文 / 蒲秀瑛，任 菁，劉 璐，馬小龍，李海兵，李曉玥（蘭州理工大學(xué) 生命科學(xué)與工程學(xué)院 甘肅省中藏藥篩選評(píng)價(jià)及深加工重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，甘肅 蘭州 730050）

甘 草 不 同 提 取 部 位 對(duì)a-葡 萄 糖 苷 酶 活 性 的 影 響

文 / 蒲秀瑛，任 菁，劉 璐，馬小龍，李海兵，李曉玥（蘭州理工大學(xué) 生命科學(xué)與工程學(xué)院 甘肅省中藏藥篩選評(píng)價(jià)及深加工重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，甘肅 蘭州 730050）

目的：研究甘草不同提取物對(duì)a-葡萄糖苷酶活性的影響。方法：采用PNPG法，以阿卡波糖為陽(yáng)性對(duì)照，對(duì)采取不同提取方法制備得到的甘草提取物進(jìn)行α-葡萄糖苷酶抑制活性篩選。結(jié)果：甘草多糖的抑制效果最佳，皂苷和生物堿的抑制作用較好，黃酮的抑制作用較弱。結(jié)論：本實(shí)驗(yàn)為今后進(jìn)一步從甘草中分離純化出高活性的α-葡萄糖苷酶抑制活性因子提供了科學(xué)依據(jù)。

甘草；阿卡波糖；α-葡萄糖苷酶；α-葡萄糖苷酶抑制因子

甘草為豆科植物甘草屬甘草的根及根狀莖，氣微，味甜而特殊[1]。功能主治清熱解毒、祛痰止咳等[2]。甘草的主要化學(xué)成分是三萜類和黃酮類化合物，還有少量生物堿、多糖、木質(zhì)素、香豆素和多種氨基酸。具有抑制單胺氧化酶、抑制醛糖還原酶、抗癌等功效[3-7]。

α-葡萄糖苷酶抑制劑是一類以延緩腸道碳水化合物吸收而達(dá)到治療糖尿病的口服降糖藥物[8]，已廣泛應(yīng)用于臨床，具有延緩單糖吸收、降低餐后高血糖之功效，因此，開發(fā)α-葡萄糖苷酶抑制劑已成為熱點(diǎn)，本研究旨在從甘草中分離提取α-葡萄糖苷酶抑制劑活性成分。

1、材料與儀器

1.1 材料

甘草，購(gòu)于蘭州市黃河藥材市場(chǎng)。

1.2 試劑與儀器

試劑：PNPG購(gòu)自北京博奧拓達(dá)科技有限公司，α-葡萄糖苷酶購(gòu)自江蘇瑞陽(yáng)生物科技有限公司，其他試劑均為分析純。

儀器：紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)（上海精密科學(xué)儀器有限公司752N）；電子天平（長(zhǎng)沙湘平科技發(fā)展有限公司ES-2002H）；數(shù)顯恒溫水浴鍋（江蘇省金壇市榮華儀器制造有限公司HH-2）；循環(huán)水式多用真空泵（鄭州長(zhǎng)城科工貿(mào)有限公司）；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀RE-52（上海亞榮生化儀器廠）。

2 、方法

2.1 甘草提取物的制備

甘草取50g，用95%的乙醇提取2次，每次2小時(shí)，抽濾，合并濾液，濾液濃縮至浸膏，加水溶解后，再依次用氯仿，乙酸乙酯，正丁醇萃取，分別得到甘草提取物多糖，生物堿，黃酮，皂苷。避光，冷藏，待用做分定性檢測(cè)及酶動(dòng)力學(xué)測(cè)定。

2.2 甘草提取物對(duì)α-葡萄糖苷酶抑制活性的測(cè)定

反應(yīng)系統(tǒng)為P H 6.8磷酸鉀緩沖液2.0mL、8mmol/LPNPG 0.1mL、8.0mg/mLα-葡萄糖苷酶0.1mL，37℃下保溫10min后加入8mmol/LPNPG 0.1mL，于37℃下反應(yīng)15min，加入0.lmol/LNa2CO3終止液2mL，在405nm處測(cè)定吸光度。將5.0mg/mL甘草提取物及陽(yáng)性藥物阿卡波糖分別加入到酶活力測(cè)定系統(tǒng)中，進(jìn)行測(cè)定。

3 、結(jié)果

甘草各組分對(duì)α-葡萄糖苷酶抑制活性測(cè)定結(jié)果如圖1所示。

Study on Inhibifive Effect of Extracts from Different Parts of Radix Glycyrrhizae on α-Glucosidase

PU Xiu-ying*, REN jing, LIU Lu,MA Xiao-long, LI Hai-bing,LI Xiao-yue
College of Life Science and Engineering, Lanzhou University of Technology
The Key Lab of Screening, Evaluation and Advanced Processing of TCM and Tibetan Medicine, Gansu Educational Department,
Lanzhou 730050, China

Objective: To fnd screening of α-glucosidase inhibitors from natural products Radix Glycyrrhizae. Method: In this experiment, PNPG was used to examine the activity of α-glucosidase, compared to positive drug (Acarbose) reaction rate, selecting screening of α-glucosidase inhibitors from polysaccharides,alkaloids,favonoids and saponins. Result：The result indicates polysaccharide have better inhibitory effect on α-glucosidase, close to the acarbose, the second is saponin and alkaloids , favonoids were weak activity. Conclusion：The further separation and purifcation for the effective part, they will be novel a-glucosidase inhibitors from Radix Glycyrrhizae.

Radix Glycyrrhizae; Acarbose; α-glucosidase;α- glucosidase inhibitor

蘭州理工大學(xué)科研基金項(xiàng)目（10-0089）