佟麗妍金 鑫胡才寶

（1.浙江省杭州市中醫(yī)院，浙江 杭州 310007；2.浙江省立同德醫(yī)院，浙江 杭州 310000；3.浙江醫(yī)院，浙江 杭州 310000）

·研究報告·

烏司他丁聯(lián)合醒腦靜注射液對腦出血模型兔神經(jīng)特異性烯醇化酶、水通道蛋白4的影響*

佟麗妍1金 鑫2胡才寶3△

（1.浙江省杭州市中醫(yī)院，浙江 杭州 310007；2.浙江省立同德醫(yī)院，浙江 杭州 310000；3.浙江醫(yī)院，浙江 杭州 310000）

目的觀察烏司他丁注射液聯(lián)合醒腦靜注射液對腦出血模型兔血清神經(jīng)特異性烯醇化酶 （NSE）、水通道蛋白4（AQP-4）的影響，探討烏司他丁聯(lián)合醒腦靜注射液的腦保護(hù)作用。方法40只造模成功的新西蘭兔隨機(jī)平均分為4組，每組10只：腦出血模型組（模型組）、烏司他丁治療組（烏司他丁組）、醒腦靜注射液治療組（醒腦靜組）以及烏司他丁加醒腦靜治療組（聯(lián)合組）。應(yīng)用ELISA法測定各組兔造模前（0 d），造模后第1、3、5、7日動脈血中NSE、AQP-4的含量。結(jié)果造模成功后各組NSE及AQP-4水平均升高。與模型組比較，其他各組第1日NSE、AQP-4水平差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；各組NSE水平第3～7日均下降（P＜0.05）；烏司他丁組第7日、醒腦靜組第5～7日、聯(lián)合組第3～7日AQP-4水平下降（P＜0.05）。與聯(lián)合組比較，烏司他丁組及醒腦靜組第7日NSE水平較高（P＜0.05）；醒腦靜組AQP-4第1～7日差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；烏司他丁組第5日以后AQP-4水平較高（P＜0.05）。結(jié)論烏司他丁聯(lián)合醒腦靜注射液治療可使腦出血模型兔動脈血中NSE及AQP-4含量下降，對腦出血具有一定的腦保護(hù)作用。

烏司他丁 醒腦靜 腦出血 兔 神經(jīng)特異性烯醇化酶 水通道蛋白4

腦出血（ICH）占全部腦卒中發(fā)病率的12%～15%，具有高發(fā)病率、高死亡率、高致殘率的特點(diǎn)，但I(xiàn)CH治療近年來無明顯進(jìn)展［1］。烏司他丁是從人類尿液中提取精制而成的糖蛋白，具有抑制多種酶、穩(wěn)定細(xì)胞膜和溶酶體膜、抑制溶酶體酶的活性及釋放等作用。醒腦靜注射液（XNJ）是ICH后被廣泛應(yīng)用的中藥提取物注射液，眾多臨床及動物實(shí)驗均提示其對ICH后腦細(xì)胞具有保護(hù)作用。迄今為止，臨床上在ICH后繼發(fā)性損傷治療方案上一直缺乏突破性進(jìn)展，有效的西醫(yī)內(nèi)科治療藥物局限［2］。眾多研究表明，水通道蛋白4（AQP-4）是參與腦水腫形成的一個關(guān)鍵指標(biāo)［3］。神經(jīng)元特異性烯醇化酶（NSE）是目前臨床上廣泛用于早期檢測腦損傷的指標(biāo)，是神經(jīng)元損傷的標(biāo)志酶。本實(shí)驗旨在探討烏司他丁聯(lián)合XNJ治療ICH時在AQP-4及NSE方面的腦保護(hù)作用?，F(xiàn)報告如下。

1 材料與方法

1.1 動物 選用健康成年新西蘭兔，雌雄不限，體質(zhì)量（3.06±0.29）kg，由浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院提供，許可證號：SCXK（浙）2010-0047。飼養(yǎng)期間給予嚙齒類動物標(biāo)準(zhǔn)顆粒飼料及飲水，自主進(jìn)食。溫度（23.31±10.51）℃，濕度50%～70%，正常晝夜節(jié)律，噪音＜50 dB，通風(fēng)，單籠飼養(yǎng)。實(shí)驗過程中對動物的處置符合動物倫理學(xué)標(biāo)準(zhǔn)。

1.2 藥物及試劑 烏司他丁注射液 （規(guī)格為10萬單位/2 mL，批號為031301064）產(chǎn)自廣東天普生化醫(yī)藥股份有限公司。兔NSE酶聯(lián)免疫檢測試劑盒（R&D公司）（批號：Ra87451L）及兔AQP-4酶聯(lián)免疫檢測試劑盒（R&D公司）（批號：Ra37741L）均購買自杭州達(dá)文生物有限公司。XNJ（10 mL/支，批號：130125）產(chǎn)自無錫濟(jì)民可信山禾藥業(yè)股份有限公司。

1.3 模型制備 將符合實(shí)驗標(biāo)準(zhǔn)的新西蘭兔，參照文獻(xiàn)［4］的方法加以改良：戊巴比妥鈉（30 mg/kg）耳緣靜脈麻醉，頭部剃毛，俯臥位固定于兔腦立體定位儀上。手術(shù)暴露顱骨十字縫和人字縫。參照Sawyer兔腦立體定位圖譜［5］確定內(nèi)囊位置：AP 1 mm，R 6 mm，H 13 mm。選取十字縫交叉點(diǎn)為基點(diǎn)沿冠狀縫向右旁開6mm再平行矢狀縫向前1mm為穿刺進(jìn)針點(diǎn)。在兔耳中央動脈采取自體未凝動脈血0.5 mL，用9號腰穿針快速垂直于顱骨穿入腦實(shí)質(zhì)，進(jìn)針深度13 mm，3 min之內(nèi)緩慢注入，停針5 min后緩慢拔針。局部壓迫止血，縫合皮膚，造模完成。將造模成功的40只新西蘭兔按照隨機(jī)數(shù)字表隨機(jī)分為4組，每組10只：模型組、烏司他丁組、醒腦靜組以及聯(lián)合組。

1.4 給藥方案 模型組造模成功后予以0.9%氯化鈉注射液2 mL；烏司他丁組予以烏司他丁注射液1.7萬U/kg（相當(dāng)于成人用藥量3倍劑量）加入2 mL 0.9%氯化鈉注射液中；醒腦靜組予以XNJ 2 mL；聯(lián)合組予以烏司他丁注射液1.7萬U/kg加入2 mL 0.9氯化鈉注射液中，XNJ 2 mL，二者交替注射給藥。各組均靜脈注射給藥，每日3次，連續(xù)7 d。

1.5 標(biāo)本采集與檢測 于造模前（0 d）及造模后第1、3、5、7日，分別為各組動物采集動脈血，離心后收集血清，嚴(yán)格按照試劑盒說明書采用ELISA法檢測血清NSE及AQP-4的含量。

1.6 統(tǒng)計學(xué)處理 應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計軟件。數(shù)據(jù)以（±s）表示，采用單因素方差分析及t檢驗法。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 各組腦出血模型兔不同時間NSE水平比較 見表1。造模成功后各組NSE水平均升高，與模型組比較，各組第1日差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；而第3、5、7日各組NSE水平均下降（P＜0.05）。與聯(lián)合組比較，烏司他丁組及醒腦靜組第1、3、5日NSE水平差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；第7日，烏司他丁組及醒腦靜組NSE水平均較高（P＜0.05）。

表1 各組腦出血模型兔不同時間神經(jīng)特異性烯醇化酶水平比較（ng/mL，±s）

表1 各組腦出血模型兔不同時間神經(jīng)特異性烯醇化酶水平比較（ng/mL，±s）

與模型組同時間比較，*P＜0.05；與聯(lián)合組同時間比較，△P＜0.05。下同。

組別 n 0 d 1 d 3 d 5 d 7 d模型組 1 0烏司他丁組 1 0醒腦靜組 1 0 4 . 2 8 ± 0 . 0 7 4 . 2 9 ± 0 . 2 2 4 . 2 7 ± 0 . 3 1 6 . 0 2 ± 0 . 1 4 6 . 3 3 ± 0 . 5 8 6 . 0 9 ± 0 . 2 0 5 . 9 8 ± 0 . 4 0 5 . 8 7 ± 0 . 2 0 5 . 5 5 ± 0 . 2 2*5 . 3 1 ± 0 . 1 9*5 . 0 1 ± 0 . 1 6*△5 . 8 8 ± 0 . 2 2 5 . 6 3 ± 0 . 3 0*5 . 1 2 ± 0 . 2 1*5 . 3 6 ± 0 . 2 4*△聯(lián)合組 1 0 4 . 2 8 ± 0 . 1 8 5 . 9 9 ± 0 . 3 1 5 . 2 8 ± 0 . 3 4*5 . 0 3 ± 0 . 2 2*4 . 4 4 ± 0 . 2 0*

2.2 各組腦出血模型兔不同時間AQP-4水平比較見表2。造模成功后各組AQP-4水平均升高，與模型組比較，聯(lián)合組第1日，烏司他丁組第1、3、5日，醒腦靜組第1、3日的AQP-4水平差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；聯(lián)合組第3、5、7日，烏司他丁組第7日，醒腦靜組第5、7日的AQP-4水平下降（P＜0.05）。與聯(lián)合組比較，烏司他丁組第1、3日及醒腦靜組第1、3、5、7日差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；烏司他丁組第5、7日AQP-4水平較高（P＜0.05）。

表2 各組腦出血模型兔不同時間AQP-4水平比較（ng/mL，±s）

表2 各組腦出血模型兔不同時間AQP-4水平比較（ng/mL，±s）

組別 n 0 d 1 d 3 d 5 d 7 d模型組 1 0烏司他丁組 1 0醒腦靜組 1 0 9 . 5 7 ± 0 . 3 6 9 . 5 8 ± 0 . 3 5 9 . 5 9 ± 0 . 4 3 1 1 . 6 4 ± 0 . 2 8 1 1 . 5 8 ± 0 . 4 7 1 2 . 2 5 ± 0 . 8 3 1 3 . 2 8 ± 0 . 8 4 1 1 . 6 6 ± 0 . 3 2 1 1 . 5 8 ± 0 . 2 6 1 1 . 3 6 ± 0 . 3 9△1 0 . 6 9 ± 0 . 3 2*△1 1 . 4 8 ± 0 . 4 5 1 1 . 3 2 ± 0 . 3 8 1 0 . 5 9 ± 0 . 2 5*1 0 . 0 5 ± 0 . 2 7*聯(lián)合組 1 0 9 . 5 8 ± 0 . 2 3 1 0 . 7 2 ± 0 . 4 4 1 0 . 5 8 ± 0 . 5 2*1 0 . 0 5 ± 0 . 3 1*9 . 6 6 ± 0 . 6 3*

3 討 論

ICH后腦損傷的病情進(jìn)展不僅與出血量和出血部位（血腫的機(jī)械壓迫和占位效應(yīng)）有關(guān)，ICH的病理機(jī)制提示血腫對周圍腦組織的壓迫，血腫的分解產(chǎn)物，以及腦組織損害釋放的多種血管活性物質(zhì)是ICH后腦組織損傷的主要原因，可以導(dǎo)致腦水腫、顱內(nèi)壓增高、繼發(fā)性血腫周圍腦灌注不足以及凝血纖溶系統(tǒng)的改變。XNJ是由安宮牛黃丸減味制成的中藥注射劑，組方包含冰片、麝香、梔子等［6］。它通過靜脈給藥可透過血腦屏障（BBB）直接作用于中樞神經(jīng)系統(tǒng)。其中麝香氣味芳香，善于走竄，具有良好的開竅通閉性能，可增進(jìn)大腦功能，興奮中樞神經(jīng)系統(tǒng)。冰片具有清熱解毒止痛功效，能協(xié)助麝香發(fā)揮興奮中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能，諸藥相配，起到醒腦止痙、清熱涼血、行氣活血和解毒止痛等功效［7］?，F(xiàn)代研究表明麝香的有效成分是麝香酮，它可以減輕腦缺血大鼠超微結(jié)構(gòu)的損傷和降低神經(jīng)功能缺損程度［8］，石菖蒲、冰片合用可以抑制顱腦損傷后腦內(nèi)細(xì)胞黏附分子的表達(dá)，減輕腦組織的炎癥反應(yīng)、外傷性腦水腫和神經(jīng)細(xì)胞缺氧性損傷［9］。烏司他丁是一種具有廣譜蛋白酶抑制作用的糖蛋白，由肝臟分泌，屬于人體內(nèi)源性抑炎物質(zhì)，代謝后進(jìn)入尿液，它能夠結(jié)合如粒細(xì)胞彈性蛋白酶和胰蛋白酶、α-糜蛋白酶等絲氨酸蛋白酶等多種酶類，結(jié)合后抑制酶的活性，并促進(jìn)其降解；同時可穩(wěn)定溶酶體膜，抑制體內(nèi)多種蛋白酶，清除氧自由基，抑制機(jī)體的過度炎癥反應(yīng)，減少組織細(xì)胞損傷，改善組織循環(huán)灌注。有研究認(rèn)為XNJ聯(lián)合烏司他丁對重癥胰腺炎大鼠腦損傷有較好的保護(hù)作用［10］。

水通道蛋白（AQPs）是一種膜蛋白，對水的通透性具有高度選擇性，水分子可以通過水通道向高滲方向移動［11］。到目前為止，已從哺乳動物組織中鑒定出13種AQPs（AQP-0~12），其中AQP-4是腦組織中含量最多的水通道蛋白，主要分布于星形膠質(zhì)細(xì)胞膜，特別是在緊密包繞毛細(xì)血管壁形成的一層膠質(zhì)界膜上有著強(qiáng)烈的表達(dá)［12］。依據(jù)其分布特點(diǎn)我們可以推測AQP-4與BBB的功能及腦水腫的發(fā)生密切相關(guān)，可調(diào)節(jié)腦脊液及腦組織中的水液代謝。Manley等［13］研究認(rèn)為，ICH后血腫周圍AQP-4表達(dá)增高可導(dǎo)致BBB通透性受損，提示AQP-4的動態(tài)變化與腦水腫的發(fā)生和發(fā)展密切相關(guān)。研究認(rèn)為［14］，AQP-4表達(dá)升高可引起血管內(nèi)水分通過BBB進(jìn)入腦組織，導(dǎo)致BBB破壞，進(jìn)而加重腦水腫。劉亞敏等［15］實(shí)驗表明大鼠全腦缺血再灌注后，腦微血管的通透性增加，出現(xiàn)了以血管源性為主的腦水腫，證實(shí)了AQP-4參與了腦水腫的發(fā)展過程，抑制AQP-4的表達(dá)會減輕腦水腫的程度。張青等［16］研究表明在全血誘導(dǎo)的ICH周圍腦組織出現(xiàn)不同程度的神經(jīng)細(xì)胞水腫變性、壞死，間質(zhì)水腫明顯，且AQP-4表達(dá)明顯增加，陽性細(xì)胞主要在星形膠質(zhì)細(xì)胞足突上表達(dá)。范麗娜等［17］研究表明XNJ可以降低全腦缺血性昏迷大鼠模型AQP-4 mRNA水平。藥理學(xué)研究［18-19］已證明XNJ能通過BBB，直接作用于中樞神經(jīng)系統(tǒng)而發(fā)揮作用，有消除腦水腫、防止腦疝、改善大腦血氧供應(yīng)、促進(jìn)腦細(xì)胞康復(fù)等作用。XNJ的早期應(yīng)用具有減輕腦水腫、保護(hù)神經(jīng)細(xì)胞的作用，其作用機(jī)理可能與下調(diào)AQP-4的表達(dá)有關(guān)。研究表明［20］，凝血酶是血液凝固過程中形成的一種具有毒性介質(zhì)特性的蛋白水解酶，大量凝血酶的釋放在誘導(dǎo)ICH周圍組織損傷，特別是早期腦水腫的發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮重要作用。ICH后血腫持續(xù)性釋放的凝血酶在繼發(fā)性腦損傷過程中發(fā)揮著重要的作用，可通過激活凝血酶受體（PAR），影響AQP-4的功能，從而加劇ICH后腦組織水腫［21］。UTI可抑制體內(nèi)多種蛋白酶。陳珊等［22］研究顯示UTI聯(lián)合甘油果糖可降低大鼠ICH后腦組織AQP-4的表達(dá)，從而改善腦水腫。本研究顯示，在降低AQP-4方面，治療第1日，3組均無效；UTI組第7日出現(xiàn)療效；醒腦靜第5、7日顯效；聯(lián)合組第3、5、7日均有效，提示醒腦靜在降低血清AQP-4方面優(yōu)于烏斯他汀組，而二藥聯(lián)用效果更明顯。

NSE屬于糖酵解同工酶二聚體，在神經(jīng)細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中濃度較高，顱腦損傷時血清中NSE含量會升高。目前研究認(rèn)為NSE含量升高的主要原因是損傷導(dǎo)致神經(jīng)元細(xì)胞膜功能與結(jié)構(gòu)受損，NSE從神經(jīng)元胞漿中釋放出來，進(jìn)入腦脊液和細(xì)胞間隙中，透過破損的血腦屏障NSE進(jìn)入血液循環(huán)，因此，血清NSE與腦損傷的嚴(yán)重程度密切相關(guān)，具有較高特異性和敏感性，對腦損傷的診斷及傷勢的評估具有重要的臨床價值。有研究證實(shí)NSE和腦部損傷的嚴(yán)重范圍及程度呈正相關(guān)，即 NSE越高，腦損傷包括亞臨床損傷越嚴(yán)重［23］。Fassbender等［24］動態(tài)監(jiān)測腦損傷患者血漿中NSE，結(jié)果顯示血漿NSE含量與臨床預(yù)后相關(guān)。于宗明等［25］研究提示烏司他汀可明顯降低ICH患者的NSE水平，從而減輕腦損傷。李綿綿等［26］研究提示急司他汀的應(yīng)用可減少嬰幼兒體外循環(huán)術(shù)后血漿NSE和S100蛋白的釋放，減輕腦損傷。韓瀟等［27］實(shí)驗研究提示烏司他汀能夠降低體外循環(huán)家兔模型的NSE水平，對其有腦保護(hù)作用。涂悅等［28］研究表明醒腦靜組血清中NSE水平明顯低于模型組，提示XNJ對大鼠顱腦損傷具有保護(hù)作用，其作用機(jī)制可能與減輕顱腦損傷后腦水腫及抑制氧自由基反應(yīng)、保護(hù)神經(jīng)細(xì)胞有關(guān)。孟宜良等［29］研究發(fā)現(xiàn)應(yīng)用XNJ治療的ICH患者，其血清NSE水平較對照組下降明顯，提示XNJ可有效抑制ICH后炎癥反應(yīng)，減輕神經(jīng)損害，對急性ICH患者可發(fā)揮積極治療作用。本研究結(jié)果顯示在降低NSE方面，治療第1日3組藥物均無明顯療效；而第3~7日均顯示有效；第3~5日3組療效相仿，無明顯統(tǒng)計學(xué)差異；治療第7日時聯(lián)合組比烏司他丁組及醒腦靜組效果好，有統(tǒng)計學(xué)差異，提示烏司他丁聯(lián)合XNJ在降低NSE方面比單藥效果好。

綜上所述，烏司他丁聯(lián)合XNJ治療可使ICH模型兔動脈血中NSE及AQP-4含量下降，能減輕血管源性腦水腫、保護(hù)神經(jīng)元細(xì)胞膜功能及結(jié)構(gòu)、維持血腦屏障完整，對ICH具有一定的腦保護(hù)作用。中西醫(yī)結(jié)合治療ICH方面的優(yōu)勢需要進(jìn)一步深入研究。

［1］ 鄧平，吳曉牧.高血壓腦出血的病理生理研究進(jìn)展［J］.中華腦血管病雜志：電子版，2010，4（4）：267-278.

［2］ Hua Y，Schallert T，Keep RF，et al.Behavioral tests after intracerebral hemorrhage in the rat［J］.Stroke，2002，33（5）：2478-84.

［3］ Lee JK，Burckart GJ.Nuclear factor kappa B：important transcription factor and therapeutic target［J］.J Clin Pharmacol，1998，38（11）：981-993.

［4］ 張建軍，劉鐵.兔腦出血模型的建立及其方法比較［J］.浙江臨床醫(yī)學(xué)，2007，9（9）：727-728.

［5］ Sawyer CH，Everett JW，Green T.The rabbit diencephalon in stereo taxic coordinates［J］.Comp Neurol，1954，101（3）：801-824.

［6］ 王擁軍.神經(jīng)病學(xué)臨床評定量表［M］.北京：中國友誼出版社，2005：283.

［7］ 羅侃，劉蘇中，徐潤，等.臨床應(yīng)用醒腦靜注射液的綜合總結(jié)［J］.中國中醫(yī)急癥，1997，6（3）：119-120.

［8］ 梁輝，陳虎，高穎，等.麝香酮抗局灶性腦缺血損傷的實(shí)驗研究［J］.中成藥，2003，25（3）：225-227.

［9］ 蔣紅蘭，匡忠生，李翎，等.石菖蒲冰片對神經(jīng)細(xì)胞缺氧性損傷的保護(hù)作用［J］.廣州中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報，2003，20（1）：63-65.

［10］王小紅，胡江鴻，沈云志.醒腦靜聯(lián)合烏司他丁對重癥急性胰腺炎大鼠腦損傷的保護(hù)作用［J］.天津醫(yī)藥，2013，41（4），349-352.

［11］ Echevarria M，Munoz-cabello AM，Sanchezsilva R，et al. Development of cytosolic hypoxia and hypoxiainducible factor stabiliazation are facilitated by aquaporin-1 expression［J］.J Biol Chem，2007，282（41）：30207-30215.

［12］Borgnia M，Nielson S，Engel A，et al.Cellular and molecular biology of the aquaporin water channels［J］.Annu Rev Biochem，1999，68（4）：425-458.

［13］Man ley CT，F(xiàn)ujimura M，Ma T，et al.Aquaporin-4 delection in mice reduces brain edema after acute water intoxication and is chemic stroke［J］.Nat Med，2000，6（2）：159-163.

［14］Solenov E，Watanabe H，Manley GT，et al.Sevenfold-reduced osmotic water permeability in primary astrocyte cultures from AQP-4-deficient mice，measured by a fluorescence quenching method［J］.American Journal of Physiology-Cell Physiology，2004，286（2）：426-432.

［15］劉亞敏，張賜安，徐秋英，等.全腦缺血再灌注大鼠腦組織水通道蛋白-4 mRNA的表達(dá)及藥物對其影響［J］.中國中醫(yī)急癥，2002，11（6）：474-475.

［16］張青，謝曉麗，王其新，等.醒腦靜合生脈注射液對大鼠腦出血后腦組織內(nèi)水通道蛋白表達(dá)的影響［J］.中國實(shí)驗方劑學(xué)雜志，2012，18（21）：243-247.

［17］范麗娜，胡風(fēng)云，王春芳，等.缺血性昏迷的實(shí)驗研究［J］.世界中西醫(yī)結(jié)合雜志，2014，9（4）：368-374.

［18］徐元虎.醒腦靜注射液的藥理藥效學(xué)研究與臨床應(yīng)用現(xiàn)狀［J］.現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志，2010，19（4）：507.

［19］劉洪章，馬志偉，劉毅，等.醒腦靜注射液輔助治療繼發(fā)性腦損傷［J］.中國實(shí)驗方劑學(xué)雜志，2011，17（15）：248.

［20］Keep RF，Xi G，Hua Y，et al.The deleterious or beneficial effects of different agents in intracerebral hem orrhage：think big，think small，or is hematoma size important［J］.Stroke，2005，36（12）：1594-1596.

［21］ Tang Y，Cai D，Chen Y.Thrombin inhibits aquaporin 4 expression through protein kinase C-dependent pathway in cultured astrocytes［J］.Journal of Molecular Neuroscience，2007，31（1）：83-93.

［22］陳珊，徐國海，胡衍輝.烏司他丁聯(lián)合甘油果糖對大鼠腦出血后水通道蛋白4的影響［J］.臨床麻醉學(xué)雜志，2012，28（3）：278-281.

［23］Oh SH，Lee JG，Na SJ，et al.Prediction of early clinical severity and extent of neuronal damage in anterior circulation infaction using the initial serum neuron-specific enolase level［J］.Aach Neurol，2003，60（1）；37-41.

［24］ Fassbender K，Sehmidt R，Sehrcincr A，et al.Leakage of brainoriginated proteins in peoteins in pefipheral blood：temporal profile and diagnose-tic value in early ischcmic stroke［J］.J Nerrol Sci，1997，148（1）：101-105.

［25］于宗明，李湘青.烏司他丁對腦出血患者血清hs-CRP和NSE的影響［J］.山東醫(yī)藥，2013，53（37）：64-65.

［26］李綿綿，樓文文，梅永成.烏司他丁對嬰幼兒體外循環(huán)心臟病人血漿NSE和S100蛋白的影響［J］.現(xiàn)代實(shí)用醫(yī)學(xué)，2008，20（9）：679-681.

［27］韓瀟，王瑩潔，朱昌來.醒腦靜注射液在體外循環(huán)家兔的腦保護(hù)作用［J］.江蘇醫(yī)藥，2014，40（3）：258-260.

［28］涂悅，楊細(xì)平，商崇智，醒腦靜對顱腦創(chuàng)傷的保護(hù)作用［J］.中國應(yīng)用生理學(xué)雜志，2014，30（3）：230-236.

［30］顧懷金，李根，萬東.醒腦靜注射液治療急性腦出血的臨床療效及對血清hs-CRP和NSE的影響［J］.中國實(shí)驗方劑學(xué)雜志，2014，20（14）：178-181.

Effects of Ulinastatin Combined with Xingnaojing injection on Neuron Specific Enolase and Aquaporin-4 of the Incerebral Hemorrhage Model in Rabbit

TONG Liyan，JIN Xin，HU Caibao，et al. Hangzhou Traditional Chinese Medical Hospital，Zhejiang，Hangzhou 310007，China

Objective：To observe the effect of ulinastatin（UTI）combined with xingnaojing（XNJ）injection on serum neuron-specific enolase（NSE）and Aquaporin-4（AQP-4）on rabbit model of incerebral hemorrhage.Methods：40 successful model of New Zealand rabbits were randomly divided into 4 groups，each group of 10：incerebral hemorrhage model group（Group M）and UTI in treatment group（Group U）and XNJ in treatment group（Group X）and UTI combined with XNJ in treatment group（Group UX）.The contents of NSE and AQP-4 in arterial blood of each rabbit were checked by ELISA method at before modeling（0 d），and treatment 1st，3rd，5th，7thday.Results：NSE and AQP-4 levels were elevated after the success of modeling.Compared with Group M，at the 1st day，the level of NSE and AQP-4 of each group was no significant statistical difference（P＞0.05）；At the 3rd to 7thdays，NSE of each group was decreased，there was statistically significant（P＜0.05）；AQP-4 of Group U at 7thday and Group X at 5thto 7thdays and Group UX at 3rd to 7th days were all declined，there are statistically significant（P＜0.05）.Compared with UX group，at the 7th day，NSE level of Group U and Group X were higher，there was statistically significant，（P＜0.05）；AQP-4 of Group X were no significant statistical difference（P＞0.05）；AQP-4 of Group U was higher at 5th and 7th days，there was significant difference（P＜0.05）.Conclusion：UTI combined with XNJ treatment can make the incerebral hemorrhage model in rabbit arterial blood NSE and AQP-4 declined，has certain brain protective effect on incerebral hemorrhage.

Ulinastatin；Xingnaojing；Incerebral hemorrhage；Rabbit；NSE；AQP-4

R285.5

A

1004-745X（2015）04-0586-04

10.3969/j.issn.1004-745X.2015.04.007

2014-11-20）

天普科學(xué)研究基金資助項目 （01200919）；浙江省科技廳重癥醫(yī)學(xué)科技創(chuàng)新團(tuán)隊項目（2011R50018-02）；浙江省醫(yī)藥衛(wèi)生科技計劃研究項目（2013KYB004）；浙江省中醫(yī)藥衛(wèi)生科技計劃研究項目（2014ZB091）

△通信作者（電子郵箱：zjicu1996@163.com）