祁秋干 紀(jì) 娜 王遠東

?綜述?

CIK細胞聯(lián)用樹突狀細胞治療惡性腫瘤的進展

祁秋干 紀(jì) 娜 王遠東

放化療是繼手術(shù)之后臨床治療惡性腫瘤的常用方法, 而近年來對于腫瘤輔助治療的細胞介導(dǎo)過繼性免疫療法是目前臨床研究熱點。采用免疫療法能夠有效改善患者免疫功能, 并對消除殘余病灶、骨髓凈化具有顯著療效。近年來通過對淋巴因子的深入研究證實細胞因子誘導(dǎo)殺傷細胞(CIK)是一種新型具有廣譜殺瘤特性的非主要組織相容性復(fù)合體(MHC)限制性免疫效應(yīng)細胞, 其應(yīng)用效果在腫瘤的免疫治療中具有重要的應(yīng)用價值, 而樹突狀細胞(DC)作為機體內(nèi)主要的抗原呈遞細胞, 可參與并誘導(dǎo)抗原特異性細胞毒(CTL)反應(yīng), 并可通過對胰島B細胞的作用參與體液免疫應(yīng)答。近年來對于CIK細胞聯(lián)用DC細胞治療惡性腫瘤的臨床療效被臨床所認可, 能夠有效解除惡性腫瘤患者T細胞無能現(xiàn)象,具有較好的輔助協(xié)同抗腫瘤作用。

細胞因子誘導(dǎo)殺傷細胞；樹突狀細胞；惡性腫瘤；研究進展

隨著近年來生物醫(yī)學(xué)技術(shù)的不斷研究與發(fā)展, 惡性腫瘤的治療模式呈現(xiàn)出多樣化的趨勢, 過繼免疫療法目前是腫瘤輔助治療的研究熱點, 并且過繼免疫療法部分研究成果已經(jīng)進入臨床推廣階段并取得了較為理想的治療效果［1］。人機體內(nèi)的免疫系統(tǒng)中主要由T細胞、NK細胞、NKT細胞等免疫細胞組成, 其中CIK細胞是人體外周血或臍帶血中單個核細胞在體外用多種細胞因子誘導(dǎo)而獲得的異質(zhì)細胞, 目前對于CIK的研究主要是利用其廣譜殺瘤特性進行腫瘤輔助治療,采用具有高效殺傷活性的CIK細胞聯(lián)合具有強效抗腫瘤能力的DC細胞治療惡性腫瘤, 已取得一定的臨床療效［2］。本文結(jié)合近年來對CIK聯(lián)合DC的抗腫瘤治療進展展開綜述如下。

1 CIK的生物免疫活性特點

1.1 人體CIK細胞的來源及表型 CIK細胞是人體外周血或臍帶血中單個核細胞在體外用多種細胞因子誘導(dǎo)而獲得的一種異質(zhì)細胞, 主要有白細胞介素(IL-2)、干擾素(IFN-γ)等細胞因子誘導(dǎo)產(chǎn)生［3］。體內(nèi)CIK主要分布于肝臟內(nèi)與外周血中, 對于CIK的細胞表面標(biāo)志物研究發(fā)現(xiàn)CIK細胞是一種CD3與CD56雙陽性細胞群, 主要來源于CD3+與CD56-的T淋巴細胞, 并且CIK細胞作用可誘導(dǎo)分化形成CD8T細胞,其基因表達的最終結(jié)果為多克隆T細胞受體, 并且以CD56、NKG2D及大顆粒淋巴細胞為主要形態(tài)學(xué)特征的改變［4］。1.2 CIK細胞的抗腫瘤作用機制 通過CIK細胞來源及表型分析可知CIK是一種以CD3與CD56雙陽性T細胞為主的特異質(zhì)細胞群, 同時臨床實驗證實CIK細胞是一種具有較高殺瘤活性及增殖速度的免疫活性細胞, 并且與LAK細胞、CD3AKCIK細胞比較具有更高的殺瘤活性, 同時腫瘤細胞的多重耐藥性對CIK細胞的抗凋亡及殺瘤效應(yīng)無影響；目前臨床廣泛認可LFA-1的識別結(jié)構(gòu)與CD3受體結(jié)合后可激活CIK 細胞, 導(dǎo)致胞漿毒性顆粒釋放而殺傷腫瘤細胞產(chǎn)生殺瘤效應(yīng)； 另外CIK細胞表面可分泌內(nèi)源性IL-2產(chǎn)生大量炎性細胞因子、活化腫瘤細胞凋亡因子, 有效維持體內(nèi)殺瘤細胞毒性, 但同樣CIK細胞的殺瘤活性對正常骨髓造血功能的毒性影響較小, 能夠保護多數(shù)CFUGM集落不受破壞, 顯著彌補了放化療對患者骨髓抑制的不良反應(yīng)［5,6］。并且臨床治療用CIK細胞主要來源以患者的自體培養(yǎng), 避免了免疫療法產(chǎn)生異體細胞免疫排斥, 提高臨床治療的安全性。并且由于CIK細胞兼具NK細胞的肺MHC限制性殺瘤抑瘤特點, 導(dǎo)致CIK細胞具有廣譜殺瘤效應(yīng)在腫瘤生物免疫治療中具有廣泛的應(yīng)用前景, 通過深入研究可逐步替代LAK、TIL等免疫效應(yīng)細胞。有學(xué)者采用CIK細胞過繼免疫療法治療不同分期的腫瘤患者療效顯示CIK細胞對不同分期的惡性腫瘤據(jù)具有高效的殺瘤效應(yīng), 表明其較傳統(tǒng)LAK免疫療法具有更好的殺瘤優(yōu)勢［7］。

2 DC的生物免疫活性特點

DC細胞主要是由CD34+或CD14+細胞誘導(dǎo)分化的免疫活性細胞, 其前體細胞經(jīng)骨髓進入外周血后播散至全身各處, DC細胞主要存在于臍血中［8,9］, 其分布特點與CIK細胞分布特點不同。傳統(tǒng)DC細胞的主要來源是利用體外培養(yǎng)CD+34細胞獲取, 但體外培養(yǎng)CD34+細胞培養(yǎng)效率一般較低而不能夠滿足臨床需求, 最新研究顯示采用多重肝細胞聯(lián)合細胞因子進行體外擴增培養(yǎng)具有較高的培養(yǎng)效率, 可快速獲取大量的DC細胞, 是目前臨床常用的DC細胞采集手段［10］。DC細胞的典型特征為樹突狀形態(tài), 并且DC細胞膜表面高表達MHC-2類分子及共刺激分子等, 而經(jīng)誘導(dǎo)活化的共刺激分子能夠誘導(dǎo)雛形T淋巴細胞的增殖與活化, 能夠誘導(dǎo)產(chǎn)生并參與機體特異性CTL免疫應(yīng)答反應(yīng)［11,12］。而DC 作為體內(nèi)功能強大的專職抗原遞呈細胞, 在細胞毒性細胞的活化過程中發(fā)揮著重要的作用。因此, 將CIK 細胞和DC 聯(lián)合應(yīng)用治療惡性腫瘤, 有助于解除腫瘤患者T 細胞的免疫無能, 起到抗腫瘤的作用。

3 CIK聯(lián)合DC的抗腫瘤特性

臨床研究發(fā)現(xiàn)共同培養(yǎng)DC細胞與CIK細胞可顯著刺激DC細胞與CIK細胞的分化成熟［13］。CIK細胞是細胞因子誘導(dǎo)的非特異性殺傷細胞, 其細胞表面分子表形能夠分泌多種細胞因子, 造成了CIK細胞具有更高的非特異性殺傷能力［14］。而DC 作為體內(nèi)功能強大的專職抗原遞呈細胞, 在細胞毒性細胞的活化過程中發(fā)揮著重要的作用。因此, 將CIK細胞和DC 聯(lián)合應(yīng)用于治療惡性腫瘤, 有助于解除腫瘤患者T細胞的免疫無能, 起到抗腫瘤的作用。在臨床實驗中已經(jīng)證實在進行腫瘤的過繼免疫療法時, 單純采用CIK免疫效應(yīng)細胞時臨床療效并非如理論分析那樣理想, 通過回顧分析其可能與患者體內(nèi)腫瘤細胞對非特異性殺傷細胞等免疫效應(yīng)細胞產(chǎn)生抵抗作用導(dǎo)致殺瘤活性不明顯, 并且多數(shù)學(xué)者認為造成這一現(xiàn)象可能與惡性腫瘤患者體內(nèi)功能性DC細胞匱乏密切相關(guān), 由于DC細胞是人體內(nèi)主要的功能性抗原呈遞細胞,對于細胞毒性T細胞活化具有重要的抗原呈遞作用, 而由于惡性腫瘤患者體內(nèi)DC細胞的缺乏導(dǎo)致殺傷細胞的呈遞作用減弱, 進而造成CIK的殺傷活性較低的效果［15,16］。因此采用CIK細胞聯(lián)合DC細胞免疫過繼療法治療惡性腫瘤能夠有效緩解患者T細胞免疫功能低下的特點, 進而達到抗腫瘤的協(xié)同效應(yīng)。

郭偉偉等［17］對CIK與DC過繼免疫治療研究顯示, DC聯(lián)合CIK細胞培養(yǎng)較單純CIK細胞培養(yǎng)通具有更高的細胞增殖速度與能力, 并且聯(lián)合組CIK殺傷細胞的有效成分雙陽性率要高于對照組, 并且細胞表面分泌IL-2、INF-γ的水平要明顯高于對照組, 并且聯(lián)合培養(yǎng)與對照組免疫細胞活性與靶點效應(yīng)的存在差異性, 對于白血病細胞的殺傷能力聯(lián)合培養(yǎng)組明顯高于對照組, 可準(zhǔn)確顯示靶點效應(yīng)與免疫細胞殺傷活性之間的關(guān)系。羅善超等［18］通過動物實驗觀察接種了人膽管癌的SCID 小鼠進行CIK 細胞與DC 聯(lián)合治療, 對小鼠體內(nèi)細胞毒素、腫瘤大小和免疫組織化學(xué)的觀察, 發(fā)現(xiàn)聯(lián)合治療顯示了最佳的腫瘤抑制效果。小鼠體內(nèi)細胞毒素、腫瘤大小及免疫組化可知, 采用隨機對照試驗發(fā)現(xiàn)CIK聯(lián)合DC細胞的治療效果較單純藥物治療具有更好的腫瘤抑制效果。并且目前通過實驗及假設(shè)猜想認為DC細胞可影響CIK細胞的生物學(xué)特性的機制, 由于DC 細胞表面有很多種類的有助于抗原提呈的分子, 可分泌不同種類的大量細胞因子,并且有學(xué)者實驗研究證實IL-2與IL-12對CIK細胞具有不同程度的增殖作用, 可顯著提高CIK細胞的殺瘤活性, 二者共同培養(yǎng)可提高CIK的增殖活性與細胞毒作用, 而IL-12攝取阻斷則會減弱CIK細胞的細胞毒性, 降低不良反應(yīng)的發(fā)生率, 提高臨床治療效果及改善預(yù)后［19,20］。

4 小結(jié)

采用CIK聯(lián)合DC治療惡性腫瘤具有較好的臨床應(yīng)用前景, 其腫瘤殺傷及抗腫瘤作用效果理想, 可作為腫瘤過繼治療中免疫療法的首選方案, 但對于CIK聯(lián)合DC具體針對不同類型、不同部位的腫瘤殺傷作用與確切療效需進一步的實驗研究與評價, 使DC-CIK 細胞聯(lián)合免疫治療在體內(nèi)更好地發(fā)揮抗腫瘤的作用有待于進一步深入研究。進一步探討DC-CIK細胞免疫治療聯(lián)合放療、化療、手術(shù)及中草藥治療,將有助于減少惡性腫瘤的轉(zhuǎn)移與復(fù)發(fā), 提高臨床療效, 改善腫瘤患者的生活質(zhì)量。

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510315 南方醫(yī)科大學(xué)中西醫(yī)結(jié)合腫瘤中心胸外科(祁秋干 王遠東), 婦瘤科(紀(jì)娜)