王 齊,王遲鵑,李元葉,許 華,李慶華,龐天翔(中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院,血液學(xué)研究所血液病醫(yī)院,實(shí)驗(yàn)血液學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,北京100032)
沉默Sam68基因抑制急性淋巴細(xì)胞白血病Jurkat細(xì)胞增殖*
王齊,王遲鵑,李元葉,許華,李慶華△,龐天翔△
(中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院,血液學(xué)研究所血液病醫(yī)院,實(shí)驗(yàn)血液學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,北京100032)
目的:探討Sam68對(duì)急性淋巴細(xì)胞白血病Jurkat細(xì)胞增殖的影響。方法:針對(duì)Sam68 mRNA的第531~552靶位點(diǎn),構(gòu)建pLKO-Tet-On載體,制備慢病毒并感染、篩選Jurkat細(xì)胞,誘導(dǎo)干擾載體表達(dá);采用real-time PCR和Western blot技術(shù)驗(yàn)證干擾效率;用體外細(xì)胞集落形成實(shí)驗(yàn)觀察干擾Sam68基因表達(dá)后對(duì)細(xì)胞集落形成能力的影響;用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)分析Jurkat細(xì)胞細(xì)胞周期的變化。結(jié)果: Sam68基因表達(dá)下調(diào)能抑制了細(xì)胞的增殖和集落形成能力,導(dǎo)致S期細(xì)胞比例顯著增加,G2期細(xì)胞比例顯著降低,G1期細(xì)胞比例無明顯差異。結(jié)論: shRNA靶向干擾Sam68基因的表達(dá)能有效抑制急性淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞系Jurkat細(xì)胞的增殖。
國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No.81170510; No.81402432; No.81090412) ;天津市自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No.14JCZDJC34900)
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