賈 梅， 鄭傳柱， 李 慧， 張 麗 ， 丁安偉

(南京中醫(yī)藥大學(xué)，江蘇省方劑高技術(shù)研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，江蘇省中藥資源產(chǎn)業(yè)化過程協(xié)同創(chuàng)新中心，江蘇南京210023)

膠艾湯出自東漢張仲景《金匱要略》［1］，全方由阿膠、艾葉、甘草、當(dāng)歸、川芎、白芍、生地黃七味組成。《金匱要略心典》云:“婦人經(jīng)水淋漓，及胎前產(chǎn)后下血不止者，皆沖任脈虛，而陰氣不能守也。是惟膠艾湯能補(bǔ)而固之”，膠艾湯臨床主要用于治療婦人月水過多、淋漓不止、或伴產(chǎn)后下血不絕、或妊娠下血、腹中疼痛等癥。本實(shí)驗(yàn)室前期研究已表明膠艾湯具有較好的止血作用，膠艾湯中的阿膠、艾葉為膠艾湯發(fā)揮止血作用的主要藥味［2-3］，但迄今為止，膠艾湯止血作用物質(zhì)基礎(chǔ)方面的報道較少。因此，本實(shí)驗(yàn)擬采用子宮出血模型大鼠篩選膠艾湯止血作用的有效部位，為深入研究膠艾湯止血作用的物質(zhì)基礎(chǔ)提供依據(jù)。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 實(shí)驗(yàn)藥材 當(dāng)歸、川芎、白芍、生地、艾葉、甘草飲片均購于安徽豐源銅陵中藥飲片有限公司，批號分別為121203，121203，121106，120908，121106，120908。阿膠購于山東福膠集團(tuán)東阿鎮(zhèn)阿膠有限公司，批號為120612。上述各飲片經(jīng)南京中醫(yī)藥大學(xué)段金廒教授鑒定分別為傘形科植物當(dāng)歸Angelica sinensis (Oliv.)Diels. 的干燥根、傘形科植物川芎Ligusticum chuanxiong Hort. 的干燥根莖、毛茛科植物芍藥Paeonia lactiflora Pall. 的干燥根、玄參科植物地黃Rehmannia glutinosa Libosch. 的干燥塊根、菊科植物艾Artemisia argyi Lévl.et Vant. 的干燥葉、豆科植物甘草Glycyrrhiza uralensis Fisch. 的干燥根莖和馬科動物驢Equus asinus L. 的鮮皮經(jīng)加工而成。

1.2 儀器與試藥 LG-PABER-1 半自動凝血分析儀(北京世帝科學(xué)儀器有限責(zé)任公司);Anke-LXJ-11B 離心機(jī)(上海安壽科學(xué)儀器廠);SHANGPINGYP601N 型1/10 電子天平(上海精密科學(xué)儀器有限公司);紫外/可見分光光度計(jì)(PerkinElmer);MKIII 型酶標(biāo)儀(Thermo fisher)。

米非司酮片 (浙江仙琚制藥股份有限公司，批號111101);米索前列醇(Piramal Healthcare UK Limited，批號B03099);宮血寧膠囊(云南白藥集團(tuán)股份有限公司，批號ZK12009);枸櫞酸鈉(國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，批號F20110506);水合氯醛 (Kermel，批號B1420001);羧甲基纖維素鈉(上海久億，批號20090910)。NaCl (西隴化工股份有限公司，批號1109241);甲醛(國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，批號20130325);硅藻土(天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司，批號20090710);石油醚 (60 ～90 ℃)、乙酸乙酯、正丁醇均為國產(chǎn)分析純。試劑盒包括凝血酶原時間 (PT，批號STG20101-49)、凝血酶時間(TT，批號STG20301-35A)、活化部分凝血活酶時間(APTT，批號ST20201-41)、血漿纖維蛋白原(FIB，批號STY20401-42)，二磷酸腺苷(ADP 粉劑1 瓶，ADP 緩沖液10 mL/瓶)均購于北京世帝科學(xué)儀器公司;血栓烷素B2(TXB2，批號1025RT01)、6-酮-前列腺素 (6-keto-PGFla，批號1024RW08)、雌二醇(E2，批號1022XG06)、孕酮(P，批號1020VH11)、促黃體生成激素 (LH，批號1023AO09)、卵泡刺激素(FSH，批號1025QU15)均購于北京北方生物技術(shù)研究所。

1.3 實(shí)驗(yàn)動物 雌性SD 大鼠80 只，SPF 級，體質(zhì)量220 ～250 g;雄性SD 大鼠40 只，SPF 級，體質(zhì)量250 ～300 g，由浙江省實(shí)驗(yàn)動物中心提供，許可證號SCXK (浙)2014-0001。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 供試品溶液的制備 稱取膠艾湯組方飲片2 880 g(阿膠∶川芎∶甘草∶艾葉∶當(dāng)歸∶白芍∶生地黃2 ∶2 ∶2 ∶3 ∶3 ∶4 ∶4)，依古法加水煎煮［1］，水煎液減壓濃縮得到膠艾湯浸膏，取膠艾湯浸膏適量減壓真空干燥，得膠艾湯干燥粉末，保存?zhèn)溆?。剩余浸膏趁熱用硅藻土拌?硅藻土與浸膏比例為1 ∶1.5)后置減壓真空干燥箱55 ℃烘干。再采用系統(tǒng)溶劑提取法對膠艾湯干燥藥粉進(jìn)行提取，各溶劑提取物減壓真空干燥至干，得石油醚部位浸膏、乙酸乙酯部位浸膏、正丁醇部位浸膏、水部位浸膏分別為6.5 g(得率0.23%)、40.2 g (得率1.40%)、268.8 g (得率9.30%)、492.0 g (得率17.08%)。分別稱取適量的膠艾湯及4 個提取部位浸膏，加0.5%CMC-Na 溶液適量，制得質(zhì)量濃度 (按生藥量計(jì)算)分別為1.20、1.20、1.20、1.20、1.20 g/mL 的各供試品溶液。另取宮血寧膠囊適量，加0.5%CMC-Na 溶液制成質(zhì)量濃度為15.60 mg/mL 宮血寧溶液，各供試品溶液置4 ℃冰箱內(nèi)保存?zhèn)溆谩?/p>

2.2 動物分組及給藥 將子宮出血模型復(fù)制成功的雌性大鼠按照隨機(jī)數(shù)字表法隨機(jī)分為8 組，每組10 只，分別為空白組，模型組，宮血寧組，膠艾湯組，石油醚組，乙酸乙酯組，正丁醇組，水組。各給藥組均按照臨床給藥劑量2倍折算成動物給藥劑量，即宮血寧組0.156 g/(kg·d)、膠艾湯組、石油醚組、乙酸乙酯組、正丁醇組、水組均為12 g/(kg·d)(按生藥量計(jì)算)。各給藥組于妊娠第8 天按1 mL/100 g 給藥量灌胃相應(yīng)藥物，空白組與模型組灌胃等劑量的0.5%CMC-Na 溶液，每天給藥1 次，連續(xù)給藥7 d。

2.3 子宮出血模型復(fù)制 于17 ∶00 將大鼠按雌雄2 ∶1 比例合籠，次日8 ∶00 進(jìn)行陰道涂片檢查，以發(fā)現(xiàn)精子為妊娠第1 天。于第7 天分別灌胃米非司酮8.3 mg/kg (8 ∶00)和米索前列醇100 μg/kg (18 ∶00)，復(fù)制早孕大鼠子宮出血模型［4］，灌胃完米索前列醇后于陰道內(nèi)置入定量棉球一個，于次日8 點(diǎn)和18 點(diǎn)將定量棉球取出并置入新棉球，以觀察到棉球出血表示子宮出血模型復(fù)制成功。

2.4 指標(biāo)檢測 第7 天灌胃米索前列醇后于陰道內(nèi)置入定量棉球(棉球質(zhì)量85 ～90 mg)一個(定量棉球用塑料薄膜半包裹，以防血液外漏和尿液返流)，分別于次日8 點(diǎn)和18 點(diǎn)將定量棉球取出并置入新棉球，取出的棉球置于自封袋內(nèi)于4 ℃冰箱內(nèi)保存(用于子宮出血量測定)，持續(xù)至第14 天，記錄各組動物子宮出血時間 (uterine bleeding time，UBT)，依文獻(xiàn)［4］ 方法計(jì)算子宮出血量(uterine bleeding quantity，UBQ)。

于第14 天各給藥組給藥40 min 后，動物以10%水合氯醛麻醉，頸總動脈取血，以3.8%枸櫞酸鈉抗凝體積比(1 ∶9)，全血以3 000 r/min 離心10 min，取上層貧血小板血漿(PPP)用半自動凝血分析儀按照凝血四項(xiàng)說明書測定凝血四項(xiàng)，另取全血2 mL (不加抗凝劑)靜置30 min 后以3 000 r/min 離心10 min，取上層血清用96 孔板按照ELISA 試劑盒說明書測定血清中TXB2、6-keto-PGFla、E2、P、LH、FSH 的水平。

大鼠處死后，迅速摘取子宮，置10%福爾馬林中固定，石蠟包埋，切片，HE 染色，做組織形態(tài)學(xué)檢查。

2.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 19.0 統(tǒng)計(jì)軟件對實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行雙樣本t 檢驗(yàn)及方差分析，所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均采用(±s)表示，以P ＜0.05 或P ＜0.01 具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3.1 對子宮出血模型大鼠E2、P、LH、FSH 的影響 與空白組比較，模型組大鼠E2、P、LH、FSH 明顯降低(P ＜0.01)。與模型組比較，宮血寧組、膠艾湯組可明顯升高FSH (P ＜0.01)、LH (P ＜0.01，P ＜0.05)、P (P ＜0.01，P ＜0.05)、E2 (P ＜0.05，P ＜0.01);乙酸乙酯組可明顯升高E2、P、LH、FSH (P ＜0.01);正丁醇組可明顯升高LH (P ＜0.01);水組可明顯升高E2、FSH (P ＜0.05)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表1。

表1 膠艾湯及其各溶劑提取部位對子宮出血模型大鼠E2、P、LH、FSH 的影響(±s，n=10)

表1 膠艾湯及其各溶劑提取部位對子宮出血模型大鼠E2、P、LH、FSH 的影響(±s，n=10)

注:與空白組比較，* P ＜0.05，＊＊P ＜0.01;與模型組比較，#P ＜0.05，##P ＜0.01，下表同

組別 劑量/(g·kg -1) E2/(pg·mL -1) P/(ng·mL -1) LH/(mIU·mL -1) FSH/(mIU·mL -1)空白組 - 365.43 ±17.65 6.33 ±0.29 18.72 ±0.83 4.39 ±0.30模型組 - 299.21 ±38.31＊＊ 5.66 ±0.40＊＊ 12.01 ±0.48＊＊ 3.74 ±0.35＊＊宮血寧組 0.156 336.94 ±14.55# 6.31 ±0.26## 15.37 ±0.83## 4.40 ±0.44##膠艾湯組 12 369.97 ±13.83## 6.07 ±0.22# 13.10 ±1.09# 4.30 ±0.22##石油醚組 12 311.27 ±22.67 5.88 ±0.41 12.51 ±0.65 4.16 ±0.61乙酸乙酯組 12 350.61 ±17.92## 6.40 ±0.21## 15.65 ±1.44## 4.38 ±0.19##正丁醇組 12 323.46 ±30.98 6.01 ±0.34 16.08 ±1.08## 3.88 ±0.34水 組 12 338.31 ±22.98# 5.89 ±0.18 12.31 ±0.70 4.18 ±0.39#

3.2 對子宮出血模型大鼠凝血功能的影響 與空白組比較，模型組大鼠PT (P ＜0.01)、APTT (P ＜0.01)、TT(P ＜0.05)明顯延長，F(xiàn)IB 明顯降低(P ＜0.01)。與模型組比較，宮血寧組、膠艾湯組可明顯升高FIB (P ＜0.01)，縮短PT (P ＜0.01)、APTT (P ＜0.05)，膠艾湯組可明顯縮短TT (P ＜0.01);乙酸乙酯組可明顯縮短TT (P ＜0.01)、PT (P ＜0.01)、APTT (P ＜0.05)，升高FIB (P＜0.01);石油醚組可明顯升高FIB (P ＜0.05);水組可明顯縮短TT (P ＜0.05)，升高FIB (P ＜0.05)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表2。

表2 膠艾湯及其各溶劑提取部位對子宮出血模型大鼠凝血功能的影響(±s，n=10)

表2 膠艾湯及其各溶劑提取部位對子宮出血模型大鼠凝血功能的影響(±s，n=10)

組別 劑量( ) ( )23.99 ±2.15 9.52 ±0.19 11.63 ±0.56 2.28 ±0.27模型組 - 28.41 ±4.44* 10.37 ±0.35＊＊ 13.06 ±0.98＊＊ 1.82 ±0.20＊＊宮血寧組 0.156 26.09 ±0.94 8.36 ±0.35## 11.51 ±1.08# 2.22 ±0.12##膠艾湯組 12 22.79 ±1.16## 9.45 ±0.60## 11.06 ±1.31# 2.23 ±0.17##石油醚組 12 26.86 ±1.14 9.88 ±0.51 12.37 ±0.44 2.11 ±0.25#乙酸乙酯組 12 21.78 ±1.04## 9.53 ±0.39## 11.11 ±1.26# 2.12 ±0.06##正丁醇組 12 24.80 ±0.58 9.56 ±1.55 12.24 ±1.48 2.13 ±0.42水 組 12 24.26 ±1.26# 10.00 ±0.78 12.35 ±1.71 2.19 ±0.33空白組-#

3.3 對子宮出血模型大鼠TXB2、6-keto-PGFla 的影響 與空白組比較，模型組TXB2明顯降低(P ＜0.01)、6-keto-PGFla 明顯升高(P ＜0.01)。與模型組比較，宮血寧組、膠艾湯組可明顯升高TXB2(P ＜0.01)，降低6-keto-PGFla(P ＜0.01，P ＜0.05);乙酸乙酯組、水組可明顯升高TXB2(P ＜0.01)、降低6-keto-PGFla (P ＜0.01，P ＜0.05);正丁醇組可明顯降低6-keto-PGFla (P ＜0.01);各給藥組(正丁醇組除外)均可調(diào)節(jié)TXB2/6-keto-PGFla 平衡。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表3。

表3 膠艾湯及其各溶劑提取部位對子宮出血模型大鼠TXB2、6-keto-PGFla 的影響(±s，n=10)

表3 膠艾湯及其各溶劑提取部位對子宮出血模型大鼠TXB2、6-keto-PGFla 的影響(±s，n=10)

組別 劑量/(g·kg -1) TXB2/(pg·mL -1) 6-keto-PGFla/(pg·mL -1) TXB2/6 -keto-PGFla空白組34.56 ±0.24 21.48 ±1.12 1.61 ±0.08模型組 - 21.69 ±2.54＊＊ 38.79 ±4.07＊＊ 0.58 ±0.08＊＊宮血寧組 0.156 27.69 ±1.76## 27.95 ±1.76## 0.99 ±0.08##膠艾湯組 12 33.86 ±0.43## 33.46 ±2.00# 1.01 ±0.06##石油醚組 12 22.98 ±0.96 36.05 ±2.02 0.64 ±0.05乙酸乙酯組 12 32.47 ±0.78## 25.44 ±1.27## 1.28 ±0.09##正丁醇組 12 25.18 ±3.82 25.07 ±1.83## 1.00 ±0.10##水 組 12 25.77 ±2.10## 35.08 ±2.15# 0.74 ±0.07-##

3.4 對子宮出血模型大鼠UBT、UBQ 的影響 與模型組比較，膠艾湯組、宮血寧組可明顯減少UBQ (P ＜0.01)、縮短UBT (P ＜0.01，P ＜0.05);乙酸乙酯組、水組可明顯減少UBQ (P ＜0.01，P ＜0.05)、縮短UBT (P ＜0.05)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表4。

表4 膠艾湯及其各溶劑提取部位對子宮出血模型大鼠UBT、UBQ 的影響(±s，n=10)

表4 膠艾湯及其各溶劑提取部位對子宮出血模型大鼠UBT、UBQ 的影響(±s，n=10)

組別 劑量/(g·kg -1)UBT/h UBQ/mL空白組- 0.00 ±0.00 0.00 ±0.00模型組 - 148.00 ±38.45 0.43 ±0.04宮血寧組 0.156 96.00 ±15.18# 0.32 ±0.04##膠艾湯組 12 90.00 ±21.27## 0.33 ±0.02##石油醚組 12 129.00 ±31.26 0.40 ±0.02乙酸乙酯組 12 99.00 ±27.02# 0.33 ±0.03##正丁醇組 12 106.29 ±43.50 0.40 ±0.03水 組 12 109.71 ±23.42# 0.36 ±0.04#

3.5 對子宮出血模型大鼠子宮肉眼形態(tài)的影響 空白組大鼠子宮呈明顯的結(jié)節(jié)狀膨大，胚胎之間界限明顯，色紅潤;模型組子宮可見胚胎之間界線不明顯，有殘留和瘀血，為不完全流產(chǎn);其余各給藥組子宮均未見明顯結(jié)節(jié)，但有些子宮可見瘀血，子宮周圍有充血現(xiàn)象。子宮肉眼形態(tài)學(xué)觀察結(jié)果如圖1 所示。

3.6 對子宮出血模型大鼠子宮組織形態(tài)學(xué)的影響 空白組大鼠子宮組織可見明顯的滋養(yǎng)層細(xì)胞，處于正常妊娠期;模型組大鼠子宮組織無明顯的滋養(yǎng)層細(xì)胞存在，但可見有明顯瘀血現(xiàn)象，為不完全流產(chǎn);其余各給藥組子宮組織均無滋養(yǎng)層細(xì)胞，且可觀察到有不同程度的蛻膜樣變，其中乙酸乙酯組子宮組織無明顯蛻膜樣變，子宮內(nèi)膜已恢復(fù)且處于增生期，說明乙酸乙酯部位最有利于促進(jìn)產(chǎn)后子宮的復(fù)原。子宮組織形態(tài)學(xué)觀察結(jié)果如圖2 所示。

4 討論

圖1 不同給藥組大鼠子宮肉眼形態(tài)圖

圖2 不同給藥組大鼠子宮組織形態(tài)學(xué)圖(HE，×100)

米非司酮聯(lián)合米索前列醇用于終止早孕成功率可達(dá)90%以上［5］，現(xiàn)代研究表明，米非司酮可通過分子水平選擇性地與孕酮受體結(jié)合，產(chǎn)生抗孕酮作用，使妊娠物失去孕激素的支持而發(fā)生絨毛組織及蛻膜變性，釋放前列腺素，導(dǎo)致黃體生成素下降，黃體萎縮，從而使依賴黃體發(fā)育的胚囊壞死［6］，米索前列醇可提高子宮平滑肌的興奮性，促使子宮收縮，宮頸軟化，促進(jìn)胚胎排除而終止妊娠［7］。與傳統(tǒng)手術(shù)療法相比較，藥物流產(chǎn)具有安全性高、簡便、高效、痛苦小等優(yōu)點(diǎn)，米非司酮聯(lián)合米索前列醇是目前臨床常用的藥物流產(chǎn)方法，且臨床取得理想效果，故本實(shí)驗(yàn)選擇米非司酮聯(lián)合米索前列醇復(fù)制大鼠子宮出血模型。

宮血寧膠囊其原料為重樓［8］，文獻(xiàn)研究表明，宮血寧膠囊的主要有效成分重樓皂苷可通過直接興奮子宮平滑肌使子宮產(chǎn)生節(jié)律性收縮，增強(qiáng)子宮收縮力，從而促進(jìn)蛻膜排出和子宮恢復(fù)，發(fā)揮抗早孕作用［9］，通過縮短出血、凝血時間，促進(jìn)ADP 誘導(dǎo)的血小板聚集作用而達(dá)到明顯的止血效果［10］。宮血寧膠囊還具有縮短子宮出血時間，減少子宮出血量等藥理作用［11］，且臨床研究表明［12］，藥物流產(chǎn)者口服宮血寧后均未發(fā)現(xiàn)任何毒副作用，故本實(shí)驗(yàn)選擇宮血寧膠囊作為陽性藥。

文獻(xiàn)研究表明［13］，米非司酮聯(lián)合米索前列醇造成早孕大鼠不完全流產(chǎn)后破壞了下丘腦-垂體-卵巢軸(HPOA)的正常生理功能，使下丘腦分泌的促性腺激素釋放激素(GnRH)減少，進(jìn)而引起垂體分泌促黃體生成激素(LH)和卵泡刺激素(FSH)分泌減少，卵巢分泌的孕酮(P)、雌二醇(E2)減少而降低子宮平滑肌對縮宮素的敏感性，從而導(dǎo)致藥物流產(chǎn)后子宮出血時間(UBT)延長，子宮出血量(UBQ)增加，延緩子宮內(nèi)膜的修復(fù)。藥物流產(chǎn)后機(jī)體的內(nèi)源性和外源性凝血系統(tǒng)被激活，APTT 主要反映內(nèi)源性凝血途徑中凝血因子的水平，PT 可反映外源性凝血途徑的凝血因子水平［14］，藥物流產(chǎn)后凝血酶時間(TT)、凝血酶原時間(PT)、活化部分凝血活酶時間(APTT)明顯延長，血漿纖維蛋白原(FIB)明顯降低，同時機(jī)體內(nèi)調(diào)控血小板功能最強(qiáng)大的一對物質(zhì)［15］TXB2和6-keto-PGFla 平衡被破壞，促進(jìn)血小板聚集和血管收縮的TXB2水平降低，促使血管擴(kuò)張和抑制血小板聚集的6-keto-PGFla 水平升高。本實(shí)驗(yàn)研究中，與空白組比較，模型組大鼠E2、P、LH、FSH、FIB 明顯降低，TT、PT、APTT 明顯延長，TXB2明顯降低，6-keto-PGFla 明顯升高，UBT、UBQ 明顯增大，表明子宮出血模型復(fù)制成功。與模型組比較，膠艾湯乙酸乙酯組可明顯升高E2、P、LH、FSH，從而回調(diào)下丘腦-垂體-卵巢軸的生理功能，并回調(diào)因藥物流產(chǎn)后所造成的機(jī)體內(nèi)源性和外源性凝血系統(tǒng)的紊亂，明顯縮短TT、PT、APTT、UBT，升高FIB、TXB2，減少UBQ，降低6-keto-PGFla，調(diào)節(jié)TXB2/6-keto-PGFla 平衡，從而表現(xiàn)出良好的保血作用;正丁醇組可明顯升高LH，降低6-keto-PGFla，調(diào)節(jié)TXB2/6-keto-PGFla 平衡;水組可明顯縮短TT、UBT，升高FIB、TXB2，減少UBQ，降低6-keto-PGFla，調(diào)節(jié)TXB2/6-keto-PGFla 平衡。綜上所述，乙酸乙酯部位是膠艾湯止血作用的最有效部位，但膠艾湯發(fā)揮止血作用的活性成分群以及化學(xué)成分與藥理作用之間的關(guān)聯(lián)性還需進(jìn)一步深入研究。

［1］ 漢·張仲景，晉·王叔和. 新編金匱要略方論［M］. 北京:商務(wù)印書出版社，1955:73.

［2］ 賀衛(wèi)和，蔣孟良，曾 婷，等. 膠艾湯中阿膠炮制對其止血作用影響的研究［J］. 中華中醫(yī)藥學(xué)刊，2011，29(10):2315-2316.

［3］ 曾 婷，賀衛(wèi)和，蔣孟良，等. 不同炮制方法對艾葉止血作用的影響［J］. 湖南中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報，2011，31(5):41-43.

［4］ 王曉東，趙軍寧，張白嘉，等. 藥物致早孕大鼠子宮出血模型的建立［J］. 中國藥理學(xué)通報，1999，15(2):182-184.

［5］ 周友釵，鄒艷芳. 益母草膏在米非司酮配伍米索前列醇終止早孕中的臨床應(yīng)用［J］. 中成藥，2002，24 (8):634-636.

［6］ 樂 杰. 婦產(chǎn)科學(xué)［M］. 北京:人民衛(wèi)生出版社，2003:397-398.

［7］ 李 霞. 益母草堿對藥物致早孕大鼠不完全流產(chǎn)的影響及其部分機(jī)制的研究［D］. 合肥:安徽醫(yī)科大學(xué)，2009.

［8］ 何 佳，李 懿，韋建榮. 宮血寧膠囊HPLC 指紋圖譜研究［J］. 中成藥，2011，33(7):1098-1101.

［9］ 何明生，李 秀. 重樓藥理作用的研究進(jìn)展［J］. 世界中醫(yī)藥，2012，7(6):579-582.

［10］ 朱爽芝. 宮血寧膠囊減少藥物流產(chǎn)后陰道出血254 例療效觀察［J］. 海峽藥學(xué)，2009，21(7):140 ～141.

［11］ 鄧運(yùn)書. 宮血寧膠囊縮短藥流后出血療效觀察［J］. 醫(yī)學(xué)信息，2010，9(2):2298-2299.

［12］ 廖紅云，劉惠瑾. 2475 例宮血寧膠囊治療藥物流產(chǎn)后陰道出血的安全性觀察［J］. 昆明醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2009，30(4):125-128.

［13］ 趙懿清，李 霞. 基于下丘腦-垂體-卵巢軸研究鹽酸益母草堿對藥物流產(chǎn)后子宮異常出血作用機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究［J］.蘇州大學(xué)學(xué)報，2011，31(4):564-568.

［14］ 彭 凱，張學(xué)蘭，王 莉，等. 荷葉不同炮制品提取物對正常大鼠凝血功能影響的比較研究［J］. 中成藥，2013，35(1):140-143.

［15］ 李 嫻，張 麗，丁安偉. 丹皮炭對大鼠血小板功能和纖溶活性的影響［J］. 中草藥，2010，41(2):264-266.