佟 麗

(河北省豐寧縣土城鎮(zhèn)人民政府,河北豐寧 068350)

生物堿提取方法及作用研究進(jìn)展

佟 麗

(河北省豐寧縣土城鎮(zhèn)人民政府,河北豐寧 068350)

1 生物堿的提取方法

1.1 超聲波提取

超聲波提取法一般作為生物堿的輔助提取法，它的3個(gè)理論依據(jù)是超聲波熱學(xué)機(jī)理、超聲波機(jī)械機(jī)制和空化作用。在超聲場(chǎng)中，物料吸收聲能，溫度升高，有效成分溶解加速，超聲空化產(chǎn)生的瞬間高壓造成生物細(xì)胞壁及整個(gè)生物體破裂，同時(shí)，超聲波產(chǎn)生的振動(dòng)作用加強(qiáng)了胞內(nèi)物質(zhì)的釋放、擴(kuò)散及溶解。被浸提的物質(zhì)在被破碎瞬間，生物活性保持不變，同時(shí)，能提高破碎速度和提取率。王忠華等分別采用超聲波輔助提取法和搖床振蕩（浸提）法提取浙貝母生物堿，經(jīng)比較盡管超聲波法提取的生物堿獲得率與傳統(tǒng)的搖床浸提法相比差異不顯著，但該方法更快速，且成本低。

1.2 超聲-微波協(xié)同萃取技術(shù)

超聲-微波協(xié)同萃取技術(shù)及裝置是將直接超聲振動(dòng)與開放式微波兩種作用方式相結(jié)合，充分利用超聲波振動(dòng)的空穴作用以及微波的高能作用，克服了常規(guī)超聲波和微波萃取之不足。具有速度快、能耗小、溶劑用量小，回收率高等優(yōu)點(diǎn)外，還有利于極性和熱不穩(wěn)定性組分的萃取，避免長(zhǎng)時(shí)間高溫高壓條件下萃取或合成反應(yīng)引起的分解，從而不破壞所萃取的有機(jī)物分子的結(jié)構(gòu)。

1.3 超臨界流體萃取

超臨界萃取技術(shù)是利用超臨界流體所具有的特殊溶解能力，進(jìn)行天然植物有效成分提取，超臨界流體在具有較高的溶解能力的同時(shí)，還具有較高的傳質(zhì)速率、較好的流動(dòng)性能和很快到達(dá)平衡的能力。其原理是利用壓力和溫度對(duì)超臨界流體溶解能力的影響，而實(shí)現(xiàn)對(duì)極性大小、沸點(diǎn)高低和分子量大小不同的組分間的選擇性分離。而且，由于溫度和壓力在臨界點(diǎn)附近的微小變化能夠引起溶解能力的顯著變化，這使得超臨界流體具有良好的可調(diào)節(jié)性和選擇性。趙宋亮等利用超臨界CO2流體萃取菊三七中的總生物堿，提取率為索氏提取法的1.5倍，耗時(shí)卻僅為常規(guī)法的1/2。

2 生物堿的免疫調(diào)節(jié)作用

2.1 對(duì)淋巴細(xì)胞的影響

童鯤等通過巖黃連總生物堿對(duì)小鼠免疫功能的影響的研究得出巖黃連總生物堿增強(qiáng)T細(xì)胞產(chǎn)生IL-2和IFN-的水平。李建國(guó)等通過建立DNFB誘發(fā)的小鼠ACD模型，以不同劑量的氧化苦參堿對(duì)小鼠腹腔進(jìn)行注射。腹腔注射氧化苦參堿能明顯提高小鼠外周血中CD4+、CD25+T細(xì)胞的數(shù)量，即氧化苦參堿對(duì)免疫系統(tǒng)的影響呈雙向作用，氧化苦參堿是一種雙向免疫調(diào)節(jié)劑。伍斌等研究氧化苦參堿（OMT）對(duì)淋巴細(xì)胞增殖和調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（Tr）數(shù)量的影響，結(jié)果表明，OMT對(duì)小鼠淋巴結(jié)T細(xì)胞增殖呈雙向作用；腹腔注射OMT能明顯提高小鼠外周血中CD4+、CD25+T細(xì)胞數(shù)量；提示：OMT是一種雙向免疫調(diào)節(jié)劑。

2.2 對(duì)免疫器官的影響

動(dòng)物的免疫器官主要是脾臟和胸腺，家禽還包括法氏囊。免疫器官的臟器系數(shù)是衡量機(jī)體免疫功能的重要指標(biāo)。有研究表明，甘肅棘豆生物堿部位能顯著增強(qiáng)KM小鼠脾指數(shù)、胸腺指數(shù)及脾細(xì)胞增值率。

2.3 對(duì)細(xì)胞因子的影響

細(xì)胞因子（Cytkoine，CK）是由活化的免疫細(xì)胞和某些基質(zhì)細(xì)胞分泌的，介導(dǎo)和調(diào)節(jié)免疫、炎癥反應(yīng)的小分子多肽。細(xì)胞因子具有多種調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答功能，其種類繁多，目前，廣泛研究的細(xì)胞因子達(dá)60多種，包括白細(xì)胞介素（IL）、集落刺激因子（CFS）、干擾素（IFN）、腫瘤壞死因子（TNF）、生長(zhǎng)因子、趨化性因子等。通過研究白毛藤生物堿對(duì)小鼠脾臟細(xì)胞因子mRNA表達(dá)的影響，采用RT-PRC技術(shù)檢測(cè)了IL-2、IL-12、IFN-γ和TNF-α、mRNA表達(dá)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明白毛藤生物堿能提高IL-2、IL-12、TNF-α及IFN-γmNRA表達(dá)水平。

3 結(jié)語

生物堿的提取方法很多，以上只綜述了其中的幾種。一種好的提取方法不僅要求有較高的回收率，而且要保證該提取物的生物活性不發(fā)生變化。通過以上綜述可知應(yīng)用半仿生提取生物堿的報(bào)道還較少，但是，該方法較為符合藥物的在胃腸吸收、代謝，從而使提取的生物堿能發(fā)揮最大的藥效。超聲波提取法通過瞬時(shí)超聲波破碎，被浸提的物質(zhì)在被破碎瞬間，生物活性保持不變。還有就是酶提取法，該方法反應(yīng)條件溫和，效率高，也是生物堿提取的首選之一。生物堿的提取必須做到標(biāo)準(zhǔn)化和規(guī)范化，由此才能為研究其作用機(jī)制及結(jié)構(gòu)與功能之間關(guān)系提供可靠的保障。

生物堿是一種新型的免疫調(diào)節(jié)劑，可作用于T 細(xì)胞、B 細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等主要免疫活性細(xì)胞，調(diào)節(jié)機(jī)體的細(xì)胞免疫功能和體液免疫功能。從所報(bào)道的研究結(jié)果來看，不同的生物堿對(duì)免疫調(diào)節(jié)不盡相同，同一生物堿對(duì)免疫細(xì)胞的影響也不同，后者說明有些生物堿是雙向免疫調(diào)節(jié)劑。近年來，國(guó)內(nèi)外學(xué)者多從免疫增強(qiáng)效應(yīng)方面對(duì)中藥提取物進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究，從而忽視了其免疫抑制效應(yīng)，隨著自身免疫病不斷增多，就要求開發(fā)高效低毒的中藥免疫抑制劑。所以生物堿的雙向免疫調(diào)節(jié)顯示了優(yōu)勢(shì)，將為此提供可能。