于寧 王彥生

羊膜載體復(fù)合膜緩釋系統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)研究

于寧 王彥生

目的研究羊膜載體復(fù)合膜緩釋系統(tǒng)對(duì)骨髓炎的治療作用。方法30只純種新西蘭大耳白兔制成骨髓炎模型, 隨機(jī)分為對(duì)照組和觀察組, 各15只。對(duì)照組模型給予局部應(yīng)用抗生素進(jìn)行治療,觀察組模型給予羊膜載體復(fù)合膜緩釋系統(tǒng)中應(yīng)用抗生素進(jìn)行局部治療, 對(duì)比觀察兩組模型的治療效果。結(jié)果建立模型前兩組兔體質(zhì)量比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)；建立模型8周, 對(duì)照組兔體質(zhì)量下降較多, 觀察組兔體質(zhì)量顯著高于對(duì)照組(P＜0.05)。兩組兔骨培養(yǎng)感染細(xì)菌均為金黃色葡萄球菌, 對(duì)照組兔骨培養(yǎng)細(xì)菌感染均為陽(yáng)性, 陽(yáng)性率為100%, 細(xì)菌計(jì)數(shù)為(8.4±3.7)×107；觀察組中9只骨培養(yǎng)細(xì)菌感染為陽(yáng)性, 陽(yáng)性率為60%, 細(xì)菌計(jì)數(shù)為(4.2±2.8)×105。兩組比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。結(jié)論與局部應(yīng)用抗生素相比, 羊膜載體復(fù)合膜緩釋系統(tǒng)對(duì)骨髓炎的治療作用較好。

羊膜載體復(fù)合膜緩釋系統(tǒng)；骨髓炎；實(shí)驗(yàn)研究

慢性骨髓炎的病情復(fù)雜, 病情也較長(zhǎng), 容易并發(fā)病理性骨折、骨缺損及慢性竇道等, 手術(shù)的失敗率及感染復(fù)發(fā)率較高, 臨床治療較為棘手, 也是國(guó)內(nèi)外骨科醫(yī)生及研究領(lǐng)域多年來(lái)探索的一個(gè)難題[1]。近年來(lái)開(kāi)放性骨折的發(fā)病率逐年上升[2], 慢性骨髓炎的發(fā)病率也有所上升。骨感染與骨缺損同時(shí)存在, 相互影響, 治療既要修復(fù)缺損, 又需治療感染[3]。本研究就羊膜載體復(fù)合膜緩釋系統(tǒng)對(duì)骨髓炎的治療作用進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究和探討, 現(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 骨髓炎模型制備 選取30只健康清潔的純種新西蘭大耳白兔, 雌雄不限, 體重1.1～1.5 kg, 常規(guī)麻醉、消毒后, 于實(shí)驗(yàn)白兔的右側(cè)膝關(guān)節(jié)上3 cm處注射金黃色葡萄球菌菌液, 誘導(dǎo)制備成股骨骨髓炎模型, 后隨機(jī)分為對(duì)照組和觀察組, 各15只。

1.2 羊膜載體復(fù)合膜制備 取新鮮的牛羊膜, 用磷酸鹽緩沖液(PBS)沖洗3次, 去除血跡和污漬, 0.2%戊二醛交聯(lián)15 min, 0.5%的十二烷基磺酸納水浴振蕩器內(nèi)消化過(guò)夜, 0.25胰蛋白酶水浴振蕩器內(nèi)消化3 h, PBS洗3次后冷凍干燥備用。用1%的明膠和1%的殼聚糖制成明膠殼聚糖緩釋降解復(fù)合凝膠液,配置時(shí)加入慶大霉素藥物溶液。將凝膠液平鋪于羊膜上, 塑形、冷凍干燥后備用。

1.3 方法 將兩組模型白兔, 用1%的異戊巴比妥納(30 mg/kg)進(jìn)行腹腔注射麻醉, 麻醉生效后進(jìn)行局部備皮、消毒、鋪無(wú)菌手術(shù)巾；切開(kāi)大腿皮膚, 逐層切開(kāi)皮膚、皮下組織、筋膜組織、充分顯露竇道冰切除；根據(jù)X線片測(cè)出炎性髓腔的長(zhǎng)度及寬度, 沿其縱軸用骨刀切開(kāi)一次皮質(zhì)(一般不超過(guò)管狀骨周徑的1/3)；摘除死骨, 徹底清除死腔內(nèi)膿苔, 并刮除髓腔內(nèi)的炎性肉芽組織, 至骨面有少量滲血為止；再用0.1%碘伏浸泡死腔5 min后, 用生理鹽水沖洗, 然后用干紗布填塞。對(duì)照組給予局部應(yīng)用抗生素進(jìn)行治療, 取出干紗布后, 于死腔內(nèi)注入慶大霉素溶液, 不留空隙, 縫合皮膚。觀察組模型給予羊膜載體復(fù)合膜緩釋系統(tǒng)中應(yīng)用抗生素進(jìn)行局部治療, 根據(jù)死腔容積大小選取制備好的含有慶大霉素的羊膜載體復(fù)合膜體積, 并將羊膜載體復(fù)合膜剪成鋸末狀碎塊備用, 加固化劑并調(diào)成糊狀, 取出死腔內(nèi)的干紗布, 加入羊膜載體復(fù)合膜, 注意不留空隙, 后縫合皮膚。術(shù)后將兩組白兔分籠飼養(yǎng)。

1.4 觀察指標(biāo) 于建立模型前及建立模型后8周測(cè)量兔體質(zhì)量, 并于8周后處死動(dòng)物, 并取出整個(gè)右側(cè)股骨, 于無(wú)菌操作下用尖嘴咬骨鉗咬碎股骨, 并用研缽及研棒研碎, 取骨粉進(jìn)行骨培養(yǎng), 計(jì)算骨培養(yǎng)細(xì)菌感染率及細(xì)菌計(jì)數(shù)。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示, 采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率(%)表示, 采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組兔建立模型前后兔體質(zhì)量變化情況 對(duì)照組兔建立模型前的兔體質(zhì)量為(1.43±0.08)kg, 建立模型8周(1.09± 0.05)kg；觀察組兔建立模型前的兔體質(zhì)量為(1.44±0.09)kg,建立模型8周(1.27±0.06)kg。建立模型前兩組兔體質(zhì)量比較 差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)；建立模型8周, 對(duì)照組兔體質(zhì)量下降較多, 觀察組兔體質(zhì)量顯著高于對(duì)照組(P＜0.05)。

2.2 兩組模型骨培養(yǎng)細(xì)菌感染情況及細(xì)菌計(jì)數(shù) 兩組兔骨培養(yǎng)感染細(xì)菌均為金黃色葡萄球菌, 對(duì)照組兔骨培養(yǎng)細(xì)菌感染均為陽(yáng)性, 陽(yáng)性率為100%, 細(xì)菌計(jì)數(shù)為(8.4±3.7)×107；觀察組中9只骨培養(yǎng)細(xì)菌感染為陽(yáng)性, 陽(yáng)性率為60%, 細(xì)菌計(jì)數(shù)為(4.2±2.8)×105。兩組比較, 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。

3 小結(jié)

羊膜載體復(fù)合膜, 不但具有支架載體的功能, 并且含有纖維黏連素(FN)、層黏連素(LN)和Ⅳ型膠原等, 可以促進(jìn)種子細(xì)胞黏附、運(yùn)動(dòng)和分化等重要生命功能的一種特殊蛋白分子。本研究就羊膜載體復(fù)合膜緩釋系統(tǒng)對(duì)骨髓炎的治療作用進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究和探討, 顯示羊膜載體復(fù)合膜緩釋系統(tǒng)在骨髓炎的治療中, 具有更好的效果, 抗菌效果更好[4]。

綜上所述, 與局部應(yīng)用抗生素相比, 羊膜載體復(fù)合膜緩釋系統(tǒng)對(duì)骨髓炎的治療作用較好。

[1]湯善華, 靳安民, 呂仁發(fā), 等.納米羥基磷灰石/硫酸慶大霉素緩釋系統(tǒng)的制備及體內(nèi)釋放實(shí)驗(yàn).中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù), 2007, 11(18):3573-3576.

[2]韋冰丹.感染性骨不連的治療進(jìn)展.醫(yī)學(xué)綜述, 2009, 15(14): 2161-2162.

[3]余升華, 胡漢生, 范震波, 等. ARBX與RBX治療感染性骨缺損的實(shí)驗(yàn)對(duì)比.廣州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào), 2013, 41(2):43-46.

[4]王冰, 鐘偉, 劉儒森.羊膜載體復(fù)合膜負(fù)載骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞促愈創(chuàng)面的研究.濰坊醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào), 2010, 32(3):202-204.

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2015.19.211

2015-04-29]

沈陽(yáng)醫(yī)學(xué)院科技(項(xiàng)目編號(hào)：20141008)

110024 沈陽(yáng)醫(yī)學(xué)院附屬中心醫(yī)院手外科

王彥生