李鳳玲 呂宗德

(南京市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心,江蘇南京 210001)

三黃雞腎型傳染性支氣管炎和H9亞型禽流感的診斷

李鳳玲 呂宗德

(南京市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心,江蘇南京 210001)

雞腎型傳染性支氣管炎是由腎型傳染性支氣管炎病毒引起的雞的一種以腎病變?yōu)橹?，呼吸道癥狀較重的急性高度接觸性呼吸道傳染病。與H9亞型禽流感混合感染時(shí)，導(dǎo)致病情加重，發(fā)病率和死亡率均增加。

傳染性支氣管炎 H9亞型禽流感 診斷

雞傳染性支氣管炎臨診特征是呼吸困難、發(fā)出啰音、咳嗽、張口呼吸、打噴嚏，主要引起腎臟病變和生殖道病變，以腎型病變?yōu)橹鞯碾u傳染性支氣管炎稱為雞腎型傳染性支氣管炎。該病的傳染方式主要是通過(guò)空氣傳播，也可以通過(guò)飼料、飲水、墊料等傳播。雖然該病毒對(duì)外界的抵抗力不強(qiáng)，但傳染性極強(qiáng)，如果一只雞或幾只雞發(fā)病，1～2天內(nèi)會(huì)很快波及全群。H9亞型禽流感屬于低致病性禽流感，可使雞群出現(xiàn)輕度呼吸道癥狀，發(fā)病形式是流感繼發(fā)氣囊炎形式，主要表現(xiàn)部分雞腫頭腫臉、拉綠色糞便、有呼吸道癥狀、眼睛流淚、縮頭閉眼等，經(jīng)常與雞傳染性支氣管炎病毒混合感染，管理不善或中后期必定出現(xiàn)嚴(yán)重的繼發(fā)感染。近幾年來(lái)，由于養(yǎng)殖業(yè)的迅速發(fā)展，本病呈逐年擴(kuò)散流行發(fā)展的趨勢(shì)，發(fā)病率可達(dá)100%，死亡率達(dá)10%～40%，給養(yǎng)殖業(yè)帶來(lái)巨大的經(jīng)濟(jì)損失。

1 發(fā)病情況

2014年10月16日，南京一養(yǎng)雞場(chǎng)購(gòu)進(jìn)5000羽雞苗，按免疫程序相繼進(jìn)行了新城疫、禽流感（H5N1RE-6-7二價(jià)苗）、法氏囊、雞球蟲(chóng)的免疫。2014年12月31日，雞群出現(xiàn)呼吸道癥狀、精神沉郁，打堆，羽毛蓬松，縮頸垂翅，食量減少。在發(fā)病前期投喂多西環(huán)素和雙黃連等藥進(jìn)行治療但無(wú)明顯效果。養(yǎng)殖場(chǎng)主認(rèn)為是新城疫，于2015年1月5日進(jìn)行新城疫免疫接種，導(dǎo)致雞群死亡率猛增，截至2015年1月10日，雞群死亡數(shù)已超過(guò)總飼養(yǎng)量的一半。針對(duì)上述情況，我們?nèi)ガF(xiàn)場(chǎng)進(jìn)行了流行病學(xué)調(diào)查、剖檢和現(xiàn)場(chǎng)采樣，并將樣品帶回實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)。

2 臨床癥狀

發(fā)病初期主要表現(xiàn)有輕微呼吸道癥狀，持續(xù)4d左右后呼吸道癥狀消失，出現(xiàn)表面上的康復(fù)，隨著病情的發(fā)展整個(gè)雞群出現(xiàn)伸頸張口喘氣，精神沉郁，羽毛松亂，垂翅，流淚，流涎，眼腫，甩鼻（鼻腔中有黏液）甩頭噴嚏，雞冠發(fā)紫，雞爪干癟，持續(xù)排大量灰白色的水樣或綠色糞便，并含有大量尿酸鹽。白天聽(tīng)到啰音，夜間特別明顯。最后病雞因嚴(yán)重衰竭而死亡。

3 剖檢變化

解剖發(fā)現(xiàn)，病死雞鼻腔中有膿性的分泌物，氣管黏膜有充血或出血，黏液較多，肺充血，氣囊渾濁，含有黃色干酪性滲出物。肝大，易碎且發(fā)暗。腎臟明顯腫大出血，腎小管內(nèi)尿酸鹽沉積而擴(kuò)張，充血，蓄積大量白色尿酸鹽。輸尿管尿酸鹽沉積而變粗。個(gè)別雞只十二指腸有出血，空腸和盲腸有不同程度出血，盲腸扁桃體腫大，出血，泄殖腔充血。其他器官無(wú)明顯病變。

4 診斷

4.1 病料涂片鏡檢

分別取病死雞的心、肝、脾進(jìn)行觸片，革蘭氏染色鏡檢，均未見(jiàn)可疑細(xì)菌。

4.2 細(xì)菌分離和培養(yǎng)特性觀察

分別取上述病死雞的肝、脾、腎、肺接種于營(yíng)養(yǎng)肉湯、普通瓊脂、麥康凱瓊脂培養(yǎng)基上，37℃培養(yǎng)24 h。均未發(fā)現(xiàn)可疑菌落。

4.3 禽流感抗體監(jiān)測(cè)

分別進(jìn)行禽流感H5N1、H9N1、H7N9三種抗體的檢測(cè)，采用血凝-血凝抑制試驗(yàn)方法，抗原和陽(yáng)性血清均購(gòu)自哈維科，檢測(cè)結(jié)果顯示，20份雞血清H5N1禽流感抗體效價(jià)均大于lg24，H9N1禽流感抗體效價(jià)均大于lg24，H7N9抗體效價(jià)均為0。

4.4 新城疫抗體檢測(cè)

采用血凝-血凝抑制試驗(yàn)方法，抗原和陽(yáng)性血清購(gòu)自青島易邦公司。檢測(cè)結(jié)果顯示，20份雞血清新城疫抗體效價(jià)均大于lg25。

4.5 分子生物學(xué)鑒定

用熒光PCR方法，分別進(jìn)行了H5N1、H9N1、H7N9、新城疫、雞傳染性支氣管炎5種病原的檢測(cè)。所用試劑盒為上海之江生物科技股份有限公司病毒核酸測(cè)定試劑盒（熒光PCR法）分別對(duì)上述病死雞的肝、脾、腎、肺、血液，上呼吸道和泄殖腔的分泌物進(jìn)行了檢測(cè)，結(jié)果顯示，H5N1、H7N9、新城疫病原為陰性，H9N1和雞傳染性支氣管炎病原為陽(yáng)性。

根據(jù)流行病學(xué)情況調(diào)查，臨床癥狀和病理變化觀察，以及實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)，分析判定認(rèn)為，該戶雞群發(fā)病的病原為H9亞型禽流感和雞傳染性支氣管炎，鑒于雞群腎臟病變明顯，診斷為H9亞型禽流感和雞傳染性支氣管炎混合感染。

4.6 結(jié)論

雞腎型傳染性支氣管炎在鑒別診斷上應(yīng)注意與新城疫、雞傳染性鼻炎、雞傳染性喉氣管炎的病理變化有許多相似之處，應(yīng)注意加以鑒別。雞新城疫一般發(fā)病較嚴(yán)重，在雛雞中常見(jiàn)到神經(jīng)癥狀。雞傳染性喉氣管炎很少發(fā)生于雛雞，而傳染性支氣管炎則在雛雞和成雞均可以發(fā)病。該雞場(chǎng)主將該病誤診為雞新城疫，并進(jìn)行新城疫疫苗緊急噴霧接種，由于雞群本身呼吸困難，噴霧接種后，加重病情，在1 d內(nèi)造成大批雞群呼吸衰竭死亡。所以我們?cè)陔u群發(fā)病后，一定要謹(jǐn)慎用藥。

H9流感通常與其他病毒混感，病禽臨床癥狀和病理變化比較復(fù)雜，造成診斷困難。另外針對(duì)H9繼發(fā)感染引起“氣囊炎”病例[1]，我們要正確理解病變形成的原因，不要誤判肺臟病變病因。肺臟出現(xiàn)、充血、腫脹、出血、發(fā)灰黑、纖維素養(yǎng)肺炎是感染或混合感染后的一個(gè)嚴(yán)重的炎性病變。不要誤認(rèn)為是 “新病”。

造成本病發(fā)病的原因很多：飼養(yǎng)管理不當(dāng)可導(dǎo)致該病發(fā)生，雞日糧供給的營(yíng)養(yǎng)不穩(wěn)定，營(yíng)養(yǎng)成分不全面，免疫應(yīng)激，母源抗體低等都是致病因素。免疫水平低，密集的飼養(yǎng)，寒冷，過(guò)熱，通風(fēng)不良等因素可使雞只抵抗力下降，蛋白和能量比例不當(dāng)，飼料中蛋白質(zhì)含量過(guò)高可能是發(fā)生本病的誘因。不良環(huán)境條件易發(fā)生本病，雞舍不清潔，潮濕，通風(fēng)不良也可導(dǎo)致舍內(nèi)空氣中氨及CO2濃度高，空氣中含塵量大，溫度或濕度偏高或偏低等。

5 防控措施

對(duì)傳染性支氣管炎和H9感染目前尚無(wú)有效的治療方法，采取綜合防控措施，平時(shí)要做好飼養(yǎng)管理、搞好環(huán)境衛(wèi)生、消毒工作、加強(qiáng)通風(fēng)換氣、適當(dāng)提高舍溫2℃～3℃、適當(dāng)?shù)拿芏鹊瓤梢詼p少傳染病的發(fā)生，堅(jiān)持“全進(jìn)全出”飼養(yǎng)方式和避免多日齡混養(yǎng)。引進(jìn)無(wú)傳染性支氣管炎病疫情雞場(chǎng)的雞苗，搞好雛雞飼養(yǎng)管理，防止過(guò)于擁擠，注意保溫，適當(dāng)補(bǔ)充雛雞日糧中的維生素和礦物質(zhì)。

制定合理的免疫程序，做好免疫接種是預(yù)防本病的重要措施，疫苗接種是目前預(yù)防病毒病的一項(xiàng)主要措施。發(fā)病時(shí)可以采取緊急免疫雞傳染性支氣管炎和H9二聯(lián)苗。提高母源抗體也是預(yù)防本病的基本有效措施，為了使種雞能將母源抗體傳遞給雛雞，需要對(duì)種雞重復(fù)免疫，在產(chǎn)蛋期10～12周/1次，以后雛雞才能獲得一致的母源抗體。人們常用中西醫(yī)結(jié)合的對(duì)癥療法[2]，由于實(shí)際生產(chǎn)中雞群常并發(fā)細(xì)菌性疾病，故采用一些抗菌藥物有時(shí)顯得有效。對(duì)腎病變型傳染性支氣管炎的病雞，有人采用口服補(bǔ)液鹽、0.5%碳酸氫鈉、維生素C等藥物投喂能起到一定的效果。

[1] 朱艷平，郭東光，岳鋒，等.雞傳染性支氣管炎病毒S1基因抗原區(qū)的原核表達(dá)及鑒定[J].中國(guó)畜牧獸醫(yī)，2014，（6）：55-59.

[2] 李廣興，杜威威，韓溪，等.傳染性支氣管炎病毒HH06株膜蛋白多克隆抗體制備及生物學(xué)功能研究[J].東北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2014，（10）：57-63.

李鳳玲，女，碩士，現(xiàn)在南京市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心工作。