陳穎瑩林圣云

人參皂苷治療白血病實驗研究進(jìn)展

陳穎瑩1林圣云2

人參；人參皂苷；白血病；治療；綜述

白血病是血液系統(tǒng)疾病中最常見的腫瘤，惡性程度高，進(jìn)展快，預(yù)后差。目前治療上主要采用化療及造血干細(xì)胞移植。急性白血病化療時藥物殺傷無選擇性，在殺傷白血病細(xì)胞的同時也殺傷人體正常細(xì)胞，尤其對增殖旺盛的細(xì)胞如骨髓細(xì)胞、黏膜細(xì)胞均有殺傷作用，患者常不能耐受如骨髓抑制、消化道反應(yīng)等化療毒副作用而終止治療。異基因造血干細(xì)胞移植（allogeneic hematopoietic stem cell transplantation，Allo-HSCT）仍是目前根治急性白血?。ǔ毙栽缬琢＜?xì)胞白血病外）的首選方法，其中移植后造血及免疫重建是移植成功的關(guān)鍵之一。大量臨床和實驗研究發(fā)現(xiàn)，中藥在白血病化療和造血干細(xì)胞移植中具有增效減毒的作用。其中人參有效成分人參皂苷在防止化療引起的毒副作用和提高造血干細(xì)胞移植成功率等方面療效顯著，近年來報道較多。本文就近年來該方面的研究進(jìn)展作一綜述。

1 人參皂苷分類

人參屬五加科草本植物，被稱作“百藥之王”，臨床應(yīng)用已有2千多年的歷史。人參皂苷是人參的主要有效成分之一。迄今為止，人們已經(jīng)從人參植物中分離出40多種人參皂苷單體，可分為三類：一為人參皂苷二醇型，包括人參皂苷Rb1、Rb2、Rc、Rd、Rh2等；二為人參皂苷三醇型，包括人參皂苷Re、Rf、Rg1、Rg2、Rh1等；三為齊墩果酸型，包括人參皂苷Ro、Rh3、Ri等[1]。

2 治療白血病作用

2.1 抗白血病細(xì)胞作用 Liu等[2]研究表明，人參皂苷可以通過線粒體途徑誘導(dǎo)人早幼粒白血病細(xì)胞（HL-60細(xì)胞）凋亡。Yi等[3]等通過實驗發(fā)現(xiàn)人參皂苷可使人急性非淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞向成熟方向分化而減少白血病細(xì)胞數(shù)。Liu等[4]研究發(fā)現(xiàn)Rg1可以上調(diào)細(xì)胞衰老相關(guān)基因p16和p21，使細(xì)胞阻滯在G2/M期[5]，進(jìn)而誘導(dǎo)人慢性粒白血病細(xì)胞（K562細(xì)胞）衰老。另外，柯大智等[6]實驗表明Rb1可通過抑制JAK-STAT信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，抑制白血病細(xì)胞的增殖而發(fā)揮抗白血病作用。

2.2 減輕化療毒副作用

2.2.1 改善骨髓抑制 馮翠屏等[7]采用環(huán)磷酰胺（CTX）建立小鼠骨髓抑制模型，發(fā)現(xiàn)人參皂苷Rh2能不同程度提高CTX所致小鼠骨髓抑制的增生級別和骨髓有核細(xì)胞計數(shù)，提示Rh2對骨髓抑制有一定的保護(hù)作用。Xu等[8]實驗發(fā)現(xiàn)CTX能顯著增加小鼠骨髓鈣敏感受體（CaSR）mRNA的表達(dá)，使骨髓和外周血的Lin（-）Sca-1（+）c-kit（+）細(xì)胞和CD3（+）明顯減少，導(dǎo)致骨髓抑制，而人參皂苷Rg1可降低CaSR mRNA的表達(dá)，提高骨髓及外周血造血干細(xì)胞數(shù)量，進(jìn)一步說明Rg1能改善CTX誘導(dǎo)的骨髓抑制，促進(jìn)造血干細(xì)胞的增殖，從而改善血象。Ragha-vendran等[9]研究發(fā)現(xiàn)5-氟尿嘧啶（5-fluorouracil，5-FU）作用后IL-3和GM-CSF水平明顯降低，提示骨髓抑制顯著，而Rg1治療后外周血白細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、中性粒細(xì)胞和血小板計數(shù)明顯提高，CFU-GM、IL-3和GMCSF的數(shù)量也明顯增加，說明Rg1在一定程度上能促進(jìn)造血，改善骨髓抑制，其機(jī)制可能與誘導(dǎo)c-kit、SCF、IL-1 mRNA的表達(dá)有關(guān)。

2.2.2 減輕黏膜損傷 Watanabe等[10]研究報道人參皂苷Rb1可以顯著減少5-FU誘導(dǎo)的口腔黏膜病變，其不但能增加5-FU誘導(dǎo)產(chǎn)生的的MPO活性，減少炎性細(xì)胞浸潤，還能促進(jìn)細(xì)胞再上皮化。吳皓等[11]研究發(fā)現(xiàn)CTX可引起腸道固有層中CD4+T淋巴細(xì)胞顯著降低，而人參皂苷Rg3可在化療時通過增加腸道集合淋巴結(jié)（PP結(jié)）的總面積，提高腸道固有層中淋巴細(xì)胞（LPL）中的CD4+T淋巴細(xì)胞百分比，從而改善CTX作用造成的局部腸道黏膜免疫功能的嚴(yán)重抑制狀態(tài)。

2.2.3 降低心臟毒性 Wang等[12]研究發(fā)現(xiàn)單用阿霉素的小鼠，其血清中的心肌酶譜肌酸激酶（CK）、乳酸脫氫酶（LDH）、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)水平顯著升高，心電圖出現(xiàn)寬大的QRS波群，而Rh2與阿素聯(lián)合應(yīng)用，其CK、LDH、AST較單用阿霉素組低（P＜0.01），心電圖未見異常，提示Rh2能減輕阿霉素引起的心臟損傷。孔宏亮等[13]通過實驗發(fā)現(xiàn)Rb1作用后，與對照組比較，血漿－B型腦鈉肽（BNP）水平和心肌肌鈣蛋白I（cTn I）水平均顯著降低（P＜0.01），左室射血分?jǐn)?shù)（LVEF）顯著改善（P＜0.05），心肌細(xì)胞凋亡率顯著下降（P＜0.05），提示Rb1可改善阿霉素所致的心力衰竭，此效應(yīng)可能與減輕心肌細(xì)胞凋亡有關(guān)。

2.3 增加化療藥物敏感性 Zhang等[14]發(fā)現(xiàn)阿霉素通過 MAPK/NF－κB通路介導(dǎo)多藥耐藥蛋白 1（ABCB1）的過表達(dá)導(dǎo)致耐藥，而Rh2可以下調(diào)MCF－7/Adr細(xì)胞的ABCB1表達(dá)，從而增強(qiáng)阿霉素殺死腫瘤細(xì)胞的作用。而Kim等[15]研究結(jié)果表明，Rg3通過與多柔吡星、長春新堿、足葉乙苷（VP－16）等競爭結(jié)合位于細(xì)胞膜上的P－糖蛋白（P－glycoprotein，P－gp）逆轉(zhuǎn)耐藥，同時表明這與控制多藥耐藥1基因的表達(dá)及P－gp數(shù)量無關(guān)。Kitagawa等[16]人發(fā)現(xiàn)人參皂苷代謝產(chǎn)物可以抑制P－gp ATP酶的活性，進(jìn)而抑制P－gp的外排功能，而發(fā)揮逆轉(zhuǎn)耐藥的作用。另外，Kim等[17]發(fā)現(xiàn)Rg3在調(diào)節(jié)H160細(xì)胞耐阿霉素和耐長春新堿的表達(dá)上與維拉帕米（VP）效果相當(dāng)。此外，實驗還發(fā)現(xiàn)Rg3與維拉帕米（VP）聯(lián)用逆轉(zhuǎn)耐耐阿霉素和耐長春新堿效果更好，提示Rg3能提高多重耐藥白血病細(xì)胞對化療藥物的敏感性，且毒副作用更小。

3 輔助造血干細(xì)胞移植

3.1 促進(jìn)移植后造血重建 2006年Nature雜志報道鈣離子敏感受體CaSR是一個重要的歸巢分子，具有促進(jìn)造血重建作用[18]。Aguirre等[19]研究表明，人參皂苷可上調(diào)CaSR的活性促進(jìn)骨髓CD34+HSCs增殖，恢復(fù)損傷骨髓的造血機(jī)能。Chen等[20]提出人參皂苷Rg1不但能延緩SOD活性，減輕DNA損傷誘導(dǎo)的慢性氧化應(yīng)激反應(yīng)，還可以減少p16INK4a和p21CIP1/WAF1的表達(dá)，使造血干/祖細(xì)胞從G1期進(jìn)入S期，從而促進(jìn)造血干細(xì)胞增殖。韓霞[21]通過實驗，發(fā)現(xiàn)經(jīng) Rh2處理過的骨髓細(xì)胞 EPOR、JAK－2、STAT－3 mRNA表達(dá)水平明顯高于正常骨髓細(xì)胞，說明Rh2可能從基因和蛋白水平通過上調(diào)造血生長因子表面的受體表達(dá)進(jìn)而激活JAK－STAT通路促進(jìn)造血重建。

3.2 促進(jìn)移植后免疫重建 王華慶等[22]發(fā)現(xiàn)Rg3與IL－2聯(lián)合應(yīng)用可顯著提高造血干細(xì)胞移植患者外周血中CD3、CD4和CD4/CD8的水平及淋巴細(xì)胞刺激指數(shù)，提示Rg3可明顯加快患者移植后細(xì)胞免疫重建，從而提高造血干細(xì)胞移植患者的生存率。Lee等[23]研究表明Rg1可以增強(qiáng)CD4（+）T細(xì)胞活性，提高CD4（+）T細(xì)胞IL－2及IL－4 mRNA的表達(dá)，從而調(diào)節(jié)Th1/Th2分化，誘導(dǎo)體液免疫應(yīng)答。Kim等[24]研究表明，人參皂苷可通過增強(qiáng)細(xì)胞免疫應(yīng)答，控制白色念珠菌的感染。

4 結(jié)語

白血病是造血系統(tǒng)的惡性腫瘤，目前化療仍是目前白血病治療的主要手段，但化療所帶來的不良反應(yīng)及耐藥成為治療過程中的難點?？傊?，人參皂苷不但能配合化療起到增效減毒的作用，還能促進(jìn)造血干細(xì)胞移植后造血及免疫重建。但其作用途徑和機(jī)制還需進(jìn)一步的研究。

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（收稿：2014-08-08 修回：2014-08-13）

浙江省中醫(yī)藥科技計劃項目（No.2012ZB055）

1浙江中醫(yī)藥大學(xué)第一臨床醫(yī)學(xué)院（杭州 310006）；2浙江省中醫(yī)院血液科（杭州 310006）

林圣云，Tel：0571-86620325；E-mail：lsyww2012@163.com