■李許明 張蕉南 胡 兵 艾春香

(1.福建天馬科技集團(tuán)股份有限公司，福建福清 350308；2.廈門大學(xué)海洋與地球?qū)W院，福建廈門 361005)

中華鱉(Pelodiscus sinensis)具有較高的食用和保 健價值，因而備受人們的喜愛，為我國重要的特種水產(chǎn)品之一。同時，溫室養(yǎng)殖中華鱉屬于集約化養(yǎng)殖模式，因具有養(yǎng)殖周期短、密度大、產(chǎn)量高且效益好等特點(diǎn)在我國中華鱉養(yǎng)殖中占有絕對地位，但也存在因應(yīng)激和養(yǎng)殖環(huán)境惡化等問題，容易導(dǎo)致中華鱉免疫力降低，各種疾病頻發(fā)，造成較大的經(jīng)濟(jì)損失。養(yǎng)殖者為了提高養(yǎng)殖效率，在投喂飼料時使用一些抗生素，同時經(jīng)常潑灑殺菌消毒劑，以抑制病原菌繁殖，減少中華鱉疾病發(fā)生。然而這種方式不僅容易導(dǎo)致中華鱉產(chǎn)品質(zhì)量安全問題，而且還會造成養(yǎng)殖水環(huán)境抗生素污染，影響中華鱉產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展。尋找綠色能增強(qiáng)中華鱉自身免疫力的制劑是其健康養(yǎng)殖的重要技術(shù)措施之一。

抗菌肽(Antimicrobial peptides，ABPs)是一種具有廣泛抑制微生物活性的小分子多肽，是生物體天然免疫防御系統(tǒng)的重要效應(yīng)分子，具有廣譜殺菌、抗真菌、病毒、腫瘤以及消除體內(nèi)突變細(xì)胞的作用，能提高機(jī)體的免疫力。研究表明，在動物日糧中添加抗菌肽能夠提高動物的生產(chǎn)性能和飼料利用率、改善動物腸道微生態(tài)環(huán)境、提高動物的免疫機(jī)能與抗病力。目前，關(guān)于抗菌肽的研究主要集中在畜禽配合飼料使用和對蝦養(yǎng)殖中，而在魚類養(yǎng)殖的研究中應(yīng)用較少。本試驗(yàn)以日本品系中華鱉幼鱉為試驗(yàn)對象，在實(shí)用飼料配方的基礎(chǔ)上添加不同劑量的抗菌肽，探討其對中華鱉幼鱉生長性能的影響，為抗菌肽在中華鱉幼鱉配合飼料中的合理應(yīng)用提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

選取5 000只投放日期相同，規(guī)格整齊，附肢完整、健康，平均體質(zhì)量為(58.394±6.525)g日本品系中華鱉幼鱉作為試驗(yàn)動物。

本試驗(yàn)所用抗菌肽來源為飼料級市售噴干粉，由國家飼料工程技術(shù)研究中心研制，北京中農(nóng)穎泰生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計

在同一溫室內(nèi)選擇水質(zhì)穩(wěn)定、規(guī)格為50 m2(5 m×10 m)的4個水泥池進(jìn)行，試驗(yàn)時間是2014年12月10日開始，到2015年2月7日結(jié)束，進(jìn)行為期60 d的飼養(yǎng)試驗(yàn)，水位控制0.35～0.40 m。試驗(yàn)分為1個試驗(yàn)組和1個對照組，每組設(shè)置2個重復(fù)，每個水泥池均放養(yǎng)中華鱉的數(shù)量為1 250只。試驗(yàn)組投喂基礎(chǔ)中華鱉飼料+400 mg/kg抗菌肽，對照組只投喂基礎(chǔ)中華鱉飼料。試驗(yàn)期間，處理組飼料與水按1∶0.45～0.5混合均勻后使用制粒機(jī)進(jìn)行制成軟顆粒飼料進(jìn)行投喂?；A(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

1.3 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)時溫棚室內(nèi)水溫控制在(30±2)℃，加溫方式采用煤炭鍋爐加熱空氣傳導(dǎo)。每天投喂餌料2次，投喂時間分別為上午6:30、晚上6:30，每次的投餌量為日投餌量的1/2，具體投餌量則根據(jù)池內(nèi)日本品系中華鱉攝食情況、生理狀態(tài)、水質(zhì)狀況(如溶解氧、氨氮、硝酸鹽、亞硝酸鹽)、溫度等因素作適當(dāng)調(diào)整；室內(nèi)除投喂時開燈外，其他時間均處于黑暗，池內(nèi)保持24 h增氧，溶解氧＞5.5 mg/l。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平

1.4 判定指標(biāo)測定

試驗(yàn)開始前和結(jié)束時對各試驗(yàn)組進(jìn)行隨機(jī)抽取中華鱉進(jìn)行單獨(dú)稱取體質(zhì)量，統(tǒng)計分析時除掉最大值、最小值，以此計算增重率和飼料系數(shù)等。

每只均增重(g)=末重(g)-初重(g)；

特定生長率(%/d)=100×[ln末重(g)-ln初重(g)]/試驗(yàn)天數(shù)(d)；

總增重(kg)=試驗(yàn)結(jié)束時總重(kg)-試驗(yàn)開始時總重(kg)；

增重率(%)=[總增重(kg)/試驗(yàn)開始時總重(kg)]×100；

飼料系數(shù)=總投餌量(kg)/總增重(kg)；

成活率(%)=100×試驗(yàn)結(jié)束時數(shù)量(只)/試驗(yàn)開始時數(shù)量(只)；

每只中華鱉日攝食量[g/(只·d)]=總攝食量(g)/(試驗(yàn)開始時數(shù)量×試驗(yàn)天數(shù)。

1.5 數(shù)據(jù)處理

試驗(yàn)數(shù)據(jù)用“平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示，統(tǒng)計分析采用統(tǒng)計軟件Excel 2007、SPSS.v18。各處理的數(shù)據(jù)采用單因素方差分析(one-way ANOVA)并進(jìn)行多重比較，檢驗(yàn)處理間的差異顯著性(P＜0.05)。

2 結(jié)果與分析(見表2)

2.1 抗菌肽對日本品系中華鱉幼鱉成活率影響

經(jīng)過60 d的飼養(yǎng)試驗(yàn)，抗菌肽組和對照組的溫室養(yǎng)殖的日本品系中華鱉幼鱉的成活率分別為99.52%和99.20%，盡管抗菌肽組幼鱉的成活率高于對照組的，但兩組的幼鱉成活率差異不顯著(P＞0.05)。

表2 不同處理間溫室養(yǎng)殖日本品系中華鱉生長性能的影響

2.2 抗菌肽對日本品系中華鱉攝食量和生長性能的影響

60 d的飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)束時，每只日本品系中華鱉幼鱉日攝食量表現(xiàn)為抗菌肽組＞對照組，分別為0.99、0.91 g，兩組之間差異不顯著(P＞0.05)。日本品系中華鱉個體平均體增重情況以及其平均增重率，抗菌肽組均比對照組高，分別為49.49 g和42.69 g、92.87%和67.63%，其中，抗菌肽組的幼鱉增重率顯著高于對照組(P＜0.05)，兩組間的幼鱉個體平均體質(zhì)量增加差異不顯著(P＞0.05)。

2.3 抗菌肽對飼料系數(shù)的影響

幼鱉飼養(yǎng)60 d結(jié)束時，抗菌肽組的飼料系數(shù)比對照組的降低了6.98%，分別為1.20、1.29，且兩組之間的飼料系數(shù)差異顯著(P＜0.05)。

3 討論

隨著現(xiàn)代養(yǎng)殖技術(shù)的快速發(fā)展，標(biāo)準(zhǔn)化、規(guī)范化、集約化、工廠化養(yǎng)殖模式成為水產(chǎn)養(yǎng)殖發(fā)展趨勢主流。為追求高產(chǎn)量，溫室養(yǎng)殖中華鱉在養(yǎng)殖生產(chǎn)過程中往往采取高密度、投餌量大、高頻投餌等手段，引起排泄物和殘餌量超過了水環(huán)境的自凈能力，加劇了水環(huán)境的污染程度，養(yǎng)殖動物面臨的應(yīng)激不斷增加，導(dǎo)致養(yǎng)殖動物免疫力下降，使得各種細(xì)菌性和病毒性疾病頻頻發(fā)生。而在防治上主要使用抗生素或其它藥物，導(dǎo)致某些病原體對藥物產(chǎn)生了耐藥性，防治效果越來越差。

近幾年，抗菌肽的研究越來越深入，加深了人們對動物免疫防御機(jī)制的認(rèn)識，為日益嚴(yán)重的魚類病害防治開辟了嶄新的途徑。研究表明，抗菌肽能提高凡納濱對蝦(俗稱南美白對蝦)養(yǎng)殖成活率。添加抗菌肽制品能對水中的微生物加以控制，能殺滅致病微生物，提高蝦體免疫力和促進(jìn)生長等功效。飼料中添加抗菌肽能提高羅非魚成活率，但與對照組相比差異不顯著(P＞0.05)。

大量研究表明，抗菌蛋白能夠提高機(jī)體生長率和飼料系數(shù)，但試驗(yàn)結(jié)果間也有一定差異。飼料中添加抗菌蛋白對凡納濱對蝦(俗稱南美白對蝦)的生長有顯著影響，平均終末體重比對照組提高23%，日生長速度提高58%，相對增重率提高19%，成活率提高9%，飼料系數(shù)降低13%；在凡納濱對蝦飼料中添加10 g/kg重組抗菌肽制劑后，對蝦成活率提高8.41%，相對增重率提高27.60%；飼料中添加2%的小肽制品，歐鰻的生長率、攝食率和飼料效率均有不同程度的提高；飼料中添加5～10 mg/kg抗菌肽可以顯著提高羅非魚的終末體質(zhì)量和增重率，但不同添加劑量的抗菌肽(50、100和150 mg/kg)對羅非魚幼魚的生長性能無顯著影響。然而，在河蟹基礎(chǔ)日糧中添加0.4%的抗菌肽，增重率有升高趨勢，但對河蟹生長并未產(chǎn)生顯著影響。飼料中添加300 mg/kg抗菌肽后，凡納濱對蝦的增重率提高8.76%，飼料系數(shù)降低12.5%，而400 mg/kg和500 mg/kg組與對照組相比較差異不顯著?？咕膶Σ蒴~、鯉魚生長性能的影響顯著，添加150 mg/kg抗菌肽組的增重效果明顯，飼料系數(shù)降低，但均對草魚和鯉魚的成活率和肥滿度影響不顯著。飼料中添加抗菌肽5 000 IU/kg有助于改善鯉魚的生長發(fā)育及機(jī)體抗病力。產(chǎn)生上述不同結(jié)果可能與試驗(yàn)動物種類、養(yǎng)殖模式、飼養(yǎng)環(huán)境、抗菌肽產(chǎn)品種類或純度等因素有關(guān)。

本試驗(yàn)結(jié)果表明，抗菌肽組飼料系數(shù)降低了6.98%，且與對照組呈顯著性相關(guān)(P＜0.05)，中華鱉幼鱉個體平均體質(zhì)量增加，平均體質(zhì)量和增重率抗菌肽組均比對照組高?？赡苁且?yàn)榭咕囊种颇c道有害微生物，促進(jìn)腸道微生物菌群平衡，進(jìn)而產(chǎn)生促生長的作用。但抗菌肽添加過量會導(dǎo)致凡納濱對蝦和羅非魚增重率降低，這可能是因?yàn)楦邉┝靠咕臅种颇c道中有益菌群的生長，影響動物體的消化吸收。因此，抗菌肽應(yīng)用在溫室養(yǎng)殖日本品系中華鱉飼料的最適添加量有待進(jìn)一步研究。

4 小結(jié)

飼料中添加400 mg/kg抗菌肽可以在一定程度上改善溫室養(yǎng)殖日本品系中華鱉的生長性能，顯著提高了中華鱉的增重率和特定生長率，飼料系數(shù)降低顯著，但在促進(jìn)中華鱉攝食和成活率方面影響不顯著。

（參考文獻(xiàn)24篇，刊略，需者可函索）