文 / 馬建蘋，張慶（蘭州理工大學(xué)生命科學(xué)與工程學(xué)院, 甘肅 蘭州, 730050)

接骨草花乙酸乙酯部位化學(xué)成分研究

文 / 馬建蘋，張慶（蘭州理工大學(xué)生命科學(xué)與工程學(xué)院, 甘肅 蘭州, 730050)

目的：研究忍冬科接骨木屬植物接骨草Sambucus chinensis Lindl花乙醇提取物乙酸乙酯萃取部位的化學(xué)成分。方法：用乙醇加熱回流提取法對(duì)接骨草花進(jìn)行提取，采用硅膠、凝膠、反相柱色譜等方法進(jìn)行分離，并通過理化常數(shù)和NMR等多種波譜學(xué)方法對(duì)化合物結(jié)構(gòu)進(jìn)行鑒定。結(jié)果：從接骨草花乙醇提取物乙酸乙酯部位分離得到了6個(gè)化合物，分別鑒定為烏索酸（1），齊墩果酸（2），山奈酚 3-O-β-D-葡萄糖苷（3），對(duì)羥基苯甲酸（4），丁子香基-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（5），胡蘿卜苷（6）。結(jié)論：化合物5為首次從該屬植物中分離得到，化合物4為首次從該植物中分離得到。

接骨草；花；乙酸乙酯部位；化學(xué)成分

接骨草為忍冬科接骨木屬植物接骨草(Sambucus chinensis Lindl) 的干燥全草，又稱陸英、臭草，分布于華北、華東、華南、西南及陜西、甘肅、寧夏等省區(qū)[1]。以根、莖及葉入藥，具有活血散 、祛風(fēng)除濕、通經(jīng)活絡(luò)之功效，能治扭傷、腰肌勞損、骨折、風(fēng)濕痹痛等癥，又能做獸藥治牛跌傷[2-3]。藥理實(shí)驗(yàn)證實(shí)接骨草提取物具有抗肝炎[4]、止痛[5]和消炎的作用。臨床用于治療急性病毒性肝炎、腳氣、腎炎水腫、跌打損傷、骨折疼痛、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、瘡癰腫毒[6-7]等癥。本研究采用多種色譜方法對(duì)接骨草花的乙酸乙酯萃取部位進(jìn)行化學(xué)成分研究，為進(jìn)一步高效合理利用開發(fā)甘肅省接骨草藥用資源提供了科學(xué)依據(jù)。

1、材料

本實(shí)驗(yàn)所用藥材采集于甘肅省蘭州市榆中縣官灘溝，經(jīng)甘肅中醫(yī)學(xué)院晉玲教授鑒定為接骨草(Sambucus chinensis Lindl.)，揀選花，干燥，粉碎，備用。

薄層色譜、柱色譜硅膠及硅膠GF254均為青島海洋化工廠產(chǎn)品；Sephadex LH-20購自上海安瑪西亞生物技術(shù)有限公司；ODS (GH) 購自北京京京時(shí)代科技發(fā)展有限公司；所用溶劑均為分析純，由上海振興化學(xué)試劑廠和天津化學(xué)試劑廠生產(chǎn)。

2、提取與分離

將干燥的接骨草花用乙醇加熱回流法提取3次，合并提取液，減壓濃縮蒸干，得總浸膏124g。浸膏加適量水成混懸液，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，分別得到石油醚萃取物36g，乙酸乙酯萃取物25g，正丁醇萃取物33g，水萃取物22g。

乙酸乙酯萃取物，經(jīng)反復(fù)硅膠柱色譜和Sephadex LH-20凝膠色譜得化合物1（39mg）、2（49mg）、3（174mg ）、4（26.2 mg）、5（14.9mg ）和6（15mg）。

3、結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1 白色粉末 (甲醇)。EI-MS m/ z :456 [M]+；1H-NMR (600MHz, DMSO-d6) δ:0.65-1.07

(21H, H-23, 24, 25, 26, 27, 29, 30), 3.00 (1H, m, H-3), 5.15 (1H, br s, H-12), 11.97 (1H, s,COOH)；13C-NMR (150MHz, DMSO-d6) δ:38.2 (C-1), 27.5 (C-2), 76.8 (C-3), 38.4 (C-4), 54.8 (C-5), 18.5 (C-6), 32.7 (C-7), 38.5 (C-8), 47.0 (C-9), 36.6 (C-10), 22.8 (C-11), 121.5 (C-12), 143.8 (C-13), 41.3 (C-14), 27.0 (C-15), 23.8 (C-16), 45.7 (C-17), 40.8 (C-18), 45.4 (C-19), 30.4 (C-20), 33.3 (C-21), 32.1 (C-22), 28.3 (C-23), 16.0 (C-24), 15.1 (C-25), 16.8 (C-26),25.6 (C-27), 178.6 (C-28), 32.8 (C-29), 23.4 (C-30)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)對(duì)照基本一致[8]，且經(jīng)與對(duì)照品TLC檢測(cè)Rf值一致，故鑒定該化合物為烏索酸。

化合物2 白色晶體（甲醇）。EI-MS m/z:456 [M]+。1H-NMR (600MHz, DMSO-d6) δ:0.68-1.05 (21H, H-23, 24, 25, 26, 27, 29, 30), 3.01 (1H, m, H-3), 5.14 (1H, br s,H-12), 11.96 (1H, s, COOH)；13C-NMR (150MHz, DMSO-d6) δ:38.4 (C-1), 22.8 (C-2), 76.8 (C-3), 38.5 (C-4), 52.4 (C-5), 17.0 (C-6), 36.5 (C-7), 38.4 (C-8), 47.0 (C-9), 38.4 (C-10), 23.8 (C-11), 124.6 (C-12), 138.2 (C-13), 41.6 (C-14), 32.7 (C-15), 21.1 (C-16), 46.8 (C-17), 54.8 (C.18), 30.4 (C-19), 28.3 (C-20), 27.5 (C-21), 36.6 (C-22), 23.4 (C-23), 16.9 (C-24), 16.1 (C-25), 15.2 (C-26), 27.0 (C-27), 178.3 (C-28), 18.0 (C-29), 23.3 (C-30)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)對(duì)照基本一致[9]，且經(jīng)與對(duì)照品TLC檢測(cè)Rf值一致，故鑒定該化合物為齊墩果酸。

化合物3 黃色固體（甲醇）ESI-MS m/z:449.2 [M+H]+, 471.3 [M+Na]+。1H-NMR (600MHz, C5D5N) δ:3.61-4.43 (6H, m, Glc-H-2, 3, 4, 5, 6), 6.34 (1H, d, J=7.8Hz, Glc-H-1), 6.75 (2H, d, J=2.4Hz, H-6, H-8), 7.23 (2H, d, J=9.0Hz, H-3', H-5'), 8.45 (2H, d, J=9.0Hz, H-2', H-6')；13C-NMR (150MHz, C5D5N) δ:157.3 (C-2), 135.0 (C-3), 178.7 (C-4), 157.5 (C-5), 99.8 (C-6), 165.9 (C-7), 94.5 (C-8), 162.7 (C-9), 105.2 (C-10), 121.9 (C-1'), 131.8 (C-2',C-6'), 161.6 (C-4'), 116.0 (C-3',C-5'), 103.9 (Glc-1), 76.0 (Glc-2), 78.4 (Glc-5), 71.4 (Glc-4), 79.0 (Glc-3), 62.5 (Glc-6)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)對(duì)照基本一致[10]，且經(jīng)與對(duì)照品TLC檢測(cè)Rf值一致，故鑒定該化合物為山奈酚 3-O-β-D-葡萄糖苷。

化合物4 無色晶體（丙酮）。ESI-MS m/z:137.1 [M-H]-。1H-NMR (600MHz, CD3COCD3) δ:7.93 (2H, d, J=9.0Hz, H-2, H-6), 6.93 (2H, d, J=9.0Hz, H-3, H-5)；13C-NMR (150MHz, CD3COCD3) δ:167.9 (C-7), 162.6 (C-4), 132.6 (C-2, C-6), 122.5 (C-1), 115.6 (C-3, C-5)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)對(duì)照基本一致[11]，且經(jīng)與對(duì)照品TLC檢測(cè)Rf值一致，故鑒定該化合物為對(duì)羥基苯甲酸。

化合物5 無色晶體（甲醇）ESI-MS m/z:343.9 [M+NH4]+。1H-NMR (600MHz, CD3OD) δ:6.99 (1H, d, J=8.4Hz, H-6), 6.73 (1H, d, J=1.8Hz, H-3), 6.63 (1H, dd, J=8.4, 1.8Hz, H-5), 5.85 (1H, m, H-8), 4.96 (1H, dd, J=16.8, 1.8Hz, H-9b), 4.94 (1H, dd, J=10.2, 1.8Hz, H-9a), 4.75 (1H, d, J=7.2Hz, H-1'), 3.76 (1H, d, J=10.2Hz, H-6'b), 3.74 (3H, s, OMe), 3.60 (1H, m, H-6'a), 3.21 (2H, m, H-7)；13C-NMR (150MHz, CD3OD) δ:146.3 (C-1), 150.8 (C-2), 118.3 (C-3), 139.0 (C-4), 122.1 (C-5), 114.2 (C-6), 40.7 (C-7), 136.5 (C-8), 115.9 (C-9), 56.7 (2-OCH3), 103.1 (C-1'), 74.9 (C-2'), 78.2 (C-3'), 71.4 (C-4'), 77.8 (C-5'), 62.5 (C-6')。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)對(duì)照基本一致[12]，且經(jīng)與對(duì)照品TLC檢測(cè)Rf值一致，故鑒定該化合物為丁子香基O-β-D-吡喃葡萄糖苷。

化合物6 白色粉末（甲醇）。EI-MS m/z:576.8[M+H]+。1H-NMR (400MHz, DMSO-d6) δ:5.32 (1H, d, t, J=4.4Hz, H-6), 3.75 (1H, m, H-3), 5.05 (1H, d, t, J=6.0Hz, H-1')。13C-NMR (100MHz, DMSO-d6) δ:38.3 (C-1), 29.3 (C-2), 76.8 (C-3), 40.3 (C-4), 140.4 (C-5), 121.2 (C-6), 33.3 (C-7), 31.4 (C-8), 49.6 (C-9), 25.5 (C-10), 20.6 (C-11), 27.8 (C-12), 41.8 (C-13), 56.2 (C-14), 23.9 (C-15), 41.6 (C-16), 55.4 (C-17), 11.7 (C-18), 19.1 (C-19), 36.4 (C-20), 19.0 (C-21), 35.4 (C-22), 36.8 (C-23), 45.1 (C-24), 28.8 (C-25), 18.9 (C-26), 19.7 (C-27), 22.6 (C-28), 11.8 (C-29), 102.5 (C-l'), 73.4 (C-2'), 76.9 (C-3'), 70.0 (C-4'), 76.7 (C-5'), 61.0 (C-6')。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)對(duì)照基本一致[13]，且經(jīng)與對(duì)照品TLC檢測(cè)Rf值一致，故鑒定該化合物為胡蘿卜苷。

[1] 鄒盛勤, 陳武. 中藥陸英研究進(jìn)展 [J]. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué), 2006, 34 (13): 3092-3094.

[2] 江蘇新醫(yī)學(xué)院編. 中藥大辭典 [M]. 上海:上海人民出版社, 1977: 1184.

[3] 徐亮, 陳功錫, 張代貴, 等. 接骨木屬植物研究進(jìn)展 [J]. 中國野生植物資源, 2010, 29 (5): 1.

[4] 楊威, 王茜莎, 王敏偉, 等. 陸英提取物對(duì)急性化學(xué)性肝損傷的保護(hù)作用 [J]. 沈陽藥科大學(xué)學(xué)報(bào), 2006, 23 (8): 524-528.

[5] 翁進(jìn), 鄭尚忠, 張文清. 陸英的臨床應(yīng)用及其有效成份淺析[J]. 福建藥學(xué)雜志, 1994, 6 (1): 33-34.

[6] 中華人民共和國衛(wèi)生部藥典委員會(huì). 中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn) [S], 中藥分冊(cè). 第一冊(cè), 1992: 46.

[7] 廣西壯族自治區(qū)衛(wèi)生廳. 廣西中藥材標(biāo)準(zhǔn) [S]. 南寧: 廣西科學(xué)技術(shù)出版社, 1990: 56.

[8] W Qu, J Y Liang, M R Li. Chemical constituents from Houttuynia Cordata [J]. Chinese Journal of Natural Medicines, 2009, 7 (6): 425-427.

[9] 劉雄, 高健德, 趙磊. 太白杜鵑的化學(xué)成分研究 [J]. 中草藥, 2009, 40 (11): 1723-1725.

[10] N Tanaka, H Yuhara, H Wada, et al. Phenolic constituents of Pteridium esculentum [J]. Phytochemistry, 1993, 32 (4): 1037-1039.

[11] 陳永勝, 林小燕, 鐘林靜, 等. 三葉蔓荊的化學(xué)成分研究[J]. 天然產(chǎn)物研究與開發(fā), 2011, 06: 1011-1013, 1048.

[12] T Fujita, M Nakayama. Perilloside A, a monoterpene glucoside from Perilla frutescens [J]. Phytochemistry, 1992, 31 (9): 3265-3267.

[13] 葉文才, 趙守訓(xùn), 沈漣漪, 等. 安徽銀蓮化學(xué)成分的研究(I) [J]. 中國藥科大學(xué)學(xué)報(bào), 1990, 2l (3): 139.

甘肅省自然科學(xué)基金項(xiàng)目(1107RJZA129)