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        硫化氫在低剪切應(yīng)力導(dǎo)致內(nèi)皮細(xì)胞自噬障礙中的作用

        2015-01-26 04:36:31唐志晗危當(dāng)恒任曉晴肖衛(wèi)晉劉錄山姜志勝南華大學(xué)心血管疾病研究所動脈硬化學(xué)湖南省重點實驗室湖南衡陽421001
        中國病理生理雜志 2015年10期
        關(guān)鍵詞:南華大學(xué)剪切應(yīng)力硫化氫

        唐 蕙,唐志晗,任 重,彭 娟,危當(dāng)恒,任曉晴,肖衛(wèi)晉,劉錄山,姜志勝(南華大學(xué)心血管疾病研究所,動脈硬化學(xué)湖南省重點實驗室,湖南衡陽421001)

        硫化氫在低剪切應(yīng)力導(dǎo)致內(nèi)皮細(xì)胞自噬障礙中的作用

        唐蕙,唐志晗,任重,彭娟,危當(dāng)恒,任曉晴,肖衛(wèi)晉,劉錄山,姜志勝△
        (南華大學(xué)心血管疾病研究所,動脈硬化學(xué)湖南省重點實驗室,湖南衡陽421001)

        目的:探討硫化氫在低剪切應(yīng)力誘導(dǎo)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVECs)自噬障礙中的作用。方法: HUVECs經(jīng)培養(yǎng)傳代分為3組:對照組、低剪切應(yīng)力組(5 dyn/cm2)和正常剪切應(yīng)力組(15 dyn/cm2)。在平板流動腔上對內(nèi)皮細(xì)胞進(jìn)行剪切應(yīng)力處理,Western blot檢測CSE蛋白水平,RT-PCR檢測CSE的mRNA含量,熒光顯微鏡MDC染色觀察自噬表泡,免疫熒光檢測LC3表達(dá),Western blot檢測Beclin1LC3p62蛋白水平,以評估不同剪切應(yīng)力下,誘導(dǎo)HUVECs自噬障礙過程中內(nèi)源性H2S生成的變化。接下來用CSE干擾siRNA及CSE過表達(dá)質(zhì)粒分別轉(zhuǎn)染HUVECs后,再分別用5/15 dyne/cm2處理1 h,測自噬表達(dá)情況。結(jié)果: WB結(jié)果顯示,與正常剪切應(yīng)力組相比,低剪切應(yīng)力組CSE表達(dá)明顯減少。Beclin1及LC3表達(dá)減少,p62表達(dá)增高,免疫熒光結(jié)果顯示低剪切應(yīng)力組LC3表達(dá)減少。提示低剪切應(yīng)力組自噬障礙。結(jié)論:低剪切應(yīng)力誘導(dǎo)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞存在自噬障礙,其與CSE表達(dá)降低相關(guān)。

        △E-mail: zsjiang2005@163.com

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