王曉陽 胡艷東

酶聯(lián)免疫法與電化學(xué)發(fā)光法檢測AFP腫瘤標(biāo)志物結(jié)果的對比分析

王曉陽 胡艷東

目的對比酶聯(lián)免疫法（ELISA）與電化學(xué)發(fā)光法（ECLIA）檢測甲胎蛋白（AFP） 腫瘤標(biāo)志物的結(jié)果。方法65例腫瘤患者， 采集血清標(biāo)本， 分別運(yùn)用ELISA、ECLIA檢測各標(biāo)本中AFP水平， 對比兩種方法檢測結(jié)果。結(jié)果ECLIA檢測AFP陽性率為53.8%， ELISA檢測AFP陽性率為52.3%， 兩種方法對比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）， ELISA和ECLIA檢測AFP含量對比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；ELISA和ECLIA具有高度相關(guān)性。結(jié)論ELISA、ECLIA檢測AFP腫瘤標(biāo)志物具有高度一致性， 可準(zhǔn)確反映其水平， 無顯著差異， 可根據(jù)實(shí)際情況選擇相對應(yīng)檢測方法， 臨床應(yīng)用價值高。

酶聯(lián)免疫法；電化學(xué)發(fā)光法；甲胎蛋白

AFP為甲胎蛋白， 在檢驗(yàn)健康人員血清時， AFP含量較低， 通常不會超過20 ng/ml， 多位于2～8 ng/ml之間［1］， 通過檢測AFP水平能夠判斷患者是否為原發(fā)性肝癌， 且可判斷患者預(yù)后質(zhì)量。通常是患者出現(xiàn)惡性腫瘤后， 其血清中AFP含量會升高增加， 因此， 積極檢測AFP含量水平， 在臨床診斷中極其重要。ELISA是臨床經(jīng)典診斷方法［2］， ECLIA為新型檢測方法， 為了明確兩種方法的診斷價值， 本文就以65例患者作為研究對象， 對比ELISA和ECLIA檢測AFP腫瘤標(biāo)志物結(jié)果， 總結(jié)如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 本組選取本院收治的65例腫瘤患者均于2012年6月～2014年4月期間就診， 男42例， 女23例；年齡32～65歲， 平均年齡（52.7±5.7）歲；采集65份血清標(biāo)本，30份標(biāo)本濃度處于正常范圍， 35份標(biāo)本AFP含量超過20 ng/ml；檢測范圍為0.61～300 ng/ml；患者均于晨起空腹抽3 ml靜脈血，離心后分離血清， 于-20℃保存。

1.2 檢測方法 ECLIA：由北京華大吉比愛生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)， 電化學(xué)發(fā)光自動分析儀及配套試劑， 定標(biāo)液和質(zhì)控品， 嚴(yán)格按照儀器和試劑盒說明針對性操作檢測。ELISA：由羅氏公司生產(chǎn)并提供原裝配套試劑、校準(zhǔn)品和質(zhì)控物， 根據(jù)說明書操作規(guī)范嚴(yán)格操作。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理本次研究中的數(shù)據(jù)。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（ x-±s）表示， 采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率（%）表示， 采用χ2檢驗(yàn)； ELISA和ECLIA檢測相關(guān)性采用直線回歸分析。P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩種檢測方法檢測AFP陽性率對比 ECLIA檢測AFP陽性率為53.8%（35/65）， ELISA檢測AFP陽性率為52.3%（34/65）；兩種檢測方法陽性率對比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=3.24， P＞0.05）。

2.2 ELISA和ECLIA檢測直線回歸分析結(jié)果對比 ELISA法檢測結(jié)果為Y， ECISA為X， 相關(guān)性檢測擬合直線為Y=-3.52471+1.20935X（-6.20154）（104.4275）， 截距頂t值則是-6.20154，超過臨界值， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；其可信度超過95%；X前系數(shù)t值為104.4275， 超過臨界值， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；其可靠度在95%， X線系數(shù)項(xiàng)顯著， 則表明Y和X項(xiàng)的關(guān)系成立， 相關(guān)系數(shù)r2=0.998645， 其結(jié)果接近1 ， 說明X和Y的關(guān)系具有高度相關(guān)性。

2.3 ELISA和ECLIA檢測結(jié)果對比 ELISA檢測AFP含量為（23.5624±7.2530）ng/ml， ECLIA檢測AFP含量為（23.6345 ±5.3280）ng/ml， 數(shù)據(jù)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=0.3564， P＞0.05）。

3 討論

甲胎蛋白是胚胎血清中的主要蛋白， 為腫瘤相關(guān)抗原，在檢測腫瘤標(biāo)志物時， 通過檢測結(jié)果， 對判斷腫瘤預(yù)后、轉(zhuǎn)歸均起到顯著促進(jìn)意義。AFP為腫瘤標(biāo)志物之一， 由胎肝合成， 通過檢測AFP含量， 對判斷患者是否為原發(fā)性肝癌起到顯著效果， 同時可判斷肝癌患者的治療效果、預(yù)后及轉(zhuǎn)歸情況［3］。一般情況下， AFP在數(shù)個月新生兒至1歲期間， 其含量水平會恢復(fù)到正常范圍， 不超過20 ng/ml。當(dāng)患者出現(xiàn)惡性腫瘤后， AFP含量則會不同程度的增加。據(jù)相關(guān)資料［4］顯示， 有高達(dá)95%的原發(fā)性肝癌患者在檢測AFP時， 其含量顯著增加；轉(zhuǎn)移性肝癌患者的AFP含量多是低于350～400 IU/ml。若患者屬于畸胎、酒精性肝炎、急性病毒性肝炎或攜帶乙肝病毒患者， 當(dāng)出現(xiàn)代償性增生時， AFP含量則輕度增加。AFP所具備特異性， 是臨床原發(fā)性肝癌的主要標(biāo)志物。且利用AFP診斷肝癌， 其符合率高達(dá)90%， 應(yīng)用效果顯著。另外AFP是迄今為止最早、應(yīng)用最為廣泛的腫瘤標(biāo)志物， 因此保證AFP檢測準(zhǔn)確性是判斷腫瘤患者病情的主要措施。

酶聯(lián)免疫法是臨床常用的經(jīng)典檢測方法， 通過抗體與酶復(fù)合物結(jié)合， 以顯色檢測， 其檢測結(jié)果顯著， 操作簡單， 成本低， 在臨床中得到廣泛應(yīng)用。電化學(xué)發(fā)光法為新型檢測方法，結(jié)合免疫測定和電化學(xué)發(fā)光方法， 以此進(jìn)行檢測。通過本次研究， ECLIA檢測AFP陽性率為53.8%， ELISA檢測AFP陽性率為52.3%， 兩組對比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）， ELISA和ECLIA檢測AFP含量對比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；ELISA和ECLIA具有高度相關(guān)性。檢測結(jié)果顯示， ELISA和ECLIA均可有效檢測AFP水平， 其檢測結(jié)果具有高度一致性，但樣本量較少， 限制了檢測范圍， 為了保證臨床檢測的準(zhǔn)確性， 應(yīng)不斷擴(kuò)大范圍進(jìn)行研究。

總之， ELISA、ECLIA檢測AFP腫瘤標(biāo)志物具有高度一致性， 可準(zhǔn)確反映其水平， 無顯著差異， 可根據(jù)實(shí)際情況選擇相對應(yīng)檢測方法。ELISA操作簡單， 成本低廉， 準(zhǔn)確性較高， 值得在基層醫(yī)院患者篩選中應(yīng)用， 易于家庭條件較差的患者人群中應(yīng)用。ECLIA穩(wěn)定性高， 自動化程度高， 快速精確，檢測范圍廣， 無放射性污染， 臨床應(yīng)用價值顯著。但成本高，檢測設(shè)備、試劑成本高， 在臨床廣泛推廣中有一定困難性。需根據(jù)患者實(shí)際情況， 經(jīng)ELISA診斷后疑似為腫瘤患者， 不加以確定時， 可利用ECLIA進(jìn)行確定。

［1］ 黃婭.甲胎蛋白、異常凝血酶原聯(lián)合檢測在肝細(xì)胞肝癌診斷中的臨床意義.中國實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)， 2013， 17（5）:882.

［2］ 陳曲波.Array-ELISA法和ECLIA法測定六項(xiàng)腫瘤標(biāo)志物的比較研究.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)， 2012， 27（1）:4-7.

［3］ 楊洋.甲胎蛋白的液相芯片法檢測與方法學(xué)評價.國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志， 2009， 30（1）:96-97.

［4］ 邢福軍.酶聯(lián)免疫法與電化學(xué)發(fā)光法檢測AFP腫瘤標(biāo)志物結(jié)果的對比分析.國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志， 2011， 32（17）:1987.

10.14163/j.cnki.11-5547/r.2015.07.053

2014-10-30］

472000 河南科技大學(xué)附屬三門峽市中心醫(yī)院醫(yī)務(wù)科