趙儷梅 傅亞均 陳 勇

1.重慶市北部新區(qū)第一人民醫(yī)院婦產(chǎn)科，重慶401121；2.重慶市西南醫(yī)院婦產(chǎn)科，重慶400038

卵巢癌患者血清胸苷激酶1水平及其臨床意義

趙儷梅1傅亞均1陳 勇2

1.重慶市北部新區(qū)第一人民醫(yī)院婦產(chǎn)科，重慶401121；2.重慶市西南醫(yī)院婦產(chǎn)科，重慶400038

目的探討卵巢癌患者血清胸苷激酶1（TK-1）水平及其臨床意義。方法研究2010年3月～2014年6月重慶市北部新區(qū)第一人民醫(yī)院及重慶市西南醫(yī)院就診的初治卵巢癌患者116例（卵巢癌組），選擇同期卵巢良性腫瘤患者54例（卵巢良性腫瘤組）及健康體檢者56例（健康對照組）。記錄三組一般情況、臨床特征等資料，采集血清檢測TK-1及CA125水平。對接受治療患者定期隨訪，觀察無進展生存情況。對影響無進展生存時間的危險因素進行多因素Logistic回歸分析。采用Pearson和Spearman系數(shù)進行各指標間的相關性分析。結(jié)果卵巢癌組患者TK-1［（4.89±1.85）pmol/L］及CA125［（647.08±208.83）pmol/L］水平顯著高于卵巢良性腫瘤組［（0.59±0.23）、（22.71±9.62）pmol/L］及健康對照組［（0.61±0.20）、（22.11±9.94）pmol/L］，且臨床分期越高TK-1水平越高，有遠處轉(zhuǎn)移患者TK-1較無轉(zhuǎn)移更高（均P＜0.01）。血清TK-1與CA125水平及臨床分期呈正相關（r=0.657、0.567，均P＜0.01）。初始高TK-1水平（≥4.00 pmol/L）患者遠期（30個月）無進展生存比率較低TK-1水平（＜4.00 pmol/L）患者更低，差異有統(tǒng)計學意義（P=0.011）。臨床分期、初始CA125及TK-1水平是無進展生存時間的負性影響因素。結(jié)論卵巢癌患者血清TK-1顯著升高，與臨床分期及CA125水平相關。初始高TK-1水平預示預后較差，高臨床分期、初始高CA125及TK-1水平影響治療后無進展生存時間。

卵巢癌；胸苷激酶1；糖類抗原125；預后

卵巢癌是臨床上常見的婦科生殖系統(tǒng)腫瘤，病理類型復雜多樣，早期診斷困難，病死率高。每年全球約有超過22萬女性發(fā)生卵巢癌，美國每年約新增22 500例，病死約14 600例，病死率高達67.7%［1］。卵巢癌早期與晚期預后差異巨大，且早期缺乏典型臨床癥狀及特異性診斷方法，導致大部分患者發(fā)現(xiàn)時已是中晚期。同時，治療后復發(fā)及遠處轉(zhuǎn)移也是導致臨床上患者死亡的最重要原因。糖類抗原125（carbohydrateantigen，CA125）是目前臨床應用最廣，公認的用于卵巢癌患者診斷及預后評價的血清腫瘤學標志物［2］。然而CA125的準確性仍不夠理想，假陽性率較高，臨床上亟需尋找更為準確的指標或聯(lián)合指標來改進對卵巢癌的診斷及預后判斷。人胸苷激酶1（thymidine kinase 1，TK-1）是參予DNA合成的關鍵酶之一，是嘧啶補救合成DNA的關鍵，與腫瘤細胞增殖密切相關［3］。大量的研究顯示，TK-1在多種惡性腫瘤性疾?。ㄈ缒I癌、急性白血病、胃癌、乳腺癌等）中都有過度表達，是重要的臨床診斷及預后指標［4-5］。因此，本研究通過檢測卵巢癌患者血清TK-1并以CA125作為對照，長期隨訪患者，探討TK-1水平差異的臨床意義?，F(xiàn)報道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料

回顧性分析2010年3月～2014年6月重慶市北部新區(qū)第一人民醫(yī)院（以下簡稱“我院”）及重慶市西南醫(yī)院診斷為卵巢癌的初治女性患者116例（卵巢癌組）。卵巢癌患者均經(jīng)由組織活檢病理確診。患者臨床分期及病理分型按照最新的國際婦產(chǎn)科協(xié)會（FIGO）制訂的標準進行［6］。患者的臨床分期情況：Ⅰ期13例（11.2%），Ⅱ期26例（22.4%），Ⅲ期29例（25.0%），Ⅳ期48例（41.4%）。病理分型情況：漿液性囊腺癌70例（60.3%），黏液性囊腺癌21例（18.1%），子宮內(nèi)膜樣癌10例（8.6%），透明細胞癌7例（6.0%），惡性畸胎瘤4例（3.4%）及分類不明型卵巢癌4例（3.4%）。同時納入我院經(jīng)影像或組織活檢確診良性卵巢腫瘤女性患者54例（良性腫瘤組），健康體檢者56例（健康對照組）。良性卵巢腫瘤患者病理分型情況：漿液性囊腺瘤14例（25.9%），黏液性囊腺瘤8例（14.8%）、卵巢巧克力囊腫7例（13.0%），畸胎瘤13例（24.1%）及其他類型卵巢良性腫瘤12例（22.2%）。本研究（病歷資料及標本使用）經(jīng)由我院倫理委員會批準，所有檢測項目在檢測時均向患者進行了告知并知情同意。

1.2 血清TK-1及CA125檢測

良性腫瘤組及健康對照組于就診或體檢時采集靜脈血，卵巢癌組患者于首次住院時采集空腹靜脈血，離心分離血清，凍存于-20℃冰箱備用。血清TK-1的檢測使用人可溶性TK-1酶聯(lián)免疫吸附試劑盒（上海恒斐生物科技有限公司），檢測方法按照試劑盒相關步驟進行（每份血清標本設置2個復孔），使用酶標儀（Scientific Multiskan FC，Thermo公司）進行定量檢測，根據(jù)標準曲線計算單孔TK-1濃度，患者血清TK-1濃度由復孔檢測濃度取平均值。血清CA125測定使用電化學發(fā)光法，使用COBAS6000（羅氏）電化學發(fā)光生化免疫分析儀檢測，試劑為配套試劑。

1.3 患者臨床資料收集及隨訪

初次就診時采集患者一般情況及臨床檢測信息，住院進行B超、CT或病理活檢確定腫瘤臨床分期及病理類型。所有接受治療患者均進行定期門診及電話隨訪，根據(jù)臨床查體、B超、CT、實驗室檢查等方式了解患者治療效果及腫瘤復發(fā)情況，記錄患者失訪情況。無進展生存期定義為患者手術或藥物治療后腫瘤無復發(fā)、增大及遠處（淋巴結(jié)）轉(zhuǎn)移。

1.4 統(tǒng)計學方法

使用SPSS 18.0統(tǒng)計學軟件進行數(shù)據(jù)分析，Graph-Pad Prism 5.0軟件繪圖。符合正態(tài)分布計量資料的均數(shù)用均數(shù)±標準差（x±s）表示，兩組間比較采用t檢驗；不符合正態(tài)分布的改用中位數(shù)或四分位數(shù)間距表示，兩組間比較采用非參數(shù)檢驗（秩和檢驗）；計數(shù)資料用率表示，組間比較采用χ2檢驗；相關性分析采用Pearson和Spearman；生存曲線分析使用Log-rank（Mantel-Cox）檢驗；影響預后因素分析使用多因素Logistic回歸。以P＜0.05表示差異有統(tǒng)計學意義。

表1 三組一般情況及血清TK-1、CA125水平比較（x±s）

2 結(jié)果

2.1 三組一般情況及血清TK-1及CA125水平

各組患者年齡、體重指數(shù)（BMI）、絕經(jīng)情況、吸煙及飲酒情況之間差異無統(tǒng)計學意義，具可比性。卵巢癌組患者血清TK-1水平高于良性腫瘤組及健康對照組，差異有高度統(tǒng)計學意義（均P＜0.01）。卵巢癌組患者血清CA125水平也高于良性腫瘤組及健康對照組。見表1。

2.2 不同臨床資料卵巢癌患者血清TK-1及CA125水平

不同臨床資料卵巢癌患者TK-1及CA125水平結(jié)果為：臨床分期為Ⅳ期時TK-1及CA125最高，不同病理分型中漿液性囊腺癌患者TK-1及CA125最高，有遠處轉(zhuǎn)移患者TK-1及CA125高于無遠處轉(zhuǎn)移者，差異均有高度統(tǒng)計學意義（P＜0.01）。根據(jù)是否已絕經(jīng)、有飲酒史及吸煙史區(qū)分的患者之間TK-1及CA125水平相似，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。見表2。

表2 不同臨床資料卵巢癌患者血清TK-1及CA125水平（pmol/L，x±s）

2.3 血清TK-1與CA125、年齡、臨床分期、BMI的相關性分析

Pearson相關性分析結(jié)果顯示，卵巢癌患者血清TK-1與CA125水平呈顯著正相關（r=0.657，P＜0.01），與年齡并無相關性（r=-0.017，P=0.852）（圖1）。使用Spearman相關性分析顯示，卵巢癌患者血清TK-1水平與臨床分期呈正相關（r=0.567，P＜0.01），與BMI無相關性（r=-0.029，P=0.758）。

2.4 患者治療及隨訪情況

除外18例（15.5%）患者因身體狀況無法耐受手術及化療，其余患者（n=98）均根據(jù)自身情況進行了規(guī)范的手術或藥物化療。同時通過門診及電話進行隨訪，中位隨訪時間為34.17個月（29.12～40.31個月）。根據(jù)治療前初始血清TK-1水平將98例患者分為TK-1＜4.00 pmol/L組（n=43）及TK-1≥4.00 pmol/L組（n=55），隨訪觀察兩組隨時間增加的無進展生存率變化情況。隨訪至40個月時，TK-1＜4.00 pmol/L組失訪4例，失訪率為9.3%（4/43）；TK-1≥4.00 pmol/L組失訪3例，失訪率為4.5%（3/55）。隨訪至40個月時，TK-1＜4.00 pmol/L組患者無進展生存比例為36.43%，TK-1≥4.00 pmol/L組無進展生存比例為24.61%，兩組之間差異有統(tǒng)計學意義（P=0.011）（圖2）。

圖1 TK-1與CA125、年齡的相關性分析

圖2 不同TK-1水平下接受治療的卵巢癌患者無進展生存比率（n=98）

2.5 影響遠期預后的因素分析

接受治療的卵巢癌患者（n=98）在各類因素不同暴露水平下的無進展生存時間及差異，除外臨床分期（P=0.021）、血清TK-1（P=0.001）及CA125（P= 0.006）水平外，其他因素不同水平的無進展生存時間之間差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。以無進展生存時間作為因變量，將血清TK-1（＜4.00 pmol/L為0，≥4.00 pmol/L為1）、CA125水平（＜600.00 pmol/L為0，≥600.00 pmol/L為1），卵巢癌臨床分期（Ⅰ～Ⅱ期為0，Ⅲ～Ⅳ期為1）進行賦值作為協(xié)變量并納入二元Logisitic回歸分析。臨床分期（β=-0.511，OR=0.600，95%CI為0.478～1.029，P=0.048）、初始CA125水平（β=-1.133，OR=3.105，95%CI為1.349～7.142，P= 0.008）、初始TK-1水平（β=-1.504，OR=4.500，95%CI為1.910～10.603，P=0.001）是無進展生存時間的危險因素。見表3。

表3 各影響因素不同暴露水平無進展生存時間

3 討論

TK-1是一類在細胞周期循環(huán)中發(fā)揮重要作用的蛋白，正常生理狀態(tài)下，TK-1主要表達于成人的高增殖細胞（再生的肝組織）或胎兒組織（骨髓、脂肪組織）中。TK-1的分子量約為25 kD，在血液循環(huán)中主要以四聚體形式存在，而且在低溫環(huán)境下活性及濃度十分穩(wěn)定（超過5年）［7］。人TK-1組要參予調(diào)控細胞周期中的S期（DNA合成期），與細胞分類增殖密切相關，其生物學功能的發(fā)揮也主要依靠四聚體的重構(gòu)來實現(xiàn)［8］。隨著對TK-1的深入研究發(fā)現(xiàn)，在多種惡性腫瘤疾病中，病灶組織及循環(huán)中的TK-1表達可出現(xiàn)顯著升高（甚至達到生理水平的2～100倍）［9］。現(xiàn)有的關于TK-1的研究主要集中在腎癌、乳腺癌、胃癌及非小細胞肺癌等，這些腫瘤一般是存在高速惡性增生的實體腫瘤，細胞DNA合成旺盛［10-11］。

大量的研究證明了TK-1在多種實體腫瘤中存在差異性表達，有重要的診斷價值［4］。如在Li等［12］針對非小細胞肺癌患者（n=250）的研究中，腫瘤患者血清中TK-1水平顯著高于正常對照組，而且升高水平與癌癥分期相關，轉(zhuǎn)移組也顯著高于未轉(zhuǎn)移組。Chen等［13］開展的大規(guī)模篩查研究中（n=35 365）發(fā)現(xiàn)，不同的血清TK-1水平可以反映腫瘤的大小、分期及是否轉(zhuǎn)移情況，而且TK-1的降低提示了抗腫瘤治療的效果。血清TK-1作為可靠的無創(chuàng)性指標，對多種惡性腫瘤有著早期預測及診斷的重要價值。然而，針對卵巢癌患者TK-1表達情況的研究相對較少。在本研究中發(fā)現(xiàn)，卵巢癌患者血清TK-1水平是顯著高于良性腫瘤患者及健康對照，而且是否有遠處轉(zhuǎn)移及不同的臨床分期患者之間的TK-1水平有著明顯的差別（Ⅳ期及有遠處轉(zhuǎn)移患者TK-1水平顯著升高），但不同病理分型患者之間差異并不顯著。同時，CA125是臨床上應用最廣泛的卵巢癌診斷預后血清學指標，其特異性及靈敏度都得到了大量臨床數(shù)據(jù)的驗證。本研究使用CA125作為對照觀察血清TK-1水平與卵巢癌臨床分期及預后的關系，結(jié)果顯示卵巢癌患者血清TK-1與CA125呈顯著正相關（r=0.657，P＜0.01），也為尋找與CA125聯(lián)合來診斷及判斷預后的指標提供了參考。因此，血清TK-1可用于作為卵巢癌的無創(chuàng)血清學診斷指標，其水平的高低可以反映卵巢癌的臨床分期及轉(zhuǎn)移情況。

卵巢癌易出現(xiàn)復發(fā)及遠處轉(zhuǎn)移，這也是導致患者病死的最重要原因。臨床上一直在尋找優(yōu)良的無創(chuàng)預后判斷指標來更好的指導臨床治療及評估預后［14］。本研究通過對患者遠期隨訪觀察，探討了不同血清TK-1水平患者的遠期預后及相關危險因素。根據(jù)初始KT-1水平高低分組的隨訪顯示，中遠期（30～40個月）高TK-1組患者無進展生存比率較低TK-1組更低，預后更差。其中影響患者無進展生存時間的危險因素主要是臨床分期、初始CA125及TK-1水平（均P＜0.01）。而患者的年齡、BMI、是否吸煙飲酒及病理類型并不是影響無進展生存比率的危險因素。值得一提的是，有研究顯示漿液性卵巢癌的預后就其他病理類型更差［15］，但在本次研究中并未顯示出相似結(jié)果?？赡苁且驗楸狙芯繉儆诨仡櫺匝芯?，無法均等納入各類型腫瘤（包含不同階段臨床分期），造成了選擇性偏倚。并且TK-1作為反映細胞惡性增生的指標，更與腫瘤組織的大小、增生程度及遠處轉(zhuǎn)移相關，用作區(qū)分與預后相關的腫瘤病理類型反而不夠準確［16］。

本研究檢測了卵巢癌患者血清TK-1水平，研究了TK-1與患者臨床特征的相關性，并通過長期隨訪研究，分析了TK-1與患者預后的關系及相關危險因素。TK-1作為近年研究關注的一類腫瘤標志物，其在卵巢癌患者的診斷及預后中都顯示出了重要的價值，TK-1水平與臨床分期及CA125水平有著良好的相關性，高TK-1也是影響遠期預后的重要危險因素。然而本研究也存在樣本量較少，納入患者存在一定偏倚的不足，在后續(xù)的研究中還需對TK-1與卵巢癌的關系進行深入探討，為更準確的臨床診斷及預后提供參考。

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Clinical significance of serum Thymidine Kinase1 in ovarian cancer

ZHAO Limei1FU Yajun1CHEN Yong2
1.Department of Obstetrics and Gynecology,the First People's Hospital of Chongqing New North Zone,Chongqing 401121,China;2.Department of Obstetrics and Gynecology,Southwest Hospital of Chongqing City,Chongqing400038, China

ObjectiveTo investigate the serum thymidine kinase 1(TK-1)level and its clinical significance of patients with primaryovarian cancer.MethodsThe research included 116 patients with ovarian cancer(ovarian cancer group) from March 2010 to June 2014 in the First People's Hospital of Chong Qing New North Zone and Southwest Hospital of Chongqing,while the 54 patients with ovarian benign tumor(ovarian benign tumor group)and 56 cases of healthy control(healthy controls group)were selected.The general situation,clinical manifestations of three groups were recorded and levels of serum TK-1 and CA125 were detected.Patients with treatment were followed up regularly,and the risk factors of progression-free survival time were analyzed with Logistic regression.The correlation between the indexes were analyzed by Pearson and Spearman coefficient.ResultsThe levels of TK-1［(4.89±1.85)pmol/L］and CA125［(647.08±208.83)pmol/L］of patients in the ovarian cancer group were significantly higher than those in the ovarian benign tumor group［(0.59±0.23),(22.71±9.62)pmol/L］and healthy control group［(0.61±0.20),(22.11±9.94)pmol/L］.The TK-1 levels were higher in patients with advanced clinical stageor and distant metastasis than others(all P＜0.01).The level of TK-1 was significant positive correlation with CA125 level and clinical stage(r=0.657,0.567,all P＜0.001). The long-term(about 30 months)progression-free survival rate of patients with initial high level of TK-1(≥4.00 pmol/L) was lower than that of the low level(＜4.00 pmol/L),the difference was statistically significant(P=0.011).Clinical stage,initial levels of CA125 and TK-1 were negative risk factors of progression-free survival time.ConclusionThere is significant increase of serum TK-1 level in ovarian cancer patients,and it is related to the CA125 level and clinical stage.Initial high TK-1 level predicts poor prognosis.Advanced clinical stage,the initial high level of CA125 and TK-1 affect progression-free survival time after treatment.

Ovarian cancer;Thymidine kinase 1;Carbohydrate antigen 125;Prognosis

R737.31

A

1673-7210（2015)02（b)-0039-05

2014-11-14本文編輯：任念）

傅亞均（1976.3-），女，副主任醫(yī)師；研究方向：婦科惡性腫瘤性疾病的臨床治療。