周 恬，楊海松

(貴州醫(yī)科大學(xué)臨床醫(yī)學(xué)院乳腺外科，貴陽(yáng) 550004)

·經(jīng)驗(yàn)交流·

新輔助化療對(duì)含基底細(xì)胞樣型乳腺癌中TOPOⅡa及PS2表達(dá)的影響及臨床意義*

周 恬，楊海松

(貴州醫(yī)科大學(xué)臨床醫(yī)學(xué)院乳腺外科，貴陽(yáng) 550004)

目的 新輔助化療對(duì)含基底細(xì)胞樣型乳腺癌(BLBC)中拓?fù)洚悩?gòu)酶-α(TOPOⅡα)、雌激素調(diào)節(jié)蛋白(PS2)表達(dá)的影響及臨床意義。方法選取2011年3月至2014年10月該院確診的BLBC患者124例，采用免疫組織化學(xué)法檢測(cè)所有患者化療前后組織中TOPOⅡα、PS2的表達(dá)，對(duì)所有患者隨訪5年，統(tǒng)計(jì)分析其與新輔助化療療效及預(yù)后的關(guān)系。結(jié)果化療后，TOPOⅡα、PS2陽(yáng)性表達(dá)患者有效率明顯高于陰性表達(dá)患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；TOPOⅡα表達(dá)由陽(yáng)性轉(zhuǎn)陰性患者有效率最高，由陰性轉(zhuǎn)陽(yáng)性患者有效率最低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；在化療后3年內(nèi)，TOPOⅡα、PS2陽(yáng)性表達(dá)患者總生存率明顯高于陰性表達(dá)患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)論BLBC患者新輔助化療后可導(dǎo)致組織中TOPOⅡα、PS2的表達(dá)發(fā)生改變，TOPOⅡα、PS2的表達(dá)變化可作為預(yù)測(cè)療效、生存預(yù)后的重要指標(biāo)。

新輔助化療；基底細(xì)胞樣型乳腺腫瘤；拓?fù)洚悩?gòu)酶-α；雌激素調(diào)節(jié)蛋白

乳腺癌是最常見(jiàn)的婦科惡性腫瘤之一，基底細(xì)胞樣型乳腺癌(basal-like breast car-cinomas，BLBC)是乳腺癌的一種亞型，其臨床治療、預(yù)后水平較其他亞型差[1]。乳腺由皮膚、纖維組織、乳腺腺體和脂肪組成，屬于非維持機(jī)體生命活動(dòng)的器官，因此BLBC并不致命，但機(jī)體在發(fā)生BLBC時(shí)，其癌細(xì)胞具有較高的松散性，可隨機(jī)脫落并通過(guò)血液、淋巴液等途徑轉(zhuǎn)移至全身，導(dǎo)致其他重要組織或器官發(fā)生病變，危及患者的生命安全[2]。乳腺切除術(shù)是治療乳腺癌的傳統(tǒng)治療手段，依據(jù)是否全部切除乳腺分為全乳切除術(shù)和病灶局部廣泛切除術(shù)，可有效切除局部腫瘤組織[3]。但因其具有局部復(fù)發(fā)及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移特性，且BLBC對(duì)內(nèi)分泌治療不敏感，預(yù)后差[4]。目前，化療仍是治療BCBL的主要手段。由于個(gè)體、病情等差異，化療療效也具有較為明顯的差異[5]。因此，依據(jù)有效預(yù)測(cè)化療療效的生物學(xué)標(biāo)志物對(duì)化療方案進(jìn)行指導(dǎo)是重點(diǎn)關(guān)注的問(wèn)題，本院通過(guò)檢測(cè)新輔助化療前后BLBC患者組織中拓?fù)洚悩?gòu)酶-α(topoisomerase-α，TOPOⅡα)、雌激素調(diào)節(jié)蛋白(presenilin，PS2)的表達(dá)，以研究其與化療療效和預(yù)后的關(guān)系，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2010年3月至2014年10月本院確診的BLBC患者124例，所有患者均為女性，年齡34～68歲，平均(47.29±10.27)歲，腫瘤大小2.00～5.96 cm，平均腫瘤大小(4.41±0.67)cm，臨床分期Ⅱ期45例，Ⅲ期61例，Ⅳ期18例，所有患者均經(jīng)雙乳彩超、X線和粗芯針穿刺獲得組織進(jìn)行病理診斷首次確診為BLBC，且排除其他腫瘤發(fā)病，術(shù)前均接受4～6個(gè)周期的新輔助化療治療，所有患者均簽署知情同意書且經(jīng)本院醫(yī)藥倫理委員會(huì)審批通過(guò)。

1.2方法 對(duì)所有患者采用粗芯針穿刺獲得乳腺組織標(biāo)本，并對(duì)標(biāo)本通過(guò)10%福爾馬林液固定，常規(guī)包埋，切片[6]。根據(jù)病理及免疫組織化學(xué)結(jié)果，確診為浸潤(rùn)性乳腺癌患者術(shù)前給予4～6個(gè)周期的新輔助化療治療，用免疫組織化學(xué)法檢測(cè)所有患者化療前后組織中TOPOⅡα、PS2的表達(dá)，具體方法如下。

1.2.1新輔助化療療法[7]新輔助化療方案為 4～6周期的 CE 方案 (環(huán)磷酰胺聯(lián)合表阿霉素)，具體實(shí)施操作為：每天對(duì)患者通過(guò)靜脈注射600 mg/m2環(huán)磷酰胺、60 mg/m2表柔比星，每個(gè)周期間隔時(shí)間為14～21 d，總化療時(shí)間為4～6個(gè)周期(依據(jù)患者病情、不良反應(yīng)等實(shí)際情況進(jìn)行延長(zhǎng)或縮短)，化療期間給予適量的抗腫瘤藥物治療，新輔助化療結(jié)束后行術(shù)前評(píng)估，達(dá)部分緩解(PR)或完全緩解(CR)者行手術(shù)治療，手術(shù)分為常規(guī)乳腺癌改良根治術(shù)、局部廣泛切除加腋窩淋巴結(jié)清掃、局部廣泛切除術(shù)加前哨淋巴結(jié)活檢術(shù)。

1.2.2免疫組織化學(xué)法檢測(cè)[8]對(duì)所有乳腺組織標(biāo)本采用磷酸鹽緩沖液沖洗切片，采用常規(guī)免疫組織化學(xué)法檢測(cè)TOPOⅡα、PS2的表達(dá)，陽(yáng)性檢測(cè)一抗(TOPOⅡα、PS2)均按1∶100制成稀釋液，陽(yáng)性對(duì)照檢測(cè)均使用已知陽(yáng)性切片，陰性對(duì)照檢測(cè)均使用磷酸鹽緩沖液代替一抗，TOPOⅡα、PS2檢測(cè)試劑由北京中杉公司提供，所有操作均嚴(yán)格在無(wú)菌條件下依據(jù)試劑盒說(shuō)明書和相關(guān)規(guī)定由同一名醫(yī)師進(jìn)行。

1.2.3觀察指標(biāo)和標(biāo)準(zhǔn) 對(duì)所有切片標(biāo)本由2名經(jīng)驗(yàn)豐富的病理科醫(yī)師采用雙盲法進(jìn)行閱片并判斷因子陰陽(yáng)性表達(dá)，意見(jiàn)不一時(shí)，由另外一名同等資格醫(yī)師進(jìn)行審閱決定，每份標(biāo)本隨機(jī)抽取3個(gè)高倍鏡視野下進(jìn)行讀數(shù)、計(jì)數(shù)，同時(shí)通過(guò)電話方式進(jìn)行為期5年的隨訪，統(tǒng)計(jì)分析其與BLBC病理特征、生存預(yù)后的關(guān)系。TOPOⅡα、PS2的表達(dá)均依據(jù)二級(jí)計(jì)分法進(jìn)行判斷[9]：(1)細(xì)胞數(shù)計(jì)數(shù)(CN)：<5%為0分，5%～<25%為1分，25%～<50%為2分，50%～75%為3分，>75%為4分；(2)染色深淺(RN)：無(wú)明顯染色為0分，染色呈黃色為1分，呈棕黃色為2分，棕褐色為3分；(3)陰陽(yáng)性判定：CN+RN≥4分為陽(yáng)性，<4分為陰性。新輔助化療療效評(píng)估[10]：依據(jù)WHO制訂的實(shí)體瘤療效評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行評(píng)估，通過(guò)B超或X線片對(duì)乳腺部位腫瘤進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果顯示未發(fā)現(xiàn)腫瘤、臨床癥狀基本消失為CR，乳房腫塊縮小高于50%、臨床癥狀明顯緩解為PR，乳房腫塊縮小但未高于50%或增大低于20%，臨床癥狀無(wú)變化為穩(wěn)定(SD)，乳房腫塊增大高于20%且臨床癥狀加重為進(jìn)展(PD)，化療有效率=(CR+PR)/總例數(shù)×100%。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，計(jì)數(shù)資料以率表示，比較采用χ2檢驗(yàn)，多組資料之間對(duì)比采用F檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1新輔助化療前TOPOⅡα表達(dá)與BLBC患者化療療效的關(guān)系 化療后，TOPOⅡα陽(yáng)性表達(dá)患者有效率為90.79%，陰性表達(dá)患者有效率為66.67%，前者明顯高于后者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見(jiàn)表1。

表1 新輔助化療前TOPOⅡα表達(dá)與BLBC患者化療療效的關(guān)系(n)

2.2新輔助化療前PS2表達(dá)與BLBC患者化療療效的關(guān)系 化療后，PS2陽(yáng)性表達(dá)患者有效率為87.97%，陰性表達(dá)患者有效率為70.97%，前者明顯高于后者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見(jiàn)表2。

2.3新輔助化療前后TOPOⅡα表達(dá)與BLBC患者化療療效的關(guān)系 化療后，TOPOⅡα表達(dá)由陽(yáng)性轉(zhuǎn)陰性患者有效率最高，陽(yáng)性不變患者次之，陰性不變患者低于陽(yáng)性不變患者，由陰性轉(zhuǎn)陽(yáng)性患者有效率最低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見(jiàn)表3。

2.4新輔助化療前后PS2表達(dá)與BLBC患者化療療效的關(guān)系 化療后，PS2表達(dá)由陽(yáng)性轉(zhuǎn)陰性患者有效率最高，由陰性轉(zhuǎn)陽(yáng)性患者有效率最低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；陽(yáng)性不變患者與陰性不變患者有效率基本相同，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見(jiàn)表4。

表2 新輔助化療前PS2表達(dá)與BLBC患者化療療效的關(guān)系(n)

表3 新輔助化療前后TOPOⅡα表達(dá)與BLBC患者化療療效的關(guān)系(n)

表4 新輔助化療前后PS2表達(dá)與BLBC患者化療療效的關(guān)系(n)

圖1 化療后5年內(nèi)組織中PS2陽(yáng)性表達(dá)與陰性表達(dá)BLBC患者生存曲線

2.5化療后3年內(nèi)PS2、TOPOⅡα表達(dá)與BLBC患者生存情況的關(guān)系 在化療后5年內(nèi)，TOPOⅡα陽(yáng)性表達(dá)BLBC患者總生存率為79.45%(58/73)，陰性表達(dá)患者總生存率為43.14%(22/51)，前者明顯高于后者；PS2陽(yáng)性表達(dá)BLBC患者總生存率為78.57%(66/84)，陰性表達(dá)患者總生存率為35.00%(14/40)，前者明顯高于后者；差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見(jiàn)圖1、2。

圖2 化療后5年內(nèi)組織中TOPOⅡa陽(yáng)性表達(dá)與陰性表達(dá)BLBC患者生存曲線

3 討 論

BLBC是較為常見(jiàn)的一種乳腺癌，主要臨床表現(xiàn)為乳腺無(wú)痛性腫塊，BLBC腫瘤細(xì)胞易發(fā)生病變組織松脫，形成轉(zhuǎn)移，嚴(yán)重影響患者的身心健康[11]。新輔助化療屬于一種全身性治療方式，通過(guò)應(yīng)用抗癌藥可有效調(diào)控癌細(xì)胞的生命活動(dòng)，對(duì)癌細(xì)胞的增殖、分化具有較高的抑制作用[12]。因此，在乳腺切除術(shù)治療前進(jìn)行新輔助化療，可有效提高對(duì)患者的治療效果，有助于提高患者的生存預(yù)后[13]。但臨床上采用新輔助化療的患者其療效具有較為明顯的差異，因此尋找具有指導(dǎo)意義的生物學(xué)指標(biāo)是提高化療療效中重點(diǎn)關(guān)注的問(wèn)題[14]。隨著分子生物學(xué)的發(fā)展，因子表達(dá)在新輔助化療療效及預(yù)后預(yù)測(cè)方面逐漸顯示出重要的臨床意義和價(jià)值，具有一定的化療方案指導(dǎo)作用[15]。

本研究通過(guò)檢測(cè)化療前后BLBC患者組織中TOPOⅡα、PS2表達(dá)情況，結(jié)果顯示：化療后，TOPOⅡα陽(yáng)性表達(dá)患者有效率明顯高于陰性表達(dá)患者，PS2陽(yáng)性表達(dá)患者有效率明顯高于陰性表達(dá)患者；TOPOⅡα表達(dá)由陽(yáng)性轉(zhuǎn)陰性患者有效率最高，由陰性轉(zhuǎn)陽(yáng)性患者有效率最低，PS2表達(dá)由陽(yáng)性轉(zhuǎn)陰性患者有效率最高，由陰性轉(zhuǎn)陽(yáng)性患者有效率最低；在化療后3年內(nèi)，PS2陽(yáng)性表達(dá)BLBC患者復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移率明顯高于陰性表達(dá)患者，TOPOⅡα陽(yáng)性表達(dá)患者總生存率明顯高于陰性表達(dá)患者。研究發(fā)現(xiàn)，TOPOⅡα屬于機(jī)體中重要的一種核酶，由于直接參與DNA分子的修復(fù)、重組、轉(zhuǎn)錄和復(fù)制的過(guò)程，同時(shí)作為細(xì)胞增殖中重要的因子，BLBC癌變可促進(jìn)TOPOⅡα呈現(xiàn)出高表達(dá)，形成惡性循環(huán)，提高腫瘤的癌變程度；同時(shí)TOPOⅡα主要分布于細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞核漿，且作為蒽環(huán)類抗癌藥物潛在的重要靶點(diǎn)，可有效與抗腫瘤藥物結(jié)合，使藥物更為準(zhǔn)確、有效作用于腫瘤細(xì)胞，抑制腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移、增殖，故TOPOⅡα陽(yáng)性表達(dá)患者在進(jìn)行化療時(shí)，藥物可更為有效滅殺癌變細(xì)胞；同時(shí)在化療治療過(guò)程中，抗腫瘤藥物誘導(dǎo)了增殖的腫瘤細(xì)胞重新表達(dá)受體，使腫瘤細(xì)胞形成選擇性克隆，致使受體陽(yáng)性或者陰性細(xì)胞選擇性存活，同時(shí)腫瘤細(xì)胞中多藥耐藥基因的擴(kuò)增使其對(duì)藥物產(chǎn)生了耐藥性，因此TOPOⅡα表達(dá)由陽(yáng)性轉(zhuǎn)陰性患者表明化療使大量的腫瘤細(xì)胞死亡，致使TOPOⅡα表達(dá)水平下降，而陰性轉(zhuǎn)陽(yáng)性患者治療過(guò)程中使陰性腫瘤細(xì)胞選擇性存活，并發(fā)生異常的增殖，而TOPOⅡα作為細(xì)胞增殖的重要因子，可有效反映細(xì)胞增殖情況，故陰性轉(zhuǎn)陽(yáng)性患者表現(xiàn)為TOPOⅡα高表達(dá)。此外，PS2作為雌激素誘導(dǎo)蛋白之一，可有效反映機(jī)體雌激素受體水平，間接反映機(jī)體內(nèi)分泌系統(tǒng)的功能、狀態(tài)，在機(jī)體發(fā)病時(shí)，由于癌細(xì)胞的異常、快速增殖，可致細(xì)胞核大量的增生，破壞了機(jī)體內(nèi)分泌平衡，使PS2表達(dá)發(fā)生改變，因此PS2間接反映了BLBC癌變情況；因此，在化療過(guò)程中，PS2的表達(dá)水平可有效作為細(xì)胞增殖活性檢測(cè)的敏感和重要指標(biāo)，PS2陽(yáng)性表達(dá)提示機(jī)體對(duì)化療具有較高的敏感性，而治療后PS2陽(yáng)性表達(dá)轉(zhuǎn)為陰性，提升腫瘤細(xì)胞減少，化療療效較好，而治療后PS2陰性表達(dá)轉(zhuǎn)為陽(yáng)性，提示腫瘤細(xì)胞增多，化療療效較差。因此醫(yī)師在進(jìn)行化療治療時(shí)，通過(guò)檢測(cè)組織中TOPOⅡα、PS2表達(dá)情況，有利于制訂針對(duì)性臨床治療方案，同時(shí)為指導(dǎo)BLBC的化療提供重要的參考指標(biāo)，避免無(wú)效或過(guò)度治療對(duì)患者造成的不良影響，以提高對(duì)患者的治療效果和生存預(yù)后水平。此外，研究還發(fā)現(xiàn)由于通過(guò)檢測(cè)化療后組織中TOPOⅡα、PS2表達(dá)情況，可有效反映患者化療的療效，間接有效判斷患者手術(shù)治療后生存預(yù)后水平，有助于醫(yī)師對(duì)患者制訂更為合適的預(yù)后治療方案。

綜上所述，組織中TOPOⅡα、PS2可作為BLBC患者新輔助化療療效的重要指標(biāo)，有助于醫(yī)師制定合適的治療、預(yù)后方案，避免無(wú)效或過(guò)度治療對(duì)患者造成不良的影響，值得臨床作進(jìn)一步推廣。

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10.3969/j.issn.1671-8348.2015.20.029

貴州省科學(xué)技術(shù)基金項(xiàng)目(c030303)。

周恬(1981-)，主治醫(yī)師，碩士，主要從事乳腺腫瘤的研究。

R737.9

B

1671-8348(2015)20-2821-04

2015-01-16

2015-03-28)