楊舒惠，李德堂，楊建萍

（云南金雨莊生物科技有限責(zé)任公司；昆明欣尚科技開(kāi)發(fā)有限公司，云南 昆明 650000）

隨著我國(guó)食用菌產(chǎn)業(yè)的不斷壯大，規(guī)模化、規(guī)范化、標(biāo)準(zhǔn)化的企業(yè)和栽培基地不斷增多，對(duì)低成本、低風(fēng)險(xiǎn)、規(guī)?；a(chǎn)菌種的需求日趨明顯。然而，目前常規(guī)的液體菌種的生產(chǎn)及培養(yǎng)工藝存在很多的缺陷：常規(guī)液體菌種的生產(chǎn)需要培養(yǎng)罐、磁力攪拌器、搖床等設(shè)備，設(shè)備多，造價(jià)高，且不易推廣；尤其是菌種從一級(jí)種到三級(jí)種，要用同樣的方法擴(kuò)繁3 次，菌種感染的風(fēng)險(xiǎn)很大；同時(shí)，整個(gè)液體菌種的生產(chǎn)周期長(zhǎng)，需要40 天，而生產(chǎn)周期長(zhǎng)、浪費(fèi)大量的人力和能源。因此，本文就食用菌液體菌種規(guī)?；?、低成本、低污染的核心問(wèn)題進(jìn)行初步的研究試驗(yàn)，以找到一個(gè)能規(guī)模化、低成本、低污染培養(yǎng)液體菌種的裝置和有效方法。

1 試驗(yàn)材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料及裝置

企業(yè)自主研制的一種多功能液體菌種培養(yǎng)裝置，整套裝置由不銹鋼恒溫培養(yǎng)箱、空氣過(guò)濾器、空氣導(dǎo)管、玻璃培養(yǎng)皿等配件組成。

1.1.1 試驗(yàn)菌株

平菇菌株1 個(gè)，香菇菌株1 個(gè)，黑木耳菌株1 個(gè)，共3 個(gè)。

1.1.2 培養(yǎng)基

3 個(gè)菌株采用統(tǒng)一配方：用木屑85%、麩皮14%、石膏0.5%、糖0.5%等制成。

1.2 試驗(yàn)方法

以香菇液體菌種的培養(yǎng)方法為例。

1）用優(yōu)良的香菇一級(jí)母種，接種到經(jīng)過(guò)高溫滅菌的專(zhuān)用培養(yǎng)基里，環(huán)境溫度控制在25℃進(jìn)行菌種培養(yǎng)。28 天后香菇菌絲布滿(mǎn)整個(gè)培養(yǎng)基，專(zhuān)用菌種制成。專(zhuān)用菌種培養(yǎng)基制作的配方：用木屑85%、麩皮14%、石膏0.5%、糖0.5%等制成。

2）制作液體菌種PDA 培養(yǎng)（營(yíng)養(yǎng)）液，其做法是先洗凈去皮，再稱(chēng)取300g 馬鈴薯切成小塊，加水煮爛（煮沸20～30 分鐘，能被玻璃棒戳破即 可），用4 層紗布過(guò)濾，加熱，再據(jù)實(shí)際實(shí)驗(yàn)需要加瓊脂，繼續(xù)加熱攪拌混勻，待瓊脂融完后，加入葡萄糖，攪拌均勻，稍冷卻后再補(bǔ)足水分至1000mL，分裝到營(yíng)養(yǎng)液保鮮袋內(nèi)，121℃滅菌20 分鐘后取出，冷卻后貯存?zhèn)溆谩?/p>

3）啟用水浴培養(yǎng)箱，在玻璃球型培養(yǎng)罐內(nèi)放入液體菌種球型培養(yǎng)袋，將液體菌種PDA 培養(yǎng)液與香菇專(zhuān)用菌種注入球型培養(yǎng)袋后，用硅膠瓶塞密封。啟動(dòng)整個(gè)玻璃培養(yǎng)罐的供氧系統(tǒng)，保證培養(yǎng)的液體菌種的氧氣需求量。同時(shí)給水浴培養(yǎng)箱加水，并調(diào)節(jié)水溫自動(dòng)控制器，使水溫保持25℃。經(jīng)過(guò)72 小時(shí)（3天）的培養(yǎng)，培養(yǎng)罐里的香菇液體菌種制成。

1.3 試驗(yàn)測(cè)定

新型食用菌液體菌種低成本規(guī)?；a(chǎn)工藝及設(shè)施包括：

1）采用分體組合方式連接玻璃球型培養(yǎng)罐，并制成一個(gè)水浴式培養(yǎng)箱。利用供氧系統(tǒng)的多頭供氧軟管連接玻璃球型培養(yǎng)罐，每罐設(shè)一個(gè)接種點(diǎn)，形成一組多點(diǎn)接種裝置；

2）多品種的液體菌種在同一個(gè)生產(chǎn)工藝中進(jìn)行培養(yǎng)：使用此設(shè)施，一次可以同時(shí)培養(yǎng)2 種以上的液體菌種，并且是一次性完成制種工藝。

2 結(jié)果與分析

在整個(gè)試驗(yàn)過(guò)程中，分別按照菌種活力、產(chǎn)量、培養(yǎng)時(shí)間、菌種污染率、培養(yǎng)過(guò)程5 個(gè)指標(biāo)進(jìn)行比對(duì)試驗(yàn)，結(jié)果如下，

從表1 可知，液體菌種培養(yǎng)，最大限度地滿(mǎn)足了菌體對(duì)營(yíng)養(yǎng)、溫度、氧氣、酸堿度等環(huán)境的生長(zhǎng)需求，而且呼吸作用產(chǎn)生的代謝廢氣能及時(shí)排除，新陳代謝旺盛，菌球密度所有菌球菌齡基本一致，因此菌絲活力強(qiáng)。

從表2 可知，固體菌種從一級(jí)種到三級(jí)種，要用同樣的方法擴(kuò)繁3 次，整個(gè)菌種培養(yǎng)的生產(chǎn)周期長(zhǎng)，需要40 天時(shí)間。而液體菌種培養(yǎng)的菌領(lǐng)整齊，生理成熟期短，轉(zhuǎn)潮快，生物轉(zhuǎn)化率等指標(biāo)要優(yōu)于固體菌種。

從表3 可知，液體菌種的菌種定植時(shí)間短，菌棒養(yǎng)菌時(shí)間只是固體菌種的2/3，菇潮間隔期短，從接種到采收結(jié)束比固體菌種縮短了50 天，最終食用菌的整個(gè)生產(chǎn)周期比固體菌種接種的生產(chǎn)周期提前了50 天。

從表4 可知，可以同時(shí)培養(yǎng)多品種的液體菌種，一次性完成制種，有效降低液體菌種感染的風(fēng)險(xiǎn)，同時(shí)，本實(shí)用新型擁有多個(gè)接種點(diǎn)，提高接種速度和效率，并且菌種的整體抗雜菌的優(yōu)勢(shì)比較強(qiáng)。

通過(guò)試驗(yàn)證明，液體菌種的應(yīng)用在各方面的指標(biāo)均優(yōu)于固體菌種使用。

3 結(jié)論與討論

試驗(yàn)結(jié)果表明，液體菌種的應(yīng)用在各方面的指標(biāo)均優(yōu)于固體菌種的使用，有著極大的應(yīng)用前景。而且，新研制的裝置一次性完成制種，培養(yǎng)周期短，能有效保證菌種的質(zhì)量和純度，可以最大限度地滿(mǎn)足菌體對(duì)營(yíng)養(yǎng)、溫度、氧氣、酸堿度等環(huán)境的生長(zhǎng)需求，而且呼吸作用產(chǎn)生的代謝廢氣能及時(shí)排除，新陳代謝旺盛，菌球密度所有菌球菌齡基本一致，因此菌絲活力強(qiáng)。裝置不用搖床和振蕩器，減少了培養(yǎng)次數(shù)，縮短了培養(yǎng)時(shí)間，降低了污染率，較大的降低了菌種和栽培管理的生產(chǎn)成本，同時(shí)，其制作工藝簡(jiǎn)單、培養(yǎng)效率高，感染率低，可以批量生產(chǎn)，實(shí)用性強(qiáng)。裝置還可以用于多品種的液體菌種在同一個(gè)生產(chǎn)工藝中進(jìn)行培養(yǎng)，同時(shí)，裝置擁有多個(gè)接種點(diǎn)，可以提高接種速度和效率，裝置成本低、風(fēng)險(xiǎn)小，結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，操作方便，能有效滿(mǎn)足規(guī)?；a(chǎn)菌種的需求。

表1 菌種活力對(duì)比情況分析

表2 產(chǎn)量對(duì)比情況分析

表3 培養(yǎng)時(shí)間對(duì)比情況 單位：天

表4 菌種培養(yǎng)污染率對(duì)比情況

表5 培養(yǎng)過(guò)程對(duì)比情況

多功能液體菌種培養(yǎng)裝置研制及液體菌種培養(yǎng)工藝，屬于菌種培育技術(shù)領(lǐng)域，還處于初步的研制階段，很多方面還需要完善和提升。鑒于液體菌種在食用菌產(chǎn)業(yè)的推廣應(yīng)用前景，希望業(yè)內(nèi)人士群策群力進(jìn)一步深入研究?！?/p>