酶等信號(hào)分子轉(zhuǎn)導(dǎo), 激活下游分子,實(shí)現(xiàn)調(diào)節(jié)細(xì)胞骨架結(jié)構(gòu)重組, 影響細(xì)胞的形體極化過程, 促進(jìn)細(xì)胞運(yùn)動(dòng)和遷移, 并進(jìn)一步誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移, 參與基因表達(dá)調(diào)控、細(xì)胞增殖與凋亡等。

本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)胃癌原發(fā)灶與其對(duì)應(yīng)的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶的Tiam1表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。惡性腫瘤雖然是從發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化的細(xì)胞單克隆性增值而來, 但在生長(zhǎng)過程中,經(jīng)過多次分裂繁殖產(chǎn)生的子代細(xì)胞可出現(xiàn)不同的基因改變或其他大分子的改變, 考慮與腫瘤的異質(zhì)性有關(guān), 其生長(zhǎng)速度、侵襲能力、對(duì)生長(zhǎng)信號(hào)的反應(yīng)等方面有差異。從Kaplan-Meier生存曲線中, 可以發(fā)現(xiàn)Tiam1表達(dá)與患者的生存期密切相關(guān), Tiam1表達(dá)陽性患者具有顯著生存危險(xiǎn)。COX多因素回歸分析表明, Tiam1表達(dá)可作為胃癌獨(dú)立的預(yù)后預(yù)測(cè)因子, 其與患者的生存期緊密相關(guān), 有助于預(yù)期胃癌患者的預(yù)后。但有關(guān)Tiam1蛋白表達(dá)與其他基因間可能存在的調(diào)控影響及機(jī)制尚須進(jìn)一步研究。

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Expression of Tiam1 in gastric cancer tissue and its relationship with clinicopathologic characteristics and survival time

WANG Juan-xia, ZHOU Yong-ning, ZOU Shao-jing, et al.
Department of Hepatopathy, The Second Hospital of Lanzhou University, Lanzhou 730030, China

Objective To investigate effect of Tiam1 in gastric cancer tissue in occurrence and progress of gastric cancer. Methods Immunohistochemistry combined with tissue microarray were applied in detection of Tiam1 expression i.189 gastric cancer tissue cases, 54 adjacent tissue cases.30 normal tissue cases, and 59 corresponding lymphonodus. Results The positive rates of Tiam1 expression in gastric cancer tissue, adjacent tissue, and normal gastric mucosa were respectively 85.7%, 74.1% an.16.7%, and their difference had statistical significance (χ2=67.448, P＜0.001). Tiam1 expression was closely related with lymphatic metastasis, differentiated degree, and infiltration depth (P＜0.05). The positive rate of primary Tiam1 expression in gastric cancer (85.0%) was higher than corresponding lymphatic metastasis (65.0%) (χ2=4.267, P＜0.05). Positive Tiam1 expression showed remarkably survival risk, and that was an independent survival predictor. Conclusion Tiam1 expression is closely related with clinicopathologic characteristics. Its expression way has close correlation with survival time of patients, and it can be taken as the independent survival predictor.

Gastric cancer tissue; Tiam1 protein; Immunohistochemistry; Clinicopathologic characteristics; Survival time

10.14163/j.cnki.11-5547/r.2015.32.001

2015-07-17］

國(guó)家自然科學(xué)基金(項(xiàng)目編號(hào)：30872478)

730030 蘭州大學(xué)第二醫(yī)院肝病科(王娟霞)；蘭州大學(xué)第一醫(yī)院消化內(nèi)科(周永寧 鄒紹靜 任濤文)；甘肅省武威腫瘤醫(yī)院(張志鎰)

周永寧