李瑩瑩 王泓 戴維 王霞 蔣冬梅 張曉東

子宮頸癌為常見(jiàn)的婦科惡性腫瘤，以鱗癌居多。近年，子宮頸鱗癌在年輕人群中的發(fā)生率呈明顯上升趨勢(shì)[1]。因此，有必要對(duì)子宮頸鱗癌的早期監(jiān)測(cè)和診斷手段進(jìn)行研究。鱗狀細(xì)胞癌抗原(SCC-Ag)可由正常鱗狀細(xì)胞產(chǎn)生，但含量極低。在子宮頸鱗癌進(jìn)展過(guò)程中，鱗癌細(xì)胞中SCC-Ag大量分泌到血液，SCC-Ag水平是子宮頸鱗癌監(jiān)測(cè)和輔助診斷的重要手段之一[2]。然而，筆者在臨床實(shí)踐中發(fā)現(xiàn)，應(yīng)用SCC-Ag檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)提供的臨界值進(jìn)行子宮頸鱗癌診斷，其靈敏度明顯低于病理檢查。因此，本研究收集我院開(kāi)展SCC-Ag檢測(cè)以來(lái)的臨床結(jié)果，對(duì)子宮頸鱗癌患者和健康人群血清中SCC-Ag進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，評(píng)估SCC-Ag對(duì)子宮頸鱗癌的診斷價(jià)值，并為子宮頸鱗癌診斷提供最佳臨界值，現(xiàn)報(bào)告如下。

對(duì)象與方法

一、研究對(duì)象

收集2011年5月至2013年12月在我院住院、經(jīng)病理活組織檢查(活檢)確診、首次治療的134例子宮頸鱗癌患者，設(shè)為子宮頸鱗癌組。134例子宮頸鱗癌患者年齡27～77歲，中位年齡43歲，無(wú)合并其他腫瘤者，在化學(xué)治療前或手術(shù)前進(jìn)行SCC-Ag檢測(cè)。另選擇在我院體檢的134名健康女性為正常對(duì)照組，入組者年齡22～67歲，中位年齡39歲。2組患者的年齡比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。所有入選研究者均簽署知情同意書(shū)。

二、方 法

1.標(biāo)本采集

于清晨使用真空采血管采集受試者的靜脈血2～3 ml，離心分離血清，低溫保存待測(cè)。

2.SCC-Ag的檢測(cè)

應(yīng)用深圳市新產(chǎn)業(yè)生物醫(yī)學(xué)工程股份有限公司的MAGLUMI 2000全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光系統(tǒng)及配套試劑，使用化學(xué)發(fā)光免疫夾心法檢測(cè)SCC-Ag水平，所有的分析步驟由儀器自動(dòng)執(zhí)行，分析試劑已預(yù)先分裝在封閉的試劑條中。采用針對(duì)SCC-Ag的一株單克隆抗體標(biāo)記N-(4-氨丁基)-N-乙基異魯米諾(ABEI)，另一株單克隆抗體標(biāo)記異硫氰酸熒光素(FITC)，標(biāo)本與ABEI標(biāo)記的單克隆抗體、FITC標(biāo)記的單克隆抗體及包被羊抗的FITC抗體的磁性微球混勻，形成免疫復(fù)合物，外加磁場(chǎng)沉淀，棄上清液，用洗液清洗沉淀復(fù)合物3次，直接進(jìn)入標(biāo)本測(cè)量室，儀器泵入發(fā)光底物，自動(dòng)監(jiān)測(cè)3 s內(nèi)發(fā)出的光強(qiáng)度(RLU)。SCC-Ag水平與RLU成一定的比例關(guān)系，測(cè)定儀自動(dòng)擬合計(jì)算SCC-Ag水平。該系統(tǒng)以2.5 ng/ml為臨界值，血清SCC-Ag＜2.5 ng/ml為正常值(陰性)，SCC-Ag≥2.5 ng/ml為陽(yáng)性，血清SCC-Ag值檢測(cè)范圍0～100 ng/ml，若大于100 ng/ml將樣品稀釋后再進(jìn)行檢測(cè)。

三、觀察內(nèi)容

分別記錄子宮頸鱗癌組和正常對(duì)照組的SCCAg水平，繪制受試者操作特征曲線(ROC)，分析SCC-Ag診斷子宮頸鱗癌的靈敏度、特異度、最佳臨界值，并比較根據(jù)試劑盒提供的SCC-Ag臨界值與ROC所得最佳臨界值診斷子宮頸鱗癌的陽(yáng)性率。

四、統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

使用SPSS 11.5軟件處理數(shù)據(jù)。計(jì)算子宮頸鱗癌組和正常對(duì)照組的SCC-Ag中位數(shù)，并進(jìn)行秩和檢驗(yàn)。采用子宮頸鱗癌組和正常對(duì)照組的測(cè)得值繪制ROC，以“1－特異度”為橫坐標(biāo)、靈敏度為縱坐標(biāo)，計(jì)算ROC的曲線下面積，確定最佳臨界值。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

一、子宮頸鱗癌組和正常對(duì)照組的SCC-Ag水平比較

與正常對(duì)照組比較，子宮頸鱗癌組的SCC-Ag水平明顯升高(P＜0.001)，見(jiàn)表1。

表1 子宮頸鱗癌組與正常對(duì)照組SCC-Ag水平比較

二、SCC-Ag診斷子宮頸鱗癌的診斷效能分析

利用子宮頸鱗癌組和正常對(duì)照組的SCC-Ag檢測(cè)結(jié)果繪制出ROC，見(jiàn)圖1。該ROC的曲線下面積為0.908(95%可信區(qū)間為0.873～0.944)，面積的標(biāo)準(zhǔn)誤為0.018，提示血清SCC-Ag可作為子宮頸鱗癌重要的腫瘤標(biāo)志物應(yīng)用于臨床輔助診斷;靈敏度、特異度之和為最大時(shí)，測(cè)得值為最佳臨床診斷臨界值，即在靈敏度為75.4%、特異度為96.3%時(shí)，SCC-Ag最佳臨界值為1.798 ng/ml，約登指數(shù)(靈敏度+特異度－1)為0.717。

圖1 SCC-Ag診斷子宮頸鱗癌的ROC曲線

三、試劑盒說(shuō)明書(shū)提供臨界值與ROC最佳臨界值診斷子宮頸鱗癌的陽(yáng)性率比較

使用試劑盒說(shuō)明書(shū)提供的臨界值(2.5 ng/ml)時(shí)，以血清 SCC-Ag＜2.5 ng/ml為正常值(陰性)，SCC-Ag≥2.5 ng/ml為陽(yáng)性。134例子宮頸鱗癌患者的 SCC-Ag檢測(cè)結(jié)果中，陽(yáng)性88例(65.7%);正常對(duì)照組陽(yáng)性3例，陽(yáng)性率為2.2%(3/134)，診斷靈敏度為 65.7%，特異度為97.8%。以ROC曲線的最佳臨界值1.798 ng/ml作為臨界值，134例子宮頸鱗癌組SCC-Ag陽(yáng)性101例，陽(yáng)性率是75.37%(101/134);正常對(duì)照組陽(yáng)性5例(3.73%)。使用最佳臨界值時(shí)，盡管特異度下降1.5%，但靈敏度提高約10%;同時(shí)陽(yáng)性預(yù)測(cè)值是95.3%，陰性預(yù)測(cè)值是79.6%，分別提高了6.3%和5.6%。

討 論

SCC-Ag是一種腫瘤糖蛋白相關(guān)抗原，最早是從子宮頸鱗癌中分離出來(lái)[3]。SCC-Ag參與了腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)，并分泌在體液中，成為腫瘤標(biāo)志物[4]。本研究顯示，子宮頸鱗癌患者的血清SCCAg水平明顯高于正常對(duì)照組，提示SCC-Ag對(duì)于子宮頸鱗癌具有診斷價(jià)值，與多數(shù)研究結(jié)論相符。

ROC是一種評(píng)價(jià)診斷效能的有效工具。它通過(guò)改變?cè)\斷臨界值，獲得靈敏度和特異度。以靈敏度作為縱坐標(biāo)，“1－特異度”作為橫坐標(biāo)，繪制ROC，計(jì)算與比較曲線下面積，可客觀分析診斷試驗(yàn)的診斷價(jià)值[5]。此外，ROC還可確定診斷性試驗(yàn)的最佳臨界值。理想臨界值應(yīng)使該試驗(yàn)的靈敏度和特異度都達(dá)到100%，將患者與非患者完全劃分開(kāi)。然而在實(shí)際臨床工作中，患者與非患者的生理生化指標(biāo)總是存在重疊區(qū)域，使診斷性試驗(yàn)的靈敏度與特異度在坐標(biāo)圖上呈現(xiàn)出相反方向的改變趨勢(shì)，即靈敏度上升的同時(shí)特異度下降。為了更好地輔助臨床診斷，以約登指數(shù)達(dá)最高時(shí)取臨界值，該點(diǎn)是保證一定靈敏度和特異度的情況下使臨床診斷的準(zhǔn)確性達(dá)至最高的界點(diǎn)，即最佳臨界值[6-7]。

ROC曲線下面積可有效評(píng)價(jià)診斷試驗(yàn)的診斷價(jià)值，曲線下面積越大，診斷準(zhǔn)確性就越好，當(dāng)曲線下面積＞0.9時(shí)，提示該試驗(yàn)對(duì)臨床診斷具有重要價(jià)值[8-9]。本研究通過(guò)系統(tǒng)分析血清 SCC-Ag診斷子宮頸鱗癌的ROC，得出SCC-Ag最佳臨界值為1.798 ng/ml，此時(shí)ROC曲線下面積0.908。結(jié)果表明，血清SCC-Ag可作為子宮頸鱗癌重要的腫瘤標(biāo)志物。將1.798 ng/ml作為SCC-Ag臨界值，再次分析數(shù)據(jù)，發(fā)現(xiàn)SCC-Ag對(duì)134例子宮頸鱗癌患者的診斷特異度為94.7%，靈敏度為75.4%;以SNIBE公司提供的2.5 ng/ml作為臨界值，特異度為100%，靈敏度為65.3%。結(jié)果提示，以1.798 ng/ml為SCC-Ag臨界值診斷子宮頸鱗癌的特異度稍稍降低，但靈敏度明顯提高，將更有利于子宮頸鱗癌的輔助診斷。

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