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        復(fù)合菌生物轉(zhuǎn)化白酒糟發(fā)酵條件的優(yōu)化

        2015-01-03 01:14:57焦肖飛劉建學(xué)韓四海李佩艷羅登林張衛(wèi)衛(wèi)徐寶成
        食品科學(xué) 2015年17期
        關(guān)鍵詞:白地酒糟麩皮

        焦肖飛,劉建學(xué)*,韓四海,李 璇,李佩艷,羅登林,張衛(wèi)衛(wèi),徐寶成

        復(fù)合菌生物轉(zhuǎn)化白酒糟發(fā)酵條件的優(yōu)化

        焦肖飛,劉建學(xué)*,韓四海,李 璇,李佩艷,羅登林,張衛(wèi)衛(wèi),徐寶成

        (河南科技大學(xué)食品與生物工程學(xué)院,河南 洛陽(yáng) 471023)

        以未發(fā)酵白酒糟培養(yǎng)基為對(duì)照組,探討不同菌種組合以及發(fā)酵條件對(duì)固態(tài)發(fā)酵白酒糟中蛋白含量的影響,旨在提高酒糟中真蛋白的含量。選用枯草芽孢桿菌、白地霉和產(chǎn)朊假絲酵母對(duì)白酒糟進(jìn)行單菌和復(fù)合菌發(fā)酵實(shí)驗(yàn),結(jié)果顯示三菌組合發(fā)酵效果最好。通過(guò)三菌單因素發(fā)酵試驗(yàn)及正交試驗(yàn)確定最佳發(fā)酵條件為:添加15%的麩皮和2%的尿素,先接種5%的枯草芽孢桿菌和10%的白地霉30℃培養(yǎng)24 h,然后接種5%的產(chǎn)朊假絲酵母30℃培養(yǎng)72 h,此時(shí)真蛋白的含量為24.85%,粗蛋白含量達(dá)32.09%,粗纖維含量降低到17.66%。

        白酒糟;復(fù)合菌發(fā)酵;真蛋白;條件優(yōu)化

        酒糟是釀酒制造業(yè)所產(chǎn)生的主要廢棄物,據(jù)報(bào)道,2013年上半年產(chǎn)生了2 000萬(wàn)余噸的白酒糟[1],經(jīng)過(guò)晾曬去除多余水分后,干白酒糟年產(chǎn)量達(dá)到400萬(wàn)t以上[2]。目前對(duì)酒糟的研究主要包括以下方面:從酒糟中提取纖維素[3]、植酸[4]、氨基酸[5]和蛋白質(zhì)[6]等;利用酒糟培養(yǎng)多種食用菌(如靈芝[7]、雞腿菇[8]、秀珍菇[9]、雙孢菇[10]等);利用酒糟制取甘油[11];利用酒糟釀醋[12];利用酒糟厭氧發(fā)酵回收沼氣[13];利用酒糟發(fā)酵生產(chǎn)燃料乙醇[14];生產(chǎn)酶制劑[15];生產(chǎn)飼料[16-18]。

        鮮白酒糟因其產(chǎn)量大、不易貯藏與運(yùn)輸,目前主要是做廢棄物處理或經(jīng)晾曬后用作粗飼料,但由于價(jià)格低廉,經(jīng)濟(jì)效益不夠明顯,造成了資源的巨大浪費(fèi)和對(duì)周圍環(huán)境的嚴(yán)重污染。而酒糟蛋白的提取是酒糟綜合利用及深加工的重要途徑,提取的蛋白質(zhì)可以加工成多種高蛋白的食品,作為調(diào)味品和保健品基料應(yīng)用到食品工業(yè)中[19],具有顯著的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益,且植物蛋白相對(duì)于動(dòng)物蛋白,具有良好的消化率和動(dòng)物蛋白無(wú)法比擬的功能,如降低膽固醇水平、減少癌癥的發(fā)生、改善心血管疾病的癥狀等[20]。

        由于單菌種對(duì)酒糟蛋白質(zhì)的提高有限,本實(shí)驗(yàn)選用生育周期短、繁殖能力強(qiáng)、生產(chǎn)條件不嚴(yán),能分泌多種酶系,具有降解淀粉、纖維素和半纖維素能力的枯草芽孢桿菌,能同化多種有機(jī)氮源和尿素并可利用木聚糖、纖維素等大分子難降解物質(zhì),而且能有效轉(zhuǎn)化殘?zhí)?、有機(jī)酸、脂肪酸 等物質(zhì)的白地霉[21],以及能大量繁殖、蛋白質(zhì)可利用率高[22],且無(wú)毒副作用的產(chǎn)朊假絲酵母作為發(fā)酵菌種,利用多菌株間的協(xié)同作用,對(duì)白酒糟進(jìn)行固態(tài)協(xié)同發(fā)酵轉(zhuǎn)化,更能充分利用酒糟的碳源、氮源,使發(fā)酵產(chǎn)物中的蛋白含量明顯提高,尤其是真蛋白含量,為白酒糟開(kāi)發(fā)食品蛋白質(zhì)提供依據(jù)。該產(chǎn)品原料來(lái)源豐富、生產(chǎn)成本低,具有良好的發(fā)展前景。

        1 材料與方法

        1.1材料、菌種、培養(yǎng)基與試劑

        白酒糟由河南省伊川杜康酒廠提供,含水量為65%~70%,烘干保存?zhèn)溆茫畸熎べ?gòu)于當(dāng)?shù)亍?/p>

        枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis,B)由河南科技大學(xué)食品與生物工程學(xué)院實(shí)驗(yàn)室提供;白地霉(Geotrichum candidum,G)購(gòu)自江南大學(xué);產(chǎn)朊假絲酵母(Candida utilis,C)由河南省科學(xué)院生物研究所提供。

        LB培養(yǎng)基:121℃條件下滅菌20 min;PDA培養(yǎng)基:115℃條件下滅菌20 min;YPD培養(yǎng)基:115℃條件下滅菌20 min;基本固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基:取白酒糟13.5 g(90份,以干質(zhì)量計(jì))、加蒸餾水19.5 mL(130份)、麩皮1.5 g(10份)、尿素0.3 g(2份)充分混合后,在121℃條件下滅菌處理30 min,冷卻后備用。所用試劑均為國(guó)產(chǎn)分析純。

        1.2儀器與設(shè)備

        FA1004萬(wàn)分之一天平 上海上平儀器有限公司;101-2型電熱鼓風(fēng)干燥箱 天津市泰斯特儀器有限公司;YXQ-LS-SⅡ高壓蒸汽滅菌鍋、SX2-4-10高溫箱電阻爐 上海博迅實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠;SW-CJ-1D型超凈工作臺(tái) 蘇州凈化設(shè)備有限公司;DH-500電熱恒溫培養(yǎng)箱 北京中興偉業(yè)儀器有限公司;HQY-C氣浴恒溫振蕩器 金壇市宏科儀器廠;CXC-06粗纖維測(cè)定儀 上海新嘉有限公司;100~1 000μL移液槍 上海恒奇儀器儀表有限公司;老本行150T多功能粉碎機(jī) 鉑歐五金廠。

        1.3方法

        1.3.1菌種的活化

        無(wú)菌操作下挑取枯草芽孢桿菌一環(huán),接種于LB斜面培養(yǎng)基上,37℃條件下培養(yǎng)24 h;挑取白地霉一環(huán),接種于PDA斜面培養(yǎng)基上,30℃條件下培養(yǎng)24 h;挑取產(chǎn)朊假絲酵母一環(huán),接種于YPD斜面培養(yǎng)基上,30℃條件下培養(yǎng)24 h。為保證存活效果,3種菌種至少各培養(yǎng)3管。

        1.3.2菌種的擴(kuò)大培養(yǎng)

        枯草芽孢桿菌的擴(kuò)大培養(yǎng):配制LB液體培養(yǎng)基,分裝100 mL于250 mL三角瓶中,121℃條件下滅菌20 min后冷卻,接種枯草芽孢桿菌活化菌,在37℃、150 r/min條件下?lián)u床培養(yǎng)24 h;白地霉的擴(kuò)大培養(yǎng):配制PDA液體培養(yǎng)基,分裝100 mL于250 mL三角瓶中,115℃條件下滅菌20 min后冷卻,接種白地霉活化菌,在28℃、150 r/min條件下?lián)u床培養(yǎng)24 h;產(chǎn)朊假絲酵母的擴(kuò)大培養(yǎng):配制YPD液體培養(yǎng)基,分裝100 mL于250 mL三角瓶中,115℃條件下滅菌20 min后冷卻,接種產(chǎn)朊假絲酵母活化菌,在28℃、150 r/min條件下?lián)u床培養(yǎng)24 h。

        1.3.3平板點(diǎn)種實(shí)驗(yàn)

        取基本固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基于三角瓶中,加150 mL蒸餾水浸泡48 h,取100 mL浸提液,加2 g瓊脂,121℃條件下滅菌20 min,倒平板。無(wú)菌操作分別點(diǎn)種:枯草芽孢桿菌、產(chǎn)朊假絲酵母、白地霉,30℃條件下恒溫培養(yǎng)24 h,觀察菌落生長(zhǎng)情況。

        1.3.4拮抗實(shí)驗(yàn)

        將枯草芽孢桿菌、產(chǎn)朊假絲酵母、白地霉3種菌,兩兩交叉劃線接種于普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上,30℃條件下培養(yǎng)24 h,觀察十字交叉處是否有被抑制而發(fā)生菌落萎縮和消失的現(xiàn)象。

        1.3.5單菌種發(fā)酵實(shí)驗(yàn)

        取基本固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基,分別按15 mL/100 g的接種量接入單菌種,于30℃條件下恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)72 h。

        1.3.6混菌發(fā)酵實(shí)驗(yàn)

        取基本固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基,將三菌兩兩組合,按15 mL/100 g的總接種量分別接入雙菌組合(接種比例為1∶1)和三菌(接種比例為1∶1∶1)混合發(fā)酵,于30℃條件下恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)72 h。

        1.3.7三菌發(fā)酵單因素試驗(yàn)

        接種方式:在m(酒糟)∶m(麩皮)=9∶1(麩皮添加量為10%),接種總量為15 mL/100 g(白地霉(G)∶枯草芽孢桿菌(B)∶產(chǎn)朊假絲酵母(C)=1∶1∶1),尿素添加量為2%的條件下,將其接種方式設(shè)定為同時(shí)接種B+C+G發(fā)酵72 h(Ⅰ組);先接種B發(fā)酵24 h,再接種C+G發(fā)酵72 h(Ⅱ組);先接種G發(fā)酵24 h,再接種B+C發(fā)酵72 h(Ⅲ組);先接種B+G發(fā)酵24 h,再接種C發(fā)酵72 h(Ⅳ組);同時(shí)接種B+C+G發(fā)酵96 h(Ⅴ組)。發(fā)酵結(jié)束后測(cè)定其粗蛋白、真蛋白和粗纖維含量。

        接種量:在m(酒糟)∶m(麩皮)=9∶1(麩皮添加量為10%),尿素添加量為2%,先接種B+G發(fā)酵24 h,再接種C發(fā)酵72 h的條件下,將G+B+C混合接種量(mL/100 g)設(shè)定為5+5+10、5+10+10、5+5+5、5+10+5、10+5+5。發(fā)酵結(jié)束后測(cè)定其粗蛋白、真蛋白和粗纖維含量。

        尿素添加量:在m(酒糟)∶m(麩皮)=9∶1(麩皮添加量為10%),尿素添加量為2%,先接種10 mL/100 g白地霉和5 mL/100 g枯草芽孢桿菌發(fā)酵24 h,再接種5 mL/100 g產(chǎn)朊假絲酵母發(fā)酵72 h的條件下,將尿素添加量設(shè)定為1.5%、2%、2.5%、3%、3.5%,發(fā)酵結(jié)束后測(cè)定其粗蛋白、真蛋白和粗纖維含量。

        麩皮添加量:在尿素添加量為2.5%,先接種10 mL/100 g白地霉和5 mL/100 g枯草芽孢桿菌發(fā)酵24 h,再接種5 mL/100 g產(chǎn)朊假絲酵母發(fā)酵72 h的條件下,將麩皮的添加量設(shè)定為5%、10%、15%、20%、25%,發(fā)酵結(jié)束后測(cè)定其粗蛋白、真蛋白和粗纖維含量。

        1.3.8正交試驗(yàn)

        以接種方式、接種量(G+B+C)、尿素添加量和麩皮的添加量為變量,以真蛋白含量為指標(biāo),進(jìn)行L16(44)正交試驗(yàn),確定最佳發(fā)酵條件。

        1.3.9測(cè)定方法

        粗蛋白含量測(cè)定:參照GB 5009.5—2010《食品中蛋白質(zhì)的測(cè)定》中的凱氏定氮法。

        真蛋白含量的測(cè)定[23]:稱取0.5 g樣品,置于250 mL燒杯中,加蒸餾水50 mL,電爐加熱煮沸,加入10%CuSO4·5H2O 20 mL,在攪拌下加2.5%NaOH 20 mL,搖勻,室溫放置2 h,沉淀物用中性快速定性濾紙過(guò)濾,并用煮開(kāi)的蒸餾水洗滌燒杯和沉淀物數(shù)次,直至洗出液無(wú)硫酸根離子(用10%BaSO4溶液檢驗(yàn)),最后連同濾紙一起于80℃烘箱中烘至略潮,移入凱氏燒瓶中,消化后用凱氏定氮法測(cè)定樣品中真蛋白含量,同時(shí)作空白對(duì)照(對(duì)應(yīng)加入一塊濾紙消化)。

        粗纖維含量的測(cè)定:粗纖維測(cè)定儀。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 3種菌在基本固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)情況

        圖1 3 種菌在基本固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)Fig.1 Growth status of Bacillus subtilis, Candida utilis and Geotrichum candidum on solid basal medium

        如圖1所示,培養(yǎng)基上3種菌落均能良好生長(zhǎng),說(shuō)明基本固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基能滿足枯草芽孢桿菌、白地霉和產(chǎn)朊假絲酵母的生長(zhǎng)需求,可以選擇其為發(fā)酵菌種。

        2.2拮抗實(shí)驗(yàn)

        圖2 3 種菌的拮抗實(shí)驗(yàn)結(jié)果Fig.2 Antagonism of Bacillus subtilis, Candida utilis and Geotrichum candidum

        如圖2所示,平板上3種菌均生長(zhǎng)良好,兩兩交叉處無(wú)菌落萎縮或消失現(xiàn)象,說(shuō)明3種菌之間沒(méi)有拮抗作用,可以用于混菌發(fā)酵實(shí)驗(yàn)。

        2.3單菌種發(fā)酵和混菌發(fā)酵研究

        圖3 不同單菌種對(duì)發(fā)酵效果的影響Fig.3 Influence of different pure cultures on the contents of true protein, crude protein and crude fiber

        由圖3可知,枯草芽孢桿菌和白地霉具有較好的降解纖維素的能力,與空白對(duì)照組相比,分別降低了4.22%和3.90%,白地霉和產(chǎn)朊假絲酵母具有較好的轉(zhuǎn)化蛋白的能力,真蛋白含量分別提高了9.52%和9.60%。三菌發(fā)酵效果最好,粗蛋白含量可以達(dá)到28.95%,真蛋白含量可以達(dá)到22.63%,粗纖維含量降低為19.96%。

        2.4三菌發(fā)酵條件優(yōu)化

        2.4.1接種方式對(duì)發(fā)酵效果的影響

        表1 不同接種方式對(duì)發(fā)酵效果的影響Table1 Influence of different inoculation methods on the contents of true protein, crude protein and crude fiber

        由表1可知,當(dāng)先接種白地霉和枯草芽孢桿菌發(fā)酵24 h,再接種產(chǎn)朊假絲酵母發(fā)酵72 h時(shí)(Ⅳ組),粗蛋白含量和真蛋白含量最高,分別為29.78%和23.01%,粗纖維含量最低,為18.57%。這可能是因?yàn)榫N的生長(zhǎng)周期不完全相同,產(chǎn)酶種類對(duì)菌種間的協(xié)同作用有影響,當(dāng)先接種白地霉和枯草芽孢桿菌時(shí),能降解一部分粗纖維,并分解淀粉為單糖,24 h后接種產(chǎn)朊假絲酵母,酵母能利用已被分解的單糖和小分子物質(zhì)合成蛋白,從而提高發(fā)酵產(chǎn)物中的蛋白含量。

        2.4.2接種量對(duì)發(fā)酵效果的影響

        微生物在生長(zhǎng)過(guò)程中要經(jīng)歷遲緩期、對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期、穩(wěn)定生長(zhǎng)期和衰亡期,遲緩期的存在會(huì)延長(zhǎng)微生物正常的生長(zhǎng)周期,所以應(yīng)盡量縮短遲緩期,而適當(dāng)增大接種量可以縮短、甚至消除遲緩期[24]。由表2可知,隨著總接種量的增加,發(fā)酵產(chǎn)物的真蛋白質(zhì)含量先升高后降低,當(dāng)白地霉的接種量為10 mL/100 g,枯草芽孢桿菌的接種量為5 mL/100 g,產(chǎn)朊假絲酵母的接種量為5 mL/100 g時(shí),粗蛋白含量和真蛋白含量最高,分別為30.53%和23.47%,粗纖維含量最低,為18.18%。但是接種量過(guò)多時(shí),會(huì)使菌種間競(jìng)爭(zhēng)性的利用營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),反而不利于菌種的生長(zhǎng)發(fā)酵,會(huì)影響發(fā)酵效果,當(dāng)總接種量為25 mL/100 g時(shí),粗蛋白和真蛋白的含量分別為29.18%和22.84%,粗纖維的含量為18.38%。

        表2 不同接種量對(duì)發(fā)酵效果的影響Table2 Influence of different inoculum sizes on the contents of true protein, crude protein and crude fiber

        2.4.3尿素添加量對(duì)發(fā)酵效果的影響

        圖4 不同尿素添加量對(duì)發(fā)酵效果的影響Fig.4 Influence of urea concentration on the contents of true protein, crude protein and crude fiber

        由圖4可知,添加尿素能提高發(fā)酵產(chǎn)物蛋白質(zhì)含量,隨著尿素添加量的增加,粗蛋白含量增加;當(dāng)尿素添加量為2.5%時(shí),真蛋白含量最高,達(dá)到24.15%,粗蛋白含量為31.32%,粗纖維含量最低,為17.97%。當(dāng)?shù)刺砑恿康陀?.5%時(shí),不能滿足混菌生長(zhǎng)的需要,菌體生長(zhǎng)緩慢,發(fā)酵產(chǎn)物的蛋白含量降低,尿素添加量1.5%時(shí),粗蛋白和真蛋白的含量分別為29.65%和23.06%,粗纖維含量為18.73%;當(dāng)?shù)刺砑恿扛哂?.5%時(shí),微生物對(duì)外加氮源的利用能力有限,不能將過(guò)量的無(wú)機(jī)氮源轉(zhuǎn)化為菌體蛋白,尿素添加量3.5%時(shí),粗蛋白和真蛋白含量分別為31.14%和23.51%,粗纖維含量為18.29%。

        2.4.4麩皮添加量對(duì)發(fā)酵效果的影響

        微生物在生長(zhǎng)代謝過(guò)程中需要吸收各種有機(jī)碳水化合物構(gòu)建新的細(xì)胞組分,所以添加適量的碳源可以促進(jìn)菌體的生長(zhǎng)代謝,有效提高發(fā)酵產(chǎn)物的蛋白含量,但是碳源過(guò)高反而會(huì)抑制微生物的生長(zhǎng)。由圖5可知,當(dāng)麩皮的添加量小于15%時(shí),隨著麩皮的添加量增多,蛋白含量呈增長(zhǎng)趨勢(shì)。5%的麩皮添加量時(shí),粗蛋白和真蛋白的含量分別為29.26%和22.69%,粗纖維的含量為18.44%;當(dāng)酒糟的添加量為85%,麩皮的添加量為15%時(shí),粗蛋白含量和真蛋白含量最高,分別為32.15%和24.92%,粗纖維含量最低,為17.62%。當(dāng)麩皮的添加量大于15%時(shí),隨著麩皮的添加量增多,蛋白含量呈降低趨勢(shì)。25%的麩皮添加量時(shí),粗蛋白和真蛋白的含量分別為31.03%和24.17%,粗纖維的含量為17.89%。

        圖5 不同麩皮添加量對(duì)發(fā)酵效果的影響Fig.5 Influence of wheat bran concentration on the contents of true protein, crude protein and crude fiber

        2.4.5正交試驗(yàn)結(jié)果

        表3 正交試驗(yàn)結(jié)果Table3 Results of orthogonal array experiments

        表4 正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)方差分析Table4 Analysis of variance of the orthogonal designTab

        由表3可知,影響真蛋白含量的主次因素為A>D>B>C,最佳條件組合為A4B4C3D2。且由因素C的K2和K3可以看出兩水平結(jié)果較為相近。因?yàn)檎辉囼?yàn)中沒(méi)有進(jìn)行A4B4C3D2組試驗(yàn),為了確定其準(zhǔn)確性,在此條件下做驗(yàn)證實(shí)驗(yàn),測(cè)得發(fā)酵產(chǎn)物真蛋白的含量為24.93%。且A4B4C2D2試驗(yàn)組測(cè)得的發(fā)酵產(chǎn)物真蛋白的含量為24.85%,與24.93%相差不大,粗蛋白含量達(dá)32.09%,粗纖維含量降低到17.66%。綜合考慮成本原因,最終選擇A4B4C2D2組為最佳試驗(yàn)組。由方差分析得到4個(gè)因素對(duì)發(fā)酵產(chǎn)物中真蛋白含量的提高均有顯著影響。

        3 結(jié) 論

        枯草芽孢桿菌、白地酶和產(chǎn)朊假絲酵母3種菌作為蛋白轉(zhuǎn)化菌來(lái)生產(chǎn)飼料用蛋白或食品中間物,因其不產(chǎn)生毒素而安全可靠。

        對(duì)固態(tài)發(fā)酵過(guò)程中提取蛋白的影響因素進(jìn)行了研究。結(jié)果表明接種方式、接種量、尿素添加量、麩皮添加量對(duì)發(fā)酵產(chǎn)物中的真蛋白均有顯著性影響,影響因素主次為接種方式>麩皮添加量>接種量>尿素添加量。

        通過(guò)正交試驗(yàn)進(jìn)行了三菌混合發(fā)酵條件的優(yōu)化,得到較優(yōu)試驗(yàn)條件為添加15%的麩皮和2%的尿素,先接種5%的枯草芽孢桿菌和10%的白地霉30℃培養(yǎng)24 h,然后接種5%的產(chǎn)朊假絲酵母30℃培養(yǎng)72 h。在此條件下蛋白轉(zhuǎn)化率高,其粗蛋白含量可達(dá)32.09%,真蛋白含量達(dá)24.85%,粗纖維含量降低到17.66%。

        [1] 王曉力. 白酒糟生產(chǎn)高蛋白飼料研究進(jìn)展及前景[J]. 中獸醫(yī)醫(yī)藥雜志, 2013, 32(6)∶ 34-36.

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        Optimization of Mixed-Culture Fermentation Conditions for Biotransformation of Distilled Spirit Lees

        JIAO Xiaofei, LIU Jianxue*, HAN Sihai, LI Xuan, LI Peiyan, LUO Denglin, ZHANG Weiwei, XU Baocheng
        (College of Food and Bioengineering, Henan University of Science and Technology, Luoyang 471023, China)

        With the aim of achieving increased true protein content of distilled spirit lees, this studyinvestigated the effects of different mixed cultures and solid-state fermentation conditions on protein content of distilled spirit lees. Comparison was carried out with the unfermented control group. Fermentation experiments were conducted with pure and mixed cultures ofBacillus subtilis,Geotrichum candidumandCandida utilis, and the best results were obtained when all the three strains were used together. By the combined use of one-factor-at-a-time and orthogonal array design methods, the optimal fermentation conditions were determined as follows∶ addition of wheat bran and urea to distilled spirit lees in proportions of 15%and 2%, respectively, and sequential culture at 30℃for 24 hwith 5%Bacillus subtilisand 10%Geotrichum candidumfollowed by 5%Candida utilisfor 72 h. The fermented lees under these conditions contained 24.85%true protein and 32.09%crude protein, and the crude fiber content was reduced to 17.66%.

        distilled spirit lees; mixed-culture fermentation; true protein; optimization of fermentation conditions

        Q939.99

        1002-6630(2015)17-0164-05

        10.7506/spkx1002-6630-201517031

        2014-11-26

        公益性行業(yè)(農(nóng)業(yè))科研專項(xiàng)(201413015);河南省重點(diǎn)攻關(guān)項(xiàng)目(142102310262)

        焦肖飛(1988—),女,碩士研究生,研究方向?yàn)檗r(nóng)產(chǎn)品副產(chǎn)物高值化利用技術(shù)。E-mail:jiaoxiaofei0204@163.com

        *通信作者:劉建學(xué)(1964—),男,教授,博士,研究方向?yàn)檗r(nóng)產(chǎn)品高值化利用及質(zhì)量檢測(cè)技術(shù)。E-mail:jx_liu@163.com

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