胡 浩，楊寶德，杜克莘，孫曉明，茍 瑋＊（.西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)部藥理學(xué)系，西安 7006；.西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)部機(jī)能教學(xué)實(shí)驗(yàn)中心，西安 7006）

仙蟾片對(duì)大鼠心律失常的影響

胡 浩1，楊寶德1，杜克莘2，孫曉明2，茍 瑋2＊（1.西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)部藥理學(xué)系，西安 710061；2.西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)部機(jī)能教學(xué)實(shí)驗(yàn)中心，西安 710061）

目的 探討不同劑量仙蟾片對(duì)大鼠心律失常的作用，為臨床安全用藥提供參考。方法 灌胃給予大鼠不同劑量仙蟾片，記錄給藥后2h的心率變化以及心律失常的發(fā)生情況。測(cè)定仙蟾片對(duì)大鼠最大給藥量。結(jié)果 0.2和0.3g·kg－1仙蟾片對(duì)大鼠心率無明顯影響，且未出現(xiàn)心律失常；而0.45，0.68和1.01g·kg－1仙蟾片可使大鼠心率顯著加快，心律失常發(fā)生率分別為20%，70%和100%；0.012g·kg－1蟾酥可使大鼠心率顯著加快，心律失常發(fā)生率為30%。仙蟾片對(duì)大鼠的最大給藥量為7.2g·kg－1，約相當(dāng)于人用量（0.5g·kg－1）的14.4倍。結(jié)論 仙蟾片0.3g·kg－1（約相當(dāng)于推薦人日用量3g）以內(nèi)為安全用藥劑量范圍。

仙蟾片；蟾酥；心律失常；最大給藥量

心律失常（arrhythmia）通常是指心肌細(xì)胞電活動(dòng)異常，導(dǎo)致心臟搏動(dòng)的頻率和（或）節(jié)律發(fā)生異常。心律失常是心血管疾病中重要的一類疾病，嚴(yán)重的突然發(fā)作可致患者猝死［1－2］。仙蟾片是由馬錢子、蟾酥、補(bǔ)骨脂、半夏（制）、郁金、人參、黃芪、當(dāng)歸、仙鶴草等9味中藥組成的抗癌中藥復(fù)方，具有化瘀散結(jié)、益氣止痛的功效，用于多種癌癥的臨床治療。近年來，有文獻(xiàn)報(bào)道，過量使用蟾酥對(duì)心臟具有毒性作用，甚至?xí)l(fā)心律失常［3］。本實(shí)驗(yàn)主要通過觀察不同劑量仙蟾片是否可引發(fā)心律失常，以期闡明仙蟾片導(dǎo)致心律失常的劑量范圍，為仙蟾片的臨床安全用藥提供依據(jù)。

1 儀器與材料

1.1 儀器 BL420－生物信號(hào)采集系統(tǒng)（成都泰盟科技有限公司）。

1.2 試藥 仙蟾片（楊凌東科麥迪森制藥有限公司，批號(hào)130801）；蟾酥細(xì)粉（楊凌東科麥迪森制藥有限公司）。

1.3 動(dòng)物 Sprague Dawley大鼠，SPF級(jí)，雌雄各半，體質(zhì)量180～220g，動(dòng)物許可證號(hào)：SCXK（陜）2012－003，購自西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。

2 方法

2.1 仙蟾片對(duì)大鼠心律失常的影響 取SD品系大鼠60只，雌雄各半，隨機(jī)分為6組，每組10只：仙蟾片1組（0.2g·kg－1）；仙蟾片2組（0.3g·kg－1）；仙蟾片3組（0.45g·kg－1）；仙蟾片4組（0.68g·kg－1）；仙蟾片5組（1.01g·kg－1）；蟾酥組（0.012g·kg－1）。大鼠稱體質(zhì)量，腹腔注射100g·L－1水合氯醛（0.3g·kg－1）麻醉，仰臥位固定于大鼠手術(shù)臺(tái)上，四肢皮下插入心電圖導(dǎo)聯(lián)線，描記標(biāo)準(zhǔn)肢體Ⅱ?qū)?lián)心電圖。記錄正常Ⅱ?qū)?lián)心電圖后，灌胃給藥，10mL·kg－1。連續(xù)記錄給藥后2h心電圖的變化。記錄給藥后大鼠心率變化以及心律失常的出現(xiàn)時(shí)間、持續(xù)時(shí)間，計(jì)算心律失常的發(fā)生率。

2.2 仙蟾片對(duì)大鼠最大給藥量測(cè)定 取SD品系大鼠20只，雌雄各半，以仙蟾片粉配得的最大質(zhì)量濃度（360g·L－1）和灌胃容量（20mL·kg－1）對(duì)大鼠灌胃給藥1次，觀察給藥后14d動(dòng)物毒性反應(yīng)以及死亡情況。

3 結(jié)果

3.1 仙蟾片對(duì)大鼠心率的影響 實(shí)驗(yàn)過程中所有動(dòng)

物均順利完成實(shí)驗(yàn)，未出現(xiàn)死亡，結(jié)果見表1。由表1可見，與給藥前比較，0.2和0.3g·kg－1仙蟾片對(duì)大鼠心率無明顯影響；0.45g·kg－1仙蟾片在給藥后1～2h可使大鼠心率明顯加快（＊P＜0.05）；0.68和1.01g·kg－1仙蟾片在給藥后0.5～2h可使大鼠心率顯著加快（＊P＜0.05，＊＊P＜0.01）；0.012g·kg－1蟾酥在給藥后1～2h可使大鼠心率顯著加快（＊P＜0.05，＊＊P＜0.01）。

表1 仙蟾片對(duì)大鼠心率的影響Tab.1 Effects of Xianchan Tablets on heart rate in rats±s，n＝10）

表1 仙蟾片對(duì)大鼠心率的影響Tab.1 Effects of Xianchan Tablets on heart rate in rats±s，n＝10）

注：與給藥前比較＊P＜0.05，＊＊P＜0.01。

組別 劑量／g·kg－1心率／次·min－1給藥前 給藥后0.5h 給藥后1h 給藥后2h仙蟾片1組0.2 435±45 434±34 430±45 431±46仙蟾片2組 0.3 434±28 436±29 442±34 444±38仙蟾片3組 0.45 438±40 440±40 446±41＊ 455±34＊仙蟾片4組 0.68 436±32 448±31＊ 459±32＊＊ 461±33＊＊仙蟾片5組 1.01 432±35 442±34＊＊ 463±38＊＊ 474±36＊＊蟾酥組 0.012 434±35 438±37 443±40＊ 451±41＊＊

3.2 仙蟾片對(duì)大鼠心律失常的影響 見表2。由表2可知，仙蟾片0.2和0.3g·kg－1未出現(xiàn)心律失常，0.45g·kg－1心律失常發(fā)生率為20%，0.68g·kg－1心律失常發(fā)生率為70%，1.01g·kg－1心律失常發(fā)生率為100%（見圖1），心律失常發(fā)生率與仙蟾片用量呈劑量依賴關(guān)系。蟾酥0.012g·kg－1大鼠心律失常發(fā)生率為30%。心律失常主要表現(xiàn)為室性心動(dòng)過速，且隨著仙蟾片劑量的增加，心律失常出現(xiàn)時(shí)間縮短、持續(xù)時(shí)間延長(zhǎng)。

表2 仙蟾片對(duì)大鼠心律失常的影響Tab.2 Effects of Xianchan Tablets on arrhythmia in rats

圖1 仙蟾片（1.01 g·kg－1）導(dǎo)致的大鼠心律失常Fig.1 The arrhythmia induced by Xianchan Tablets（1.01 g·kg－1）in ratsA.正常心電圖（給藥前）；B.室性心動(dòng)過速（給藥后）A.normal electrocardiogram（before administration）；B.ventricular tachycardia（after administration）

3.3 仙蟾片對(duì)大鼠的最大給藥量 以仙蟾片粉所配得的最大質(zhì)量濃度（360g·L－1）和灌胃容量（20 mL·kg－1）對(duì)大鼠灌胃給藥1次，給藥后14d所有動(dòng)物均存活，一般狀況良好，未發(fā)現(xiàn)明顯異常，未出現(xiàn)死亡。觀察期結(jié)束后對(duì)所有動(dòng)物進(jìn)行解剖，未發(fā)現(xiàn)器官出現(xiàn)體積、顏色、質(zhì)地等改變。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，仙蟾片對(duì)大鼠的最大給藥量為7.2g·kg－1，約相當(dāng)于人用量（0.5g·kg－1·d－1）的14.4倍。

4 討論

仙蟾片是在對(duì)祖國(guó)傳統(tǒng)中醫(yī)理論關(guān)于腫瘤發(fā)病機(jī)制的認(rèn)識(shí)和治療原則的基礎(chǔ)上，結(jié)合現(xiàn)代藥理研究而開是的抗腫瘤中藥復(fù)方。該方具有化瘀散結(jié)、益氣止痛的功效，用于食管癌、胃癌、肺癌等腫瘤的治療，臨床療效較好。蟾酥是該方中的主要成分之一，是蟾蜍表皮腺體的分泌物，為白色乳狀液體，干燥后可入藥。蟾酥味辛、性溫，歸心經(jīng)，具有開竅醒神、清熱解毒、消腫止痛之功能，已被廣泛用于心血管、腫瘤等疾病的臨床治療［4］。蟾酥有毒性，其用藥安全范圍較窄。有研究報(bào)道，蟾酥具有心臟毒性，過量使用可引起胸悶、心悸、血壓下降，甚至心跳驟停而死亡。蔣潔君等研究發(fā)現(xiàn)，125～250mg·kg－1蟾酥可顯著加快豚鼠心率［5］。本研究結(jié)果顯示，12mg·kg－1蟾酥（相當(dāng)于本研究中仙蟾片0.3g·kg－1中所含蟾酥量）可使大鼠心率加快，0.45～1.01g·kg－1仙蟾片亦可使大鼠心率顯著加快。

蟾酥具有心臟毒性，大多數(shù)研究認(rèn)為其作用機(jī)制主要是抑制了心肌細(xì)胞膜上的Na＋－K＋－ATP酶，引起心肌細(xì)胞內(nèi)鈣超載，進(jìn)而引起早后除極和遲后除極，產(chǎn)生心律失常［6］。雖然蟾酥有引起心律失常的風(fēng)險(xiǎn)，但仙蟾片組方中的諸多成分具有抗心律失常作用，可能對(duì)抗蟾酥引發(fā)的心律失常。研究表明，馬錢子提取物馬錢子堿可降低氯仿、氯化鈣、烏頭堿、腎上腺素等誘發(fā)的動(dòng)物心律失常發(fā)生率，延長(zhǎng)心律失常潛伏期，縮短持續(xù)時(shí)間［7］；半夏對(duì)氯化鋇、腎上腺素誘發(fā)的動(dòng)物心律失常有一定對(duì)抗作用［8］；人參中的主要成分人參皂苷是其抗心律失常的重要活性成分，具有胺碘酮樣作用，通過通道阻滯作用對(duì)多種心律失常有較好的療效［9］；黃芪的主要成分黃芪總黃酮及黃芪甲苷可明顯降低缺血再灌注和氯化鋇誘發(fā)的動(dòng)物心律失常發(fā)生率［10］；當(dāng)歸及其提取物能對(duì)抗哇巴因、烏頭堿、地高辛等誘發(fā)的動(dòng)物心律失常［11］。本研究結(jié)果顯示，12mg·kg－1蟾酥（相當(dāng)于本研究中仙蟾片0.3 g·kg－1中所含蟾酥量）對(duì)大鼠心律失常發(fā)生率為30%；而0.3g·kg－1仙蟾片（約相當(dāng)于人用量3.0 g·d－1）對(duì)大鼠心率無明顯影響，且未發(fā)生心律失常；而0.45，0.68和1.01g·kg－1仙蟾片心律失常發(fā)生率分別為20%，70%和100%。上述結(jié)果提示，0.3 g·kg－1仙蟾片（約相當(dāng)于推薦人日用量）在大鼠未發(fā)生心律失常，而其等效劑量的蟾酥（12mg·kg－1）心律失常發(fā)生率卻為30%，這可能是仙蟾片組方中的諸多抗心律失常有效成分綜合作用的結(jié)果。同時(shí)，本研究進(jìn)一步的研究結(jié)果表明，仙蟾片對(duì)大鼠的最大給藥量為7.2g·kg－1，約相當(dāng)于人用量（0.5g·kg－1）的14.4倍。因此，只要在合理劑量范圍內(nèi)使用仙蟾片，不但臨床療效確切，而且用藥安全性也能得到保證。

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Effects of Xianchan Tablets on arrhythmia in rats

HU Hao1，YANG Baode1，DU Kexin2，SUN Xiaoming2，GOU Wei2＊（1.Department of Pharmacology，Health Science Center，Xi′an Jiaotong University，Xi′an 710061，China；2.Experiment Center of Function Teaching，Health Science Center，Xi′an Jiaotong University，Xi′an 710061，China）

Abstract：Objective To study the effects of different doses of Xianchan Tablets on arrhythmia in rats.Methods After intragastric administration of different doses of Xianchan Tablets to rats，heart rate and arrhythmia of rats were recorded within 2hours.The maximum dosage of Xianchan Tablets was also tested by intragastric administration.Results The Xianchan Tablets with the dose 0.2and 0.3g·kg－1did not affect the heart rate and arrhythmia in rats.The Xianchan Tablets with doses of 0.45，0.68and 1.01 g·kg－1could increase the heart rate in rats，and booste arrhythmia incidence rate with 20%，70%and 100%，respectively.The bufonis venenum with the dose of 0.012g·kg－1could increase the heart rate and arrhythmia incidence rate up to 30%.The maximum dosage of Xianchan Tablets was 7.2g·kg－1，which was approximately 14.4times corresponding to person dosage（0.5g·kg－1）.Conclusion The Xianchan Tablets were safe within the dose of 0.3g·kg－1（corresponding to person dosage 3g per day）.

Xianchan Tablets；bufonis venenum；arrhythmia；the maximum dosage

10.3969／j.issn.1004－2407.2015.02.016

R965

A

1004－2407（2015）02－0155－04

2014－09－06）

陜西省科學(xué)技術(shù)研究發(fā)展計(jì)劃項(xiàng)目（編號(hào)：2013K21－22－01）

胡浩，男，博士，副教授

＊通信作者：茍瑋，女，高級(jí)實(shí)驗(yàn)師