張新元

益心通絡(luò)膠囊對大鼠實驗性血栓及血清血脂、IL-8、CRP、TXA2、6-keto-PGF1α的影響

張新元

目的 觀察益心通絡(luò)膠囊對大鼠血栓及血清總膽固醇(TC)、三酰甘油(TG)、白細(xì)胞介素-8(IL-8)、C反應(yīng)蛋白(CRP)、血栓素A2(TXA2)和6-酮-前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)的影響。方法 將Wistar大鼠隨機(jī)分為空白對照組、陽性對照組及益心通絡(luò)膠囊高、中、低劑量組，每組20只；空白對照組以生理鹽水灌胃，陽性對照組以復(fù)方丹參片灌胃，益心通絡(luò)膠囊高、中、低劑量組以益心通絡(luò)膠囊灌胃，劑量分別為6 g/kg、3 g/kg和0.6 g/kg，連續(xù)灌胃7 d；然后觀察每組大鼠實驗性血栓情況及血清TG、TC、IL-8、CRP、TXA2、6-keto-PGF1α的變化。結(jié)果 益心通絡(luò)高劑量組、陽性對照組大鼠血栓濕重、TC、IL-8、CRP、TXA2與空白對照組相比顯著降低(P<0.05或P<0.01)，6-keto-PGF1α較空白對照組升高(P<0.05)，益心通絡(luò)膠囊低劑量組大鼠血栓濕重與空白對照組相比顯著降低(P<0.05)， 益心通絡(luò)膠囊中劑量組大鼠血栓濕重、TXA2與空白對照組相比顯著降低(P<0.05)，6-keto-PGF1α較空白對照組升高(P<0.05)。結(jié)論 益心通絡(luò)膠囊對實驗性大鼠血栓形成具有良好的抑制作用，以中、高劑量為著。益心通絡(luò)膠囊高劑量可降低大鼠血脂中TC水平，中、低劑量無作用。 益心通絡(luò)膠囊高劑量可降低血清IL-8和CRP含量，以降低CRP為顯著。益心通絡(luò)膠囊中、高劑量對TXA2和6-keto-PGF1α具有調(diào)節(jié)作用，以高劑量為著。

實驗性血栓形成；益氣通絡(luò)膠囊；血脂；白細(xì)胞介素-8；C反應(yīng)蛋白；血栓素A2

益心通絡(luò)膠囊是我院多年潛心研制的中成藥，以益氣活血化痰為組方大法，不僅能改善冠脈支架術(shù)后患者胸悶、胸痛等不適癥狀，有效提高患者生活質(zhì)量，而且對防治支架內(nèi)再狹窄(ISA)具有確切的療效。本研究擬觀察益心通絡(luò)膠囊對大鼠血栓及血清總膽固醇(TC)、三酰甘油(TG)、白細(xì)胞介素-8(IL-8)、C反應(yīng)蛋白(CRP)、血栓素A2(TXA2)和6-酮-前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)的影響，為臨床使用益心通絡(luò)膠囊治療ISR提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 動物 Wistar種大鼠，體重150 g～200 g，雄性，購自山東大學(xué)醫(yī)學(xué)院實驗動物中心，動物合格證號：SCXK(魯)20090001。

1.1.2 藥品、試劑和儀器 益心通絡(luò)膠囊和復(fù)方丹參片(陽性對照藥物)由泰安市中醫(yī)院提供。三酰甘油、膽固醇試劑盒購自北京北化康泰臨床試劑有限公司；前列環(huán)素(PGI2)檢測ELISA試劑盒為南京森貝伽生物科技有限公司產(chǎn)品；TXA2檢測ELISA試劑盒上海博耀生物科技有限公司；CRP檢測ELISA試劑盒為上海雅吉生物科技有限公司產(chǎn)品。美國Unico公司UN-2102C型紫外分光光度計，壓力傳感式全自動表觀粘度型快測儀為重慶大學(xué)維多生物工程研究所生成，型號FASCO，美國BIO-RAD公司，model 680型酶標(biāo)儀。

1.2 方法

1.2.1 分組和干預(yù) 選取Wistar大鼠，隨機(jī)分為空白對照組、陽性對照組及益心通絡(luò)膠囊高、中、低劑量組，每組20只大鼠，空白對照組以生理鹽水灌胃，陽性對照組以復(fù)方丹參片灌胃，劑量為150 mg/kg，益心通絡(luò)膠囊高、中、低劑量組以益心通絡(luò)膠囊灌胃，劑量分別為6 g/kg、3 g/kg和0.6 g/kg，連續(xù)灌胃7 d。

1.2.2 對大鼠實驗性血栓形成的影響 每組隨機(jī)取大鼠10只進(jìn)行實驗性血栓形成檢測。檢測步驟：戊巴比妥30 mg/kg腹腔注射麻醉。背位固定，同時分離左頸外靜脈和右頸總動脈，在內(nèi)徑為2 mm的聚乙烯管中放一根長7 cm的4號手術(shù)線，以肝素生理鹽水50 U/mL充滿三段相連接的聚乙烯管中，然后將該管的一端插入左頸外靜脈，再經(jīng)此管的另一端準(zhǔn)確注入肝素50 U/kg抗凝，并將該管插入右頸總動脈中，立即放開動脈夾，準(zhǔn)確記錄血流15 min，終止血流，取出絲線稱重，并按公式計算血栓生成抑制率。抑制率(%)=(對照組血栓濕重-給藥組血栓濕重)/對照組血栓濕重×100%。

1.2.3 大鼠血清TG、TC、IL-8、CRP、TXA2、PGI2檢測 各組隨機(jī)取大鼠6只，取血清-20 ℃保存?zhèn)溆?。大鼠血脂TG、TC檢測：取血清，嚴(yán)格按照說明書檢測，紫外分光光度計檢測。ELISA方法檢測IL-8、CRP、TXA2、6-keto-PGF1α步驟：取血清，嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行，采用酶標(biāo)儀檢測。

2 結(jié) 果

2.1 大鼠一般情況 在藥物干預(yù)期間，各組大鼠飲食可，活動可，大小便可，沒有出現(xiàn)不良反應(yīng)，未出現(xiàn)飲食減少，無皮膚紅腫，沒有出現(xiàn)死亡現(xiàn)象。

2.2 益心通絡(luò)膠囊對大鼠血栓形成的影響 益心通絡(luò)膠囊對實驗性血栓形成有很好的抑制作用，尤其是中、高劑量組，與空白對照組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)，益心通絡(luò)膠囊低、中、高劑量組血栓抑制率分別為15.09%、25.51%、47.41%，陽性對照組也具有良好的抑制作用，抑制率與益心通絡(luò)膠囊中劑量組接近。詳見表1。

表1 益心通絡(luò)膠囊對大鼠血栓形成的影響

2.3 益心通絡(luò)膠囊對大鼠血清血脂的影響 陽性對照組和益心通絡(luò)膠囊高劑量組TC與空白對照組相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，顯示益心通絡(luò)膠囊有一定的降血脂作用。詳見表2。

表2 益心通絡(luò)膠囊對大鼠血脂的影響(±s) mmol/L

2.4 益心通絡(luò)膠囊對大鼠血清IL-8、CRP含量的影響 干預(yù)后，益心通絡(luò)膠囊低、中劑量組血清IL-8和CRP含量與空白對照組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義，僅陽性對照組和益心通絡(luò)膠囊高劑量組與空白對照組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05或P<0.01)，詳見表3。

表3 益心通絡(luò)膠囊對大鼠血清IL-8、CRP含量的影響(x±s)

2.5 益心通絡(luò)膠囊對大鼠血清TXA2和6-keto-PGF1α含量的影響 益心通絡(luò)膠囊對TXA2和6-keto-PGF1α有很好的調(diào)節(jié)作用，尤其是高劑量組，與空白對照組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)，但益心通絡(luò)膠囊低劑量組與空白對照組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義。詳見表4。

表4 益心通絡(luò)膠囊對大鼠血清TXA2和6-keto-PGF1α含量的影響(x±s)

3 討 論

冠心病是目前公認(rèn)的全世界成人死亡的主要原因和致殘的重要原因。經(jīng)皮腔內(nèi)冠狀動脈支架植入術(shù)(PCI)作為冠心病的有效治療手段，日益得到廣泛應(yīng)用。但是術(shù)后支架內(nèi)再狹窄(in-stent restenosis，ISR)一直困擾著人們，據(jù)臨床統(tǒng)計其發(fā)生率高達(dá)10%～50%，嚴(yán)重影響了遠(yuǎn)期療效。目前普遍認(rèn)為支架內(nèi)再狹窄是血管對抗損傷的一種異常修復(fù)反應(yīng)，表現(xiàn)為血栓的形成、內(nèi)皮增生、血管重塑。支架內(nèi)再狹窄的發(fā)生與血栓及血清TC、IL-8、CRP、TXA2和6-keto-PGF1α等因素有關(guān)。

益心通絡(luò)膠囊由人參、丹參、瓜蔞、黃芪、川芎、半夏、茯苓、降香、枳殼、陳皮、薤白、麥冬組成，本方通補兼顧、辛散溫通、行氣血、通心脈、消痰瘀，補而不滯，通而不散，是益氣通脈化痰的良方。本實驗結(jié)果顯示，益氣通絡(luò)膠囊中、高劑量組對實驗性大鼠血栓形成具有良好的抑制作用；益氣通絡(luò)膠囊高劑量組能顯著降低實驗大鼠的血清IL-8和CRP含量，以降低CRP為顯著；益氣通絡(luò)膠囊中、高劑量組對實驗大鼠的TXA2和6-keto-PGF1α具有有效的調(diào)節(jié)作用。

現(xiàn)代藥理研究認(rèn)為，人參中的皂甙能擴(kuò)張血管，使微循環(huán)得到改善，防止血液凝固，促進(jìn)纖維蛋白溶解，對紅細(xì)胞的聚集性有抑制性，改善血液的流動性；對心血管系統(tǒng)的作用：具有調(diào)節(jié)心臟機(jī)能，擴(kuò)張血管，調(diào)整血壓以及抗休克作用?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)發(fā)現(xiàn)丹參可阻止動脈粥樣硬化形成過程中纖溶活性的降低，延緩和阻止動脈粥樣硬化的形成。相關(guān)實驗表明，適當(dāng)劑量的瓜蔞能使豚鼠離體心臟收縮力有所加強(qiáng)，瓜蔞皮擴(kuò)張冠脈的作用與其所含類生物堿有關(guān)，而其總氨基酸可能有祛痰作用而不是擴(kuò)張冠脈作用[1]。黃芪不但有擴(kuò)張冠狀動脈、改善心肌血供、心肌代謝及縮小梗死面積的作用，還具有增強(qiáng)心肌收縮力和改善左心功能，影響血壓、降低血液黏稠度及改善血液流變學(xué)指標(biāo)的作用。現(xiàn)代藥理學(xué)研究證實川芎具有抑制血管平滑肌細(xì)胞增殖，降低血小板黏附、聚集，防止血栓形成，保護(hù)血管內(nèi)皮細(xì)胞等作用；還具有防治冠脈支架介入術(shù)后再狹窄的作用[2]。川芎水提液及其生物堿能擴(kuò)張冠狀動脈和血管，增加冠脈血流量，改善心肌缺氧狀況。茯苓對心血管系統(tǒng)的作用主要表現(xiàn)在增強(qiáng)心肌收縮力，茯苓水浸膏還具有降血壓作用。半夏有較明顯的抗心律失常作用，其煎劑對犬室性心動過速及室性早搏有拮抗作用，另外，半夏還具有抑制心率和短暫的降壓作用[3]。

本實驗結(jié)果表明在抑制支架內(nèi)狹窄形成過程中，益氣通絡(luò)膠囊不僅能抑制血栓形成，并且在一定程度上干預(yù)了內(nèi)皮增生、血管重塑的過程。

[1] 上海市化工“七·二一”工人大學(xué)有機(jī)系中草藥組.栝樓的研究Ⅳ，栝樓藥理作用的初步研究[J].醫(yī)藥工業(yè)，1975(7)：17

[2] 楊雪梅．川芎嗪藥理作用研究進(jìn)展[J].中國生化藥物，2010，31(3) ：215-216.

[3] 陳凌云，楊國祥.半夏藥理研究概況[J].云南中醫(yī)學(xué)院學(xué)報， 1997，20(4)：17-19.

(本文編輯 郭懷印)

山東省泰安市中醫(yī)醫(yī)院(山東泰安 271000)，E-mail：luzxy629@163.com

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10．3969/j．issn．1672-1349．2015．14．009

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2015-02-09)