王　齊，王　建，李慶華，龐天翔(中國醫(yī)學科學院北京協(xié)和醫(yī)學院，血液學研究所血液病醫(yī)院，實驗血液學國家重點實驗室，北京100032)

沉默CIAPIN1基因?qū)562細胞增殖能力的影響*

王齊，王建，李慶華△，龐天翔△
(中國醫(yī)學科學院北京協(xié)和醫(yī)學院，血液學研究所血液病醫(yī)院，實驗血液學國家重點實驗室，北京100032)

目的:探討靶向干擾CIAPIN1基因表達對慢性粒細胞白血病(CML)細胞系K562細胞增殖能力的影響。方法:針對CIAPIN1基因構(gòu)建shRNA真核表達載體并穩(wěn)定轉(zhuǎn)染K562細胞系。Real-time PCR及Western blotting技術(shù)鑒定干擾效率; CIAP-IN1基因沉默之后，改良MTT法檢測細胞活力的變化;甲基纖維素集落形成實驗觀察細胞集落形成大小和數(shù)量的變化;流式細胞術(shù)檢測細胞周期的改變;將K562細胞接種到裸鼠體內(nèi)皮下，觀察細胞在裸鼠體內(nèi)成瘤能力的變化。結(jié)果: CIAPIN1基因表達下調(diào)后，K562細胞的活力下降;集落形成數(shù)量減少和集落減小; G1期細胞數(shù)量增加;小鼠體內(nèi)成瘤能力明顯降低。結(jié)論:下調(diào)CIAPIN1基因表達能夠抑制K562細胞在體外及體內(nèi)的增殖能力。

國家自然科學基金資助項目(No.81170510; No.81402432; No.81090412) ;天津市自然科學基金資助項目(No.14JCZDJC34900)

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