金伶佳 賈天柱

雞內(nèi)金的不同炮制品中多糖含量比較※

金伶佳 賈天柱*

（遼寧省大連市衛(wèi)生計生培訓中心，大連1 1 6021）

目的對雞內(nèi)金中的多糖測定方法進行研究，比較不同炮制品中多糖含量。方法通過苯酚-硫酸比色法對雞內(nèi)金不同炮制中的多糖含量結(jié)果進行了分析比較。結(jié)果雞內(nèi)金不同炮制品總多糖含量，砂燙雞內(nèi)金＞生品雞內(nèi)金＞微波雞內(nèi)金。結(jié)論生品雞內(nèi)金經(jīng)炮制后的砂燙炮制品中的總多糖含量要比生品及微波炮制品都高。

雞內(nèi)金；多糖；苯酚-硫酸比色法；中藥炮制

雞內(nèi)金為雉科（Phasianidae）家禽多種雞Gallus-gallusdomesticus Brisson的干燥胃內(nèi)壁皮層，是一常用中藥。臨床上主要用于治療消化不良、小兒遺尿等。據(jù)有關報道，雞內(nèi)金中含有多糖，雞內(nèi)金提取物與堿性酒石酸銅試液反應，顯藍紫色；與濃硫酸和蒽酮反應，溶液呈藍綠色。說明提取物中含多糖。現(xiàn)就針對雞內(nèi)金中含有多糖，進行含量測定，討論不同炮制品中的多糖含量，并比較它們之間的變化。

1 實驗部分

1.1 儀器與材料

1.1.1 儀器UV-3000紫外-可見分光光度計（日本島津）；型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器（上海亞榮生化儀器廠）；800型離心沉淀器（上海手術(shù)器械廠）；KW-200B型高速藥物粉碎機（天津泰斯特儀器廠）。

1.1.2 試劑雞內(nèi)金（購于遼寧省大連市瓦房店連城食品有限公司），乙醇、硫酸等試劑均為分析純，苯酚（AR.重蒸后使用），實驗用水為蒸餾水。

1.1.3 樣品制備生品雞內(nèi)金：雞內(nèi)金（購于遼寧省大連市瓦房店連城食品有限公司），按05版藥典鑒定為雉科動物家雞（Gallus gallus domesticus Brisson）的砂囊內(nèi)壁。

砂燙品：取雞內(nèi)金生品30 g，向鍋內(nèi)加入砂量1200 G，在鍋底溫度為210℃時，分別炒制60 S后出鍋，放涼，取生品雞內(nèi)金15 g，粉碎，過40目篩，加到至圓底燒瓶內(nèi)，再加入100 FL蒸餾水，在溫度90℃，回流，2 H后取出，放涼，用抽濾器過濾，后定容到100 FL容量瓶中，備用。

微波品：先將藥材雞內(nèi)金30 G凈選，揀去雜質(zhì)，然后置于不銹鋼托盤上（不用大小分檔），均勻攤開，厚度2～3 cm。然后將微波爐的溫度定位于高火檔當溫度指針升至規(guī)定的溫度時，把攤好雞內(nèi)金的不銹鋼托盤置于烤箱中，1.5 FIN即可關掉電源，取出不銹鋼托盤。此時雞內(nèi)金已呈黃白色至焦黃色并鼓起，具有焦香氣。

1.4 雞內(nèi)金樣品處理精密稱定雞內(nèi)金三種樣品各1 g，置10 ml具容試管中，加純凈水至5 ml，放到振搖器中，振搖10分鐘，使其藥物與溶液充分混合，然后將其具容試管于可調(diào)節(jié)溫度的電熱爐上加熱，加速反應10分鐘，取出，離心20分鐘，取出，取其三種樣品的上清液，加入一定量的蛋白質(zhì)降解劑，搖勻，加入冰袋，放置冰箱，備用。

2 方法與結(jié)果

2.1 苯酚試液的配制使用精密天枰稱取苯酚10 mL，加水190 ml溶解后，置于棕色試劑瓶中，得5%苯酚液，備用。

2.2 標準曲線的制備吸取1000 mg/L葡萄糖溶液2 mL，4 mL，6 mL，8 mL，10 mL置于50 mL容量瓶定容至50 mL。精密吸取該溶液各2 ml，分別置于具塞刻度試管中，分別加入1 ml苯酚溶液，搖勻，加98%濃硫酸5.0 mL，搖勻，放置5分鐘，置70℃水浴鍋中保溫10分鐘。取出后迅速冷卻至室溫。在490 nm波長處測定吸收度，以體積為橫坐標，以吸收度為縱坐標，將上述數(shù)據(jù)作回歸方程：Y=1.005X，r=0.9993。結(jié)果見表1。

表1 雞內(nèi)金在不同多糖加入量下的蛋白質(zhì)含量

2.3 穩(wěn)定性試驗采用苯酚-硫酸法測定，1 h之內(nèi)雞內(nèi)金同一樣品液吸收度值無明顯變化，RSD= 2.798424%，實驗結(jié)果說明此實驗條件下樣品顯色穩(wěn)定性較好。

2.4 精密度試驗采用苯酚-硫酸法測定，雞內(nèi)金1 mL同一樣品液在490 nm處吸收度測定，RSD= 2.798424%，實驗結(jié)果說明此實驗條件下樣品精密度較好。

2.5 重復性試驗采用苯酚-硫酸法測定，10份1 mL雞內(nèi)金同一樣品液在490 nm處吸收度測定，RSD=0.277315%。實驗結(jié)果說明此實驗條件下樣品重復性較好。

2.6 加樣回收率試驗采用10份1 mL雞內(nèi)金同一樣品液，分別加入葡萄糖標準液0.01 mL，按照上述方法進行測定，測得加樣回收率為102.04%（n=6）。實驗結(jié)果說明此實驗條件下樣品回收率高。

2.7 雞內(nèi)金不同炮制品總多糖含量測定采用雞內(nèi)金不同炮制品提取液各1.00 mL，按標準曲線項下方法操作測定總多糖含量。結(jié)果見表2。

表2 雞內(nèi)金不同炮制品中總多糖含量測定

3 結(jié)論

苯酚-硫酸比色法測定多糖含量，是根據(jù)多糖在硫酸的作用下先水解成單糖分子，并迅速脫水生成糖醛衍生物，然后和苯酚作用生成橙黃色的化合物，再以比色法測定，在測定多糖含量時。以葡萄糖等單糖作為標準品，測定結(jié)果也是以單糖表示多糖的含量。該方法操作簡單，快捷，可以客觀考察藥物中總多糖含量的變化。為總糖分測定提供一定的科學依據(jù)。雞內(nèi)金不同炮制品中的總多糖含量測定的結(jié)果顯示不同炮制品中的總多糖含量存在一定的差異；有上述圖表所知：雞內(nèi)金不同炮制品總多糖含量，砂燙雞內(nèi)金＞生品雞內(nèi)金＞微波雞內(nèi)金；從結(jié)果可見，生品雞內(nèi)金經(jīng)炮制后的砂燙炮制品中的總多糖含量要比生品及微波炮制品都高。在一定程度上可以說明：經(jīng)砂燙炮制后，雞內(nèi)金中的總多糖含量增加。這也可為下一步的藥效學研究提供一定的研究基礎。

[1]丁鋼強，于村，張雙鳳．食品多糖含量不同測定方法的研究[J]．實用預防醫(yī)學雜志，2000，10(7)：325．

[2]X H波欽諾克．植物生物化學分析方法[M]．北京：科學出版社，1981：1218．

[3]中山大學生物系生化微生物學教研室．生化技術(shù)導論[M]．北京：人民教育出版社，1978：153．

[4]張興國，喬立新．雞內(nèi)金炮制方法的改進[J]．時珍國醫(yī)國藥，2003，14（9）：27-45．

[5]姜英，吳炳章．雞內(nèi)金宜土法炮制探討[J]．海峽藥學，1997，9（4）：133．

[6]余昭群．雞內(nèi)金炒制用輔料的改進[J]．小經(jīng)驗，1998，20（3）：49．

[7]國家藥典委員會．中華人民共和國藥典（一部）[M]．北京：化學工業(yè)出版社，2006：133．

[8]李金柱，劉鳳芹．雞內(nèi)金炮制經(jīng)驗漫談[J]．湖南中醫(yī)藥導報，2001，7(8)：426．

[9]黃開顏，曹麗冰．雞內(nèi)金砂燙與微波處理的比較[J]．中藥材，2002，25(7)：475-476．

[10]南云生，楊玉萍，朱序莉．雞內(nèi)金不同炮制品的質(zhì)量比較[J]．中藥材，1990，13(1)：25．

[11]孫毅．制備雞內(nèi)金3種炮制品的體會[J]．中國中藥雜志，2001，26(9)：642．

[12]趙漢然．砂炒雞內(nèi)金的方法探討[J]．新疆中醫(yī)藥，2002，20(3)：55-56．

[13]張永清，南云生．雞內(nèi)金炮制歷史沿革初探[J]．中成藥，1992，14(11)：22．

[14]李建成，牛云航．從雞內(nèi)金的炮制看分檔炒炙的重要性[J]．黑龍江醫(yī)藥，2005，18(2)：55．

JIN Lingjia, JIA Tianzhu(Health Family Planning Training Center, Liaoning Province, Dalian 116021, China)

ObjectiveTo study the determination method ofpolysaccharide of inner membrane of chicken gizzard，and to compare polysaccharide content in different processed products.MethodsThe polysaccharide content in different processed products of inner membrane of chicken gizzard was analyzed and compared by phenol-sulfuric acid colorimetry.ResultsThe total polysaccharide content of different processed products of inner membrane of chicken gizzard of heated with sand was more than raw products which was more than microwave processed products.ConclusionThe total polysaccharide content of sand hot processed products was more than raw product and microwave processed products.

inner membrane of chicken gizzard；polysaccharide；phenol-sulfuric acid colorimetry；processing

10.3969/j.issn.1672-2779.2015.20.076

1672-2779（2015）-20-0146-02

：楊杰本文校對：賈天柱

2015-08-13）

國家“十一五”科技支撐課題（No：2010ZX 09401-105A）

*通訊作者：jinlingjia19841003@126．com