于亞玲，霍妍明，陳國(guó)亮，張東冉，李曉麗，薛小雙，趙伍祥，邱殿銳

(1.河北省承德市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心, 河北 承德 067000;2.河北省承德市畜牧研究所, 河北 承德067000; (3.河北旅游職業(yè)學(xué)院,河北 承德 067000)=

三類消毒藥對(duì)牛舍消毒效果的比較

于亞玲1，霍妍明1，陳國(guó)亮1，張東冉1，李曉麗1，薛小雙3，趙伍祥2，邱殿銳2

(1.河北省承德市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心, 河北 承德 067000;2.河北省承德市畜牧研究所, 河北 承德067000; (3.河北旅游職業(yè)學(xué)院,河北 承德 067000)=

[目的]比較醛類消毒劑、季銨鹽類及兩類消毒藥的絡(luò)合物三類消毒藥對(duì)牛舍空氣、地面細(xì)菌的抑菌效果的差異，探究牛舍在溫度為11～24℃時(shí)最佳消毒周期。[方法]用三種消毒藥對(duì)不同圈舍消毒，采集不同高度的空氣細(xì)菌樣品并在消毒后的八天連續(xù)采集地面細(xì)菌樣品。[結(jié)果]三種消毒藥對(duì)空氣中細(xì)菌的和圈舍地面細(xì)菌消殺率都很高，均超過(guò)80%，超強(qiáng)毒滅消毒效果最理想。[結(jié)論]四天為一個(gè)消毒周期最理想。

醛類消毒劑;季銨鹽類消毒劑;醛類和季銨鹽類絡(luò)合物消毒劑;消毒周期

近些年來(lái)，我國(guó)養(yǎng)殖業(yè)集約化程度不斷提高，規(guī)?；B(yǎng)殖場(chǎng)逐漸增多，科學(xué)的飼養(yǎng)管理理念越來(lái)越得到養(yǎng)殖場(chǎng)的認(rèn)可，其中體現(xiàn)在日常預(yù)防性消毒工作中，但還存在一些誤區(qū)[1]。消毒劑的種類繁多，消毒劑配置，適用范圍不盡相同，制定消毒方案，選擇適合的消毒藥品，是預(yù)防疫病的發(fā)生的重要環(huán)節(jié)[2-3]。本試驗(yàn)于2013年9月選取三個(gè)養(yǎng)殖場(chǎng)，養(yǎng)殖場(chǎng)溫度11～24℃，針對(duì)醛類消毒劑、季銨鹽類及兩類消毒藥的絡(luò)合物三類消毒藥[4-5]，通過(guò)噴灑消毒的方法，以牛舍的空氣，地面為消毒對(duì)象，其消毒效果進(jìn)行比較和評(píng)價(jià)，并對(duì)消毒周期進(jìn)行探索，為養(yǎng)殖生產(chǎn)提供較優(yōu)的消毒藥品和消毒方案。

1 材料與方法

1.1 材料

消毒劑：超強(qiáng)毒滅(苯扎溴銨絡(luò)合稀戊二醛溶液)，醛滅靈(稀戊二醛溶液)，強(qiáng)效百毒殺(苯扎溴銨溶液)。

器材和藥品：培養(yǎng)基，鑷子，滅菌棉簽，EP管，，生理鹽水，移液器，簽字筆，分析天平，恒溫培養(yǎng)箱，蒸汽式高壓鍋，菌落計(jì)數(shù)器，噴霧器，滅菌玻璃珠等。

1.2 試驗(yàn)方法

選取六個(gè)圈舍A、B、C、D、E、F，確定每個(gè)圈舍的三個(gè)位置。并在每個(gè)位置處用油漆畫若干個(gè)1 cm*1 cm的圓。

1.2.1 空氣中細(xì)菌采集 沉降法。對(duì)A、B、C圈舍進(jìn)行機(jī)械清掃，然后使用噴霧器噴灑自來(lái)水對(duì)圈舍進(jìn)行預(yù)處理。30 min后在每個(gè)圈舍的標(biāo)記位置，距地面2 m，1 m，0.5 m，分別放置培養(yǎng)基，打開培養(yǎng)皿蓋子，使培養(yǎng)基表面暴露10 min，再將培養(yǎng)皿蓋蓋上后倒置[6]。然后用噴霧器對(duì)三個(gè)圈舍噴灑三種不同的消毒藥(按照說(shuō)明書的配制方法進(jìn)行配制)，30 min后在距地面2 m，1 m，0.5 m，分別放置培養(yǎng)基，做相同處理。采樣后，將培養(yǎng)基置于37℃恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)24 h，使用菌落計(jì)數(shù)器進(jìn)行菌落數(shù)。以圈舍為單位，即一個(gè)圈舍為一組，進(jìn)行結(jié)果統(tǒng)計(jì)[7]。

1.2.2 地面上細(xì)菌采集 棉簽擦拭法。對(duì)A、B、C圈舍(天天對(duì)其進(jìn)行消毒)進(jìn)行機(jī)械清掃，然后使用噴霧器噴灑自來(lái)水對(duì)圈舍進(jìn)行預(yù)處理。30 min后用滅菌棉簽涂抹整個(gè)圓圈進(jìn)行采樣(每次采集新圓圈的細(xì)菌)，每個(gè)位置采取三個(gè)圓圈作為一份樣品裝入一個(gè)EP管中，做好標(biāo)記。然后用噴霧器對(duì)三個(gè)圈舍噴灑三種不同的消毒藥(按照說(shuō)明書的配制方法進(jìn)行配制)，30 min后用滅菌棉簽涂抹整個(gè)圓圈進(jìn)行采樣(每次采集新圓圈的細(xì)菌)，每個(gè)位置采取三個(gè)圓圈作為一份樣品裝入一個(gè)EP管中，做好標(biāo)記。A、B、C圈舍，連續(xù)9天重復(fù)上述實(shí)驗(yàn)并記錄[8-9]。

1.2.3 確定消毒周期的方法 第一天對(duì)圈舍D、E、F的實(shí)驗(yàn)方法圈舍A、B、C相同。第二天對(duì)D、E、F圈舍作如下處理：先進(jìn)行機(jī)械清掃，然后使用噴霧器噴灑自來(lái)水對(duì)圈舍進(jìn)行預(yù)處理。30 min后用滅菌棉簽涂抹整個(gè)圓圈進(jìn)行采樣(每次采集新圓圈的細(xì)菌)，每個(gè)位置采取三個(gè)圓圈作為一份樣品裝入一個(gè)EP管中，做好標(biāo)記，連續(xù)消毒九天。

1.2.4 地面采集樣品的處理方法 分別向采集樣品的EP管中加入1 ml的生理鹽水，靜置30 min，轉(zhuǎn)移入自制的EP管中，6 000 rpm，離心1 min，取上清液進(jìn)行倍比稀釋，稀釋度分別為1:102，1:103，1:104，1:105吹吸混勻，做好標(biāo)記。無(wú)菌環(huán)境，取稀釋的上清液10 ul接種至無(wú)菌培養(yǎng)基中，放入三個(gè)滅菌玻璃珠，輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)皿若干次，使上清液均勻涂布在培養(yǎng)上，將培養(yǎng)皿倒置放入置于37℃恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)24小時(shí)，使用菌落計(jì)數(shù)器進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)[10]。

2 結(jié)果和結(jié)論

2.1 空氣消毒效果分析

三種消毒藥對(duì)三個(gè)養(yǎng)殖場(chǎng)A、B、C圈舍空氣中細(xì)菌的消殺效果如表1，三種消毒藥的消毒率都高于80%，其中超強(qiáng)毒滅的效果明顯優(yōu)于醛滅靈和強(qiáng)效百毒殺，醛滅靈的消殺效果強(qiáng)于強(qiáng)效百毒殺。

2.2 天天對(duì)地面消毒效果分析

三種消毒藥對(duì)三個(gè)養(yǎng)殖場(chǎng)A、B、C圈舍地面上細(xì)菌的消殺效果如表2，三種消毒藥的消毒率都高于80%，其中超強(qiáng)毒滅的效果優(yōu)于醛滅靈和強(qiáng)效百毒殺，醛滅靈的消殺效果強(qiáng)于強(qiáng)效百毒殺。如圖1顯示，每天消毒圈舍地面的細(xì)菌數(shù)量逐漸減少，消毒效果顯著，連續(xù)九天消毒菌落數(shù)量減少50%左右。

注：同列標(biāo)相同小寫字母者表示差異不顯著(\%P﹥0.05)，有不同小寫字母表示差異顯著(P﹤0.05)，有不同大寫字母表示差異極顯著(P\%﹤0.01)

2.3 圈舍消毒周期分析結(jié)果

三種消毒藥對(duì)三個(gè)養(yǎng)殖場(chǎng)D、E、F圈舍地面上細(xì)菌的消殺效果如表3，三種消毒藥的消毒率都高于80%，其中超強(qiáng)毒滅的效果優(yōu)于醛滅靈和強(qiáng)效百毒殺，醛滅靈的消殺效果強(qiáng)于強(qiáng)效百毒殺。

根據(jù)圖1,細(xì)菌消毒及消毒后增長(zhǎng)曲線表明，細(xì)菌在消毒后前四天緩慢增長(zhǎng)，第五天細(xì)菌增長(zhǎng)速率增大，接下來(lái)三天細(xì)菌維持在較高水平。為了預(yù)防疾病的爆發(fā)建議在細(xì)菌恢復(fù)率在60-80%進(jìn)行消毒效果最佳。

3 討論和小結(jié)

隨著養(yǎng)殖場(chǎng)規(guī)?；涂茖W(xué)化的推進(jìn)，牛舍建設(shè)、疾病預(yù)防和日常消毒和防護(hù)都得到了高度的重視。從日常消毒角度講，消毒藥的選擇和消毒周期的確定，對(duì)養(yǎng)殖場(chǎng)持續(xù)高效的發(fā)展有至關(guān)重要的作用。常見(jiàn)的消毒藥有八種，季銨鹽類和醛類消毒劑是其中重要的兩種，季胺鹽類消毒劑作用原理是通過(guò)表面活性，使菌體細(xì)胞膜的通透性發(fā)生改變甚至破裂；醛類消毒劑是一類強(qiáng)的蛋白質(zhì)變性劑，是細(xì)菌、病毒蛋白質(zhì)變性從而達(dá)到殺滅細(xì)菌的作用；季銨鹽和醛類消毒劑的絡(luò)合物，集中季銨鹽類和醛類消毒劑的優(yōu)點(diǎn)，起到更強(qiáng)效的抑菌作用[12-14]。

通過(guò)對(duì)圈舍空氣進(jìn)行消毒，得出三種消毒藥對(duì)空氣菌群消殺率都在80%以上，季銨鹽和醛類消毒劑的絡(luò)合物消毒效果最佳。連續(xù)消毒九天，地面原始菌群數(shù)量可降低50%以上，季銨鹽和醛類消毒劑的絡(luò)合物消毒的圈舍地面菌群數(shù)相對(duì)最低。通過(guò)消毒一天采樣，觀察并統(tǒng)計(jì)細(xì)菌增殖率，在消毒后第三天細(xì)菌恢復(fù)率達(dá)到60%以上，第四天達(dá)到80%，建議在北方秋季四天為一個(gè)消毒周期。

在實(shí)際應(yīng)用中，選擇消毒藥在考慮經(jīng)濟(jì)成本的同時(shí)，選擇消殺效果好的消毒藥，但還應(yīng)綜合消毒劑作用時(shí)間，消毒劑的作用原理、微生物的耐藥性和殺菌譜等多方面因素進(jìn)行選擇，建議消毒藥的種類間隔使用。有調(diào)查表明，機(jī)械清掃，通過(guò)通風(fēng)保持圈舍干燥也可以有效抑制病原微生物的生長(zhǎng)。

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Comparative study on disinfectant efficacy of the three disinfectants in cattle sheds

Yu Ya-ling1,Huo Yan-ming1,Chen Guo-liang1,Zhang Dong-yan1,Li Xiao-li1,Xue Xiao-shuang3,Zhao Wu-xiang2,Qiu Dian-rui2
(1.ChengdeCity,HebeiProvinceCenterforDiseaseControlandPreventionHebei,Chengde067000;2.InstituteofAnimalHusbandry,Chengde, 067000;3.HebeiTourismVocationalCollege,Chengde, 067000)

[Objective] To study the disinfectant efficacy of aldehyde disinfectant,quaternary ammonium disinfectant and the complexes of aldehyde and quaternary ammonium disinfectant to the barn air, ground bacterial,explore the best sterilization cycle when the temperature is 11-24 ℃.[Methods]After disinfecting the barn by the three disinfectant , collect the air samples at different heights and the groud samples eight days in a row. [Results] The results showed that the disinfection effect were well to the barn air and ground,and the complexes of aldehyde and quaternary ammonium disinfectant was best, and the higher than 80%,aldehyde disinfectant was good and quaternary ammonium disinfectant was worst.[Conclusion] The best sterilization cycle was four days.

aldehyde disinfectant , mmonium disinfectant, complexes of aldehyde and quaternary ammonium disinfectant,sterilization cycle

2014-12-26 修改日期:2015-01-18

河北省現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系奶牛產(chǎn)業(yè)創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)建設(shè)專項(xiàng)資金；承德市科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目(201422074)

于亞玲(1985-)，女，河北承德人，碩士，就職于河北省承德市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，主要從事疫病監(jiān)測(cè)和重大動(dòng)物疫病病原學(xué)和血清學(xué)檢測(cè)工作。

S8-1

A

1001-9111(2015)02-0056-04