劉少華/濱州醫(yī)學(xué)院人文學(xué)院

西紅花苷對(duì)運(yùn)動(dòng)性疲勞小鼠MDA含量和SOD活性的影響

劉少華/濱州醫(yī)學(xué)院人文學(xué)院

目的 研究西紅花苷對(duì)運(yùn)動(dòng)性疲勞小鼠的保護(hù)作用，闡明西紅花苷抗運(yùn)動(dòng)性疲勞的作用。方法 復(fù)制小鼠力竭游泳模型，并測(cè)定應(yīng)用西紅花苷后小鼠達(dá)到力竭所需的時(shí)間以及MDA、SOD等指標(biāo)。結(jié)果 西紅花苷能明顯提高小鼠游泳到達(dá)力竭的時(shí)間，提高小鼠骨骼肌和肝臟SOD活性，骨骼肌和肝臟MDA含量等指標(biāo)。結(jié)論 應(yīng)用西紅花苷有利于延長(zhǎng)游泳至力竭的時(shí)間，增強(qiáng)SOD活性，降低MDA含量，增強(qiáng)小鼠的抗氧化能力，維持細(xì)胞的正常生理功能。

西紅花苷；運(yùn)動(dòng)性疲勞；力竭游泳

西紅花苷是一類從梔子和西紅花中提取的特殊的水溶性胡蘿卜素。學(xué)者們研究發(fā)現(xiàn)，西紅花苷有廣泛的藥理活性，如其可保護(hù)心腦血管、殺滅腫瘤細(xì)胞、保護(hù)神經(jīng)細(xì)胞和保肝作用。運(yùn)動(dòng)性疲勞是一直是體育學(xué)界和醫(yī)學(xué)界研究的熱點(diǎn)。本實(shí)驗(yàn)利用小鼠力竭游泳模型，研究給小鼠補(bǔ)充西紅花苷是否影響小鼠的運(yùn)動(dòng)能力，從抗氧化角度來探討西紅花苷抗運(yùn)動(dòng)性疲勞作用，為研發(fā)西紅花苷成為運(yùn)動(dòng)補(bǔ)劑提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1．材料和方法

1.1主要試劑和儀器

西紅花苷由濱州醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院藥物研究所提供,純度≧98％。MDA測(cè)定試劑盒及SOD測(cè)定試劑盒購(gòu)于南京建成生物工程有限公司。L － 550臺(tái)式低速離心機(jī)(長(zhǎng)沙湘儀離心機(jī)儀器有限公司)，Sartorius BT 25s電子天平(賽多利斯科學(xué)儀器(北京)有限公司)，80－2臺(tái)式低速離心機(jī)(山海醫(yī)療器械(集團(tuán))有限公司手術(shù)器械廠);WFZUV－2000 型紫外可見分光光度計(jì)(尤尼柯(上海)儀器有限公司);秒表;溫度計(jì);灌胃針頭，手術(shù)器械。

1.2方法

1.2.1動(dòng)物分組和給藥。健康雄性昆明種小鼠,體質(zhì)量 (22± 2) g,由濱州醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)SPF級(jí)動(dòng)物中心提供。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中常規(guī)分籠飼養(yǎng),每籠12只,自由飲水、進(jìn)食。實(shí)驗(yàn)前稱小鼠體重,隨機(jī)分為六組,每組12只,分別為安靜組、力竭游泳組、藥物10、15、20mg/kg組。 藥物組分別用10、15、20mg/kg的西紅花苷灌胃，每日1次,安靜組和力竭游泳組小鼠給以等量的生理鹽水,實(shí)驗(yàn)周期為4周。

1.2.2實(shí)驗(yàn)方法。于末次給藥30min后,力竭游泳組及藥物藥物10、15、20mg/kg組進(jìn)行負(fù)重游泳：在距離小鼠尾根部1～ 2cm處,負(fù)重5％體質(zhì)量的鉛皮,置入水溫30±2℃、水深25cm的游泳槽中游泳,記錄小鼠自游泳開始至力竭的時(shí)間。力竭判斷標(biāo)準(zhǔn)∶小鼠沉入水中超過10s,且在平地時(shí)翻正反射消失。

1.2.3標(biāo)本收集和測(cè)定。在負(fù)重游泳后,斷頭處死小鼠,取部分肝、骨骼肌,置入組織勻漿器中研磨后取上層清液，按照試劑盒說明書測(cè)定SOD、MDA指標(biāo)。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 13.0軟件,進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。所有數(shù)據(jù)均以x±s表示,組間比較用方差分析。P≤ 0.05為差異有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.結(jié)果

2.1小鼠力竭游泳時(shí)間 灌胃給藥4周后,進(jìn)行力竭游泳實(shí)驗(yàn),不同劑量西紅花苷對(duì)小鼠力竭游泳時(shí)間的影響見表1。藥物10、15、20mg/kg組與力竭游泳組相比,小鼠力竭游泳時(shí)間均延長(zhǎng)。其中15mg/kg藥物組力竭游泳時(shí)間明顯延長(zhǎng)，與安靜組相比，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜ 0.05)。

表1 西紅花苷對(duì)小鼠力竭游泳時(shí)間的影響

2.2西紅花苷對(duì)小鼠肝、骨骼肌MDA水平的影響 進(jìn)行力竭游泳實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，立即處死小鼠，取肝臟和骨骼肌，加一定比例的稀釋液研磨后，測(cè)定上層細(xì)胞清液中MDA水平，結(jié)果見表2。與安靜組相比，力竭游泳組小鼠肝臟和骨骼肌MDA水平均升高，其差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05)，而西紅花苷則降低力竭運(yùn)動(dòng)所致MDA升高，其差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p＜0.05）。

表2 西紅花苷對(duì)小鼠肝、骨骼肌MDA水平的影響

2.3西紅花苷對(duì)小鼠肝、骨骼肌SOD活性的影響 取肝臟和骨骼肌組織研磨后的上清后測(cè)定上清液中SOD活性，結(jié)果見表3。與安靜組相比，力竭游泳組小鼠肝臟和骨骼肌SOD活性降低，其差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p＜0.05），與力竭游泳組相比，西紅花苷藥物組小鼠肝臟和骨骼肌SOD活性升高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

表3 西紅花苷對(duì)小鼠肝、骨骼肌SOD活性的影響

討論

學(xué)者們研究發(fā)現(xiàn)，運(yùn)動(dòng)疲勞的發(fā)生與體內(nèi)自由基異常增多直接相關(guān)[1]。力竭運(yùn)動(dòng)時(shí)，由于局部耗氧量增多、能量消耗增加、肌骨骼肌細(xì)胞線粒體負(fù)荷加重等因素導(dǎo)致機(jī)體內(nèi)的酶系統(tǒng)和非酶系統(tǒng)產(chǎn)生大量自由基。異常增多的自由基觸發(fā)脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，形成的脂質(zhì)過氧化物經(jīng)代謝后產(chǎn)生 MDA，MDA與骨骼肌、心臟、肝臟等組織器官內(nèi)的蛋白質(zhì)、核酸等發(fā)生交聯(lián)形成希夫式堿，進(jìn)而使細(xì)胞的流動(dòng)性和滲透性發(fā)生改變，細(xì)胞膜的正常結(jié)構(gòu)破壞，細(xì)胞功能喪失，細(xì)胞內(nèi)環(huán)境異常而影響細(xì)胞功能，產(chǎn)生疲勞[2]。因此，MDA反映機(jī)體自由基產(chǎn)生的水平和體內(nèi)脂質(zhì)過氧 化的情況，同時(shí)也是體內(nèi)脂質(zhì)損傷的重要指標(biāo)。本實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，與力竭游泳組相比，西紅花苷組肝臟和骨骼肌MDA活性降低（p＜0.05），SOD活性升高（p＜0.05），說明西紅花苷具有清除自由基的作用，對(duì)自由基過多造成的肝臟、腎臟的損害具有保護(hù)作用。

總之，西紅花苷具有抗運(yùn)動(dòng)性疲勞作用，其作用機(jī)制與降低血、肝和骨骼肌細(xì)胞中MDA含量，增強(qiáng)血、肝和骨骼肌細(xì)胞中SOD活性有關(guān)。

∶

[1] Ortenblad N,Sjogaard G,Madsen K.Impaired sarcoplasmic reticulum Ca2+release rate after fatiguing stimulation in rat skeletal muscle[J].Appl Physiol,2000,89(1)∶2210-217.

[2] 苑偉，李士博，馬迎春，等．紅景天納米粉對(duì)小鼠抗缺氧和抗疲勞作用的實(shí)驗(yàn)研究[J]．西 北 藥 學(xué) 雜 志，2011，26(3)：122-123.