李 欣，何 敏，袁建平，王江海,*

（1.廣東科貿(mào)職業(yè)學(xué)院生物技術(shù)系，廣東 廣州 510430；2.中山大學(xué)海洋學(xué)院，廣東省海洋資源與近岸工程重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣東 廣州 510006）

亞麻籽中木脂素及其水解產(chǎn)物的分離、鑒定和抗氧化活性

李 欣1,2，何 敏1，袁建平2，王江海2,*

（1.廣東科貿(mào)職業(yè)學(xué)院生物技術(shù)系，廣東 廣州 510430；2.中山大學(xué)海洋學(xué)院，廣東省海洋資源與近岸工程重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣東 廣州 510006）

采用快速柱層析和制備薄層色譜相結(jié)合的新方法，從亞麻籽中分離木脂素開(kāi)環(huán)異落葉松脂酚二糖苷和對(duì)香豆酸苷甲酯。同時(shí)發(fā)現(xiàn)，亞麻籽開(kāi)環(huán)異落葉松脂酚二糖苷在酸水解時(shí)除生成開(kāi)環(huán)異落葉松脂酚和無(wú)水開(kāi)環(huán)異落葉松脂酚，還部分轉(zhuǎn)化為開(kāi)環(huán)異落葉松脂酚單糖苷。從亞麻籽的酸水解產(chǎn)物中分離出6個(gè)化合物，分別鑒定為：開(kāi)環(huán)異落葉松脂酚單糖苷、開(kāi)環(huán)異落葉松脂酚、無(wú)水開(kāi)環(huán)異落葉松脂酚、對(duì)香豆酸甲酯、阿魏酸甲酯和5-羥甲基糠醛；其中對(duì)香豆酸苷甲酯、對(duì)香豆酸甲酯和阿魏酸甲酯為首次從亞麻籽水解產(chǎn)物中分離獲得，分別由對(duì)香豆酸苷、對(duì)香豆酸和阿魏酸在水解時(shí)與甲醇發(fā)生酯交換形成。體外抗氧化測(cè)試結(jié)果表明，開(kāi)環(huán)異落葉松脂酚二糖苷、開(kāi)環(huán)異落葉松脂酚單糖苷和開(kāi)環(huán)異落葉松脂酚對(duì)1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl，DPPH）自由基、羥自由基（·OH）和超氧陰離子自由基（O2-·）均具有清除作用，且呈明顯的量效關(guān)系。

亞麻籽；木脂素；水解產(chǎn)物；抗氧化活性

木脂素是植物中廣泛存在的酚類(lèi)化合物，是植物雌激素中的一類(lèi)[1-2]。在所有谷物、豆類(lèi)、蔬菜和水果中，亞麻籽（Linum usitatissimum）木脂素開(kāi)環(huán)異落葉松脂酚（secoisolariciresinol，SECO）含量最高[3-4]。SECO在腸道微生物作用下可代謝為動(dòng)物雌激素腸二醇和腸內(nèi)脂[5-6]。木脂素具有降低血清膽固醇及減少Ⅱ型糖尿病、乳腺癌、前列腺癌和直腸癌等發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的生物活性[7-10]。亞麻籽中的SECO與糖苷結(jié)合，以開(kāi)環(huán)異落葉松脂酚二糖苷（secoisolariciresinol diglucoside，SDG）形式存在，SDG與3-羥基-3甲基戊二酸、對(duì)香豆酸苷、阿魏酸苷和草棉素糖苷等結(jié)合形成分子質(zhì)量約為4 000 D的SDG聚合物[4,11-12]。亞麻籽木脂素在分離提取時(shí)需通過(guò)水解將其酯鍵和糖苷鍵打斷[13-15]。SDG聚合物在堿水解后，SDG會(huì)游離出來(lái)，然后通過(guò)酸水解或酶水解使糖苷鍵斷裂，從SDG中釋放出SECO；在酸性條件下，SECO中相鄰的兩個(gè)羥基會(huì)發(fā)生縮合而脫去一個(gè)水分子，生成無(wú)水開(kāi)環(huán)異落葉松脂酚（anhydrosecoisolariciresinol，ASECO）[2,16]。研究發(fā)現(xiàn)，開(kāi)環(huán)異落葉松脂酚單糖苷（secoisolariciresinol monoglucoside，SMG）是SDG在人類(lèi)腸道微生物作用下脫掉糖苷生成SECO過(guò)程中的中間產(chǎn)物[4]；然而，在酸水解時(shí)是否產(chǎn)生SMG則未見(jiàn)報(bào)道。分離純化亞麻籽中木脂素的方法目前主要有反相高效液相制備色譜、高速逆流色譜、固相萃取和柱色譜等[11,17-20]。本實(shí)驗(yàn)采用快速柱層析分離（flash columnar chromatography，F(xiàn)CC）和制備薄層色譜（preparative thin layer chromatography，PTLC）相結(jié)合的方法，從亞麻籽粉中分離制備了SDG純品。并對(duì)亞麻籽木脂素酸水解產(chǎn)物進(jìn)行了分離和結(jié)構(gòu)鑒定，明確了化合物間的轉(zhuǎn)化關(guān)系。通過(guò)測(cè)定SDG及其酸水解產(chǎn)物SMG、SECO、ASECO的體外抗氧化活性，為亞麻籽木脂素的高效利用提供參考。

1 材料與方法

1.1材料與試劑

亞麻籽粉（含SDG約40%） 湖南德瑞生物產(chǎn)業(yè)集團(tuán)有限公司。

SECO（純度95%）、5-羥甲基糠醛（純度95%）美國(guó)Sigma-Aldrich公司；1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl，DPPH） 上海晶純實(shí)業(yè)有限公司；鄰苯三酚（焦性沒(méi)食子酸）、鄰二氮菲 上海國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；Tris-HCl生工生物工程（上海）股份有限公司；硅膠H（薄層層析用，粒度10～40μm） 青島海洋化工廠；可剪截型薄層層析板（鋁基硅膠G板） 天津市天河醫(yī)療有限公司；C18柱（500 mg/3 mL） 美國(guó)Supelco公司；PTLC板：玻璃板（20 cm×20 cm，2 mm）鋪10 g活化后的硅膠，硅膠層厚度約0.5 mm；制備柱（Φ＝20 mm，L= 30 cm）。

1.2儀器與設(shè)備

Alpha 1-4真空冷凍干燥儀 香港HUA-YEE儀器公司；Varian INOVA 500NB傅里葉變換超導(dǎo)核磁共振譜儀 美國(guó)Varian公司；雙聚焦磁質(zhì)譜儀 英國(guó)VG公司；Muhiskan Spectrum全波長(zhǎng)酶標(biāo)儀 美國(guó)賽默飛世爾科技公司；732N紫外分光光度計(jì) 上海精密科學(xué)儀器有限公司；Heidolph-4001旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀 北京博勵(lì)行儀器有限公司；SHZ-D（III）循環(huán)水式真空泵 鞏義市英峪予華儀器廠。

1.3亞麻籽堿水解產(chǎn)物的提取

稱(chēng)取10 g亞麻籽粉，加入60 mL體積分?jǐn)?shù)為70%的甲醇水溶液后提取3次；提取液合并后濃縮至約20 mL時(shí)進(jìn)行堿水解（反應(yīng)液NaOH濃度約為20 mmol/L）；在50℃水浴中保持1 h后，用醋酸調(diào)節(jié)pH值至5.0；低溫濃縮，加入無(wú)水硫酸鈉靜置過(guò)夜后，用甲醇洗滌回收；提取液經(jīng)減壓濃縮得到5.6 g浸膏，見(jiàn)圖1。取適量用少量乙醇溶解后，加入4倍量的硅膠吸附，再進(jìn)行FCC。依次用150 mL乙酸乙酯-乙醇（8.5∶1.5，V/V）、100 mL乙酸乙酯-乙醇（8∶2，V/V）和50 mL乙酸乙酯-乙醇（7∶3，V/V）的混合溶液梯度洗脫，每20 mL洗脫液收集一管，分離過(guò)程用薄層色譜法監(jiān)控，合并組成類(lèi)似的收集物，用PTLC純化（展開(kāi)劑：乙酸乙酯-乙醇8∶2，V/V），純化后的樣品經(jīng)濃縮后進(jìn)行冷凍干燥，得到2個(gè)化合物；其中化合物A為2.6 g，化合物B為290 mg。

1.4亞麻籽粉提取液水解產(chǎn)物的純化和鑒定

稱(chēng)取20 g亞麻籽粉的甲醇提取物，加25 mL水溶解，堿水解后，在1 mol/L HCl條件下，于95℃水浴中振蕩3 h；再用乙酸乙酯萃取3次，收集水相用C18柱純化；甲醇洗脫回收SMG后，用PTLC純化[展開(kāi)劑：乙酸乙酯-乙醇（8.5∶1.5，V/V）]，得到化合物1為白色固體，其質(zhì)量約44 mg。有機(jī)相合并濃縮后，再用硅膠吸附、上樣；采用FCC分離，分別用乙酸乙酯-石油醚（5∶5，V/V），乙酸乙酯-石油醚（8∶2，V/V）和乙酸乙酯淋洗，收集合并組分類(lèi)似的收集液；采用FCC和PTLC純化，得到化合物2（38 mg）、化合物3（47 mg）、化合物4（17 mg）、化合物5（14 mg）和化合物6（13 mg）5個(gè)化合物。過(guò)程見(jiàn)圖1。

圖1 亞麻籽SDG及主要水解產(chǎn)物提取路線Fig.1 Separation procedures of SDG and the main hydrolysates from flaxseeds

1.5 SDG及其酸水解產(chǎn)物的抗氧化活性測(cè)定

參照周先麗等[21]方法，采用酶標(biāo)儀微量法和紫外-可見(jiàn)光分光光度法，以VC為陽(yáng)性對(duì)照，分別測(cè)定SDG及其酸水解產(chǎn)物SMG、SECO和ASECO對(duì)DPPH自由基、羥自由基（·OH）和超氧陰離子自由基（O2-·）的清除能力。上述實(shí)驗(yàn)均設(shè)3次重復(fù)，計(jì)算清除率和半數(shù)清除率（IC50，Logit法計(jì)算）。

2 結(jié)果與分析

2.1亞麻籽堿水解產(chǎn)物的分離

劉大川等[18]采用硅膠柱層析甲醇-氯仿-冰醋酸混合溶劑洗脫分離木脂素。為了提高提取效率和木脂素的純度，本實(shí)驗(yàn)采用乙酸乙酯-乙醇梯度洗脫FCC分離、PTLC純化亞麻籽木脂素SDG。通過(guò)液相色譜測(cè)定SDG峰面積占總峰面積的比例，確定SDG的純度約為96%。結(jié)合核磁共振和質(zhì)譜分析結(jié)果，對(duì)SDG的結(jié)構(gòu)進(jìn)行了確認(rèn)。該方法所需的儀器簡(jiǎn)單，提取試劑無(wú)毒、無(wú)污染，提高了木脂素分離方法的安全性并降低了成本。

化合物A：白色無(wú)定形粉末；FAB-MSm/z686[M]+；1H NMR（CD3OD，500 MHz）δ：6.59（2H，d，J= 1.8 Hz，H-2, 2’），6.64（2H，d，J= 8.0 Hz，H-5, 5’），6.56（2H，dd，J= 1.8,8.0 Hz，H-6, 6’），2.61（2H，dd，J= 7.9,13.8 Hz，H-7, 7’a），2.68（2H，dd，J= 6.9,13.8 Hz，H-7, 7’b），2.12（2H，m，H-8, 8’），4.06（2H，dd，J= 5.6,9.9 Hz，H-9, 9’a），3.47（2H，dd，J= 6.4,9.9 Hz，H-9, 9’b），3.73（3H，s，OCH3），4.23（2H，d，J= 7.8 Hz，H-1a,1a’），3.21（2H，t，J= 7.8,9.0 Hz，H-2a, 2a’），3.25（2H，m，H-5a, 5a’），3.84（2H，brd，J= 2.3,11.8 Hz，H-6a-a/6a’-a），3.68（2H，dd，J= 5.5,11.8 Hz，H-6a-b/6a’-b）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[15]報(bào)道的波譜數(shù)據(jù)一致，確定化合物A為SDG。

化合物B：白色無(wú)定形粉末；FAB-MSm/z343[M-H]+；1H NMR（CDCl3, 500 MHz）δ：7.55（1H，d，J= 8.7 Hz，H-2），7.12（2H，d，J= 8.8 Hz，H-3,5），7.55（1H，d，J= 8.6 Hz，H-6），7.65（1H，d，J= 15.8 Hz，H-7），6.41（1H，d，J= 16.0 Hz，H-8），3.77（3H，s，OCH3），4.844（1H，s，Aro-OH），4.96（1H，d，J= 7.3 Hz，H-1a），3.70（1H，dd，J= 2.8,10.4 Hz，H-6a），4.96（1H，dd，J= 2.4,9.8 Hz，H-6b）。根據(jù)1H-NMR和質(zhì)譜分析結(jié)果，確定化合物B為Methyl CouAG。

研究表明，亞麻籽中的SDG與3-羥基-3甲基戊二酸連接構(gòu)成亞麻籽多聚體結(jié)構(gòu)的鏈狀骨架；對(duì)香豆酸苷和阿魏酸苷分別以酯鍵連接在該多聚體骨架上[4,22]。CouAG甲酯的形成說(shuō)明堿水解后多聚體酯鍵斷裂，并使對(duì)香豆酸苷和阿魏酸苷的糖苷配基的—COOH基團(tuán)暴露出來(lái)，與反應(yīng)液中的甲醇發(fā)生酯交換，生成CouAG甲酯和阿魏酸苷甲酯。

2.2亞麻籽粉提取液酸水解產(chǎn)物的分離

SDG在體內(nèi)的代謝需借助特定的腸道菌群。若體內(nèi)缺失該菌群，則SDG不能被人體吸收利用。因此，對(duì)亞麻籽木脂素酸水解產(chǎn)物的鑒別非常必要，且具有重要的應(yīng)用價(jià)值，有助于尋找更易吸收利用的木脂素衍生物。本實(shí)驗(yàn)對(duì)亞麻籽粉的酸水解液進(jìn)行了分離鑒定。水解液用乙酸乙酯萃取后，分別從水相和有機(jī)相中分離得到6種化合物，化合物結(jié)構(gòu)如圖2所示。

化合物1：白色無(wú)定形粉末；其結(jié)構(gòu)參數(shù)為：FAB-MSm/z524[M]+；1H NMR（CD3OD，500 MHz）δ：6.60（1H，d，J= 1.8 Hz，H-2），6.60（1H，d，J= 1.8 Hz，H-2’），6.65（2H，d，J= 7.9 Hz，H-5, 5’），6.56（1H，dd，J= 1.9,5.3 Hz，H-6），6.54（1H，dd，J= 2.0,5.3 Hz，H-6’）, 2.67（1H，dd，J= 7.3,13.6 Hz，H-7b），2.10（1H，m，H-8），1.94（1H，m，H-8’），4.05（1H，dd，J= 6.1,9.8 Hz，H-9a），3.47（1H，dd，J= 6.2,9.9 Hz，H-9b），3.64（1H，dd，J= 6.4,11.2 Hz，H-9’a），3.55（1H，dd，J= 6.0,11.0 Hz，H-9’b），4.21（1H，d，J= 7.8 Hz，H-1a），3.20（1H，t，J= 7.9,9.0 Hz，H-2a），3.23（1H，m，H-5a），3.84（1H，dd，J= 2.4,11.9 Hz，H-6a-a），3.68（1H，dd，J= 5.6,11.9 Hz，H-6a-b），3.74（3H，s，OCH3）；13C NMR（CD3OD，500 MHz） δ：134.0（C-1），133.8（C-1’），113.5（C-2），113.5（C-2’），148.7（C-3/3’），145.4（C-4/4’），115.7（C-5/5’），122.8（C-6），122.8（C-6’），35.9（C-7b），35.9（C-7a），35.5（C-7’a，7’b），41.4（C-8），43.9（C-8’），71.1（C-9a），71.1（C-9b），62.6（C-9’a），62.6（C-9’b），104.7（C-1a），75.2（C-2a），78.2（C-3a），71.7（C-4a），77.9（C-5a），62.8（C-6a-a），62.8（C-6a-b）和56.2（OCH3）。根據(jù)1H-NMR和13C-NMR譜及質(zhì)譜（fast atom bombardment mass spectrometry，F(xiàn)AB-MS）數(shù)據(jù)，確定化合物1為SMG。Clavel等[5]發(fā)現(xiàn)，梭狀芽孢桿菌能使SDG脫去2個(gè)糖基形成SECO和脫去1個(gè)糖基形成SMG，本研究表明，在酸水解時(shí)SDG也能部分脫去糖基生成SMG。

化合物2：白色無(wú)定形粉末；與SECO標(biāo)準(zhǔn)品的多個(gè)溶劑系統(tǒng)進(jìn)行薄層色譜鑒別，發(fā)現(xiàn)兩者的薄層色譜斑點(diǎn)Rf一致。用硫酸-乙醇顯色均呈藍(lán)色，結(jié)合1H-NMR譜和FAB-MS分析結(jié)果，確定化合物2為SECO。其結(jié)構(gòu)參數(shù)為：FAB-MSm/z362[M]+；1H NMR（CD3OD，500 MHz）δ：6.59（2H，d，J= 1.9 Hz，H-2, 2’），6.66（2H，d，J= 7.9 Hz，H-5, 5’），6.54（2H，dd，J= 1.9,7.9 Hz，H-6, 6’），2.56（2H，dd，J= 7.5,13.7 Hz，H-7,7’a），2.66（2H，dd，J= 6.8,13.8 Hz，H-7, 7’b），1.90（2H，brd，J= 6.1 Hz，H-8, 8’），3.58（2H，m，H-9,9’a），3.31（2H，m，H-9,9’b），3.74（3H，s，OCH3）。

化合物3：白色無(wú)定形粉末；其結(jié)構(gòu)參數(shù)為：FABMSm/z344[M]+；1H NMR（CDCl3，500 MHz）δ：6.84（2H，d，J= 1.7 Hz，H-2, 2’），7.13（2H，d，J= 8.0 Hz，H-5, 5’），6.92（2H，dd，J= 1.7,8.0 Hz，H-6, 6’），2.85（2H，dd，J= 7.8,13.8 Hz，H-7,7’a），2.92（2H，dd，J= 6.6,13.7 Hz，H-7,7’b），2.50（2H，m，H-8, 8’），4.25（2H，dd，J= 6.5,8.6 Hz，H-9,9’a），3.86（2H，dd，J= 5.6,8.7 Hz，H-9,9’b），4.16（3H，s，OCH3）。數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道[8]數(shù)據(jù)一致，確定化合物3為ASECO。

化合物4：白色無(wú)定形粉末；其結(jié)構(gòu)參數(shù)為：FAB-MSm/z179[M-H]+；1H NMR（CDCl3，500 MHz）δ：7.54（1H，d，J= 8.6 Hz，H-2），6.89（1H，d，J= 8.7 Hz，H-3），6.89（1H，d，J= 8.7 Hz，H-5），7.54（1H，d，J= 8.6 Hz，H-6），7.60（1H，d，J= 16.0 Hz，H-7），6.34（1H，d，J= 16.0 Hz，H-8），3.72（3H，s，OCH3）。1H-NMR譜和質(zhì)譜分析結(jié)果表明，化合物4為Methyl CouA。

化合物5：白色無(wú)定形粉末；其結(jié)構(gòu)參數(shù)為：FAB-MSm/z209[M-H]+；1H NMR（CDCl3，500 MHz）δ：7.32（1H，d，J= 8.6 Hz，H-2），6.87（1H，d，J= 8.7 Hz，H-5），7.14（1H，dd，J= 2.0,8.2 Hz，H-6），7.59（1H，d，J= 15.9 Hz，H-7），6.39（1H，d，J= 15.9 Hz，H-8），3.72（3H，s，OCH3），3.91（3H，s，AroOCH3）。1H-NMR譜和質(zhì)譜分析結(jié)果表明，化合物5為Methyl FeA。

化合物6：白色無(wú)定形粉末；與5-HMF標(biāo)準(zhǔn)品的多個(gè)溶劑系統(tǒng)進(jìn)行薄層色譜鑒別，發(fā)現(xiàn)兩者的薄層色譜斑點(diǎn)Rf一致。用硫酸-乙醇顯色均呈藍(lán)色，確定化合物6為5-HMF。5-HMF是己糖在酸性條件下的降解產(chǎn)物[23]。在SDG多聚體中含大量葡萄糖殘基[24]。前人在亞麻籽提取物中也曾分離出蔗糖[25]。5-HMF可能是亞麻籽中的己糖（如蔗糖等）或糖苷中的葡萄糖殘基經(jīng)酸水解形成的。

圖2 亞麻籽中SDG及其主要水解產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)Fig.2 Structures of SDG and its hydrolysates from flaxseeds

2.3 SDG及其酸水解產(chǎn)物的抗氧化活性

圖3 SDG、SMG、SECO和ASECO對(duì)DPPH自由基的清除作用Fig.3 Scavenging capability of SDG, SMG, SECO and ASECO against DPPH free radical

由圖3可知，SDG及其酸水解產(chǎn)物SMG、SECO和ASECO對(duì)DPPH自由基的清除率隨著質(zhì)量濃度增加而增加，呈明顯量效關(guān)系，IC50分別為2.85、3.32、2.75 mg/L和4.86 mg/L（對(duì)照VC的IC50為3.34 mg/L）；對(duì)·OH的清除作用隨著質(zhì)量濃度的增大，清除作用不斷增大（圖4），IC50分別為11.11、11.59、10.82 mg/L和19.88 mg/L（對(duì)照VC的IC50為11.90 mg/L）；對(duì)O2-·的清除能力同樣呈明顯的量效關(guān)系（圖5），IC50分別為7.40、8.25、6.91 mg/L和16.85 mg/L（對(duì)照VC的IC50為8.40 mg/L）。由此可見(jiàn)，木脂素SDG、SECO和SMG能夠有效清除自由基，具有較強(qiáng)的抗氧化活性。

圖4 SDG、SMG、SECO和ASECO對(duì)·OH的清除作用Fig.4 Scavenging capability of SDG, SMG, SECO and ASECO against hydroxyl free radical

圖5 SDG、SMG、SECO和ASECOO對(duì)的清除作用Fig.5 Scavenging capability of SDG, SMG, SECO and ASECO against superoxide anion radical

3 結(jié) 論

采用快速柱層析分離和制備薄層色譜相結(jié)合的方法，從亞麻籽粉中分離制備SDG，純度高，所用試劑無(wú)毒、無(wú)污染，提高了分離純化工藝的安全性和經(jīng)濟(jì)性。研究發(fā)現(xiàn)亞麻籽SDG在酸水解時(shí)除生成SECO和ASECO外，還會(huì)部分脫糖苷轉(zhuǎn)化為SMG。另外本實(shí)驗(yàn)從水解產(chǎn)物中分離出對(duì)香豆酸苷甲酯、對(duì)香豆酸甲酯和阿魏酸甲酯，它們分別是亞麻籽多聚體中的對(duì)香豆酸苷、對(duì)香豆酸和阿魏酸在水解時(shí)游離，并與甲醇發(fā)生酯交換形成的。體外抗氧化活性研究表明，亞麻籽SDG及其酸水解產(chǎn)物SMG、SECO、ASECO在體外均有較好的抗氧化活性，且呈明顯的量效關(guān)系。有學(xué)者認(rèn)為亞麻籽木脂素的抗腫瘤活性與它的抗氧化活性密切相關(guān)，需進(jìn)一步明確亞麻籽木脂素成分在體內(nèi)的轉(zhuǎn)化及其抗氧化活性。

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Separation, Identification and Antioxidant Activities of Lignans and Their Hydrolysates in Flaxseeds

LI Xin1,2, HE Min1, YUAN Jianping2, WANG Jianghai2,*(1. Department of Biotechnology, Guangdong Vocational College of Science and Trade, Guangzhou 510430, China; 2. Guangdong Provincial Key Laboratory of Marine Resources and Coastal Engineering, School of Marine Sciences, Sun Yat-Sen University, Guangzhou 510006, China)

In the present study, secoisolariciresinol diglucoside andp-coumaric acid methyl ester were separated from flaxseeds by a novel method combining flash column chromatography with preparative thin layer chromatography. Secoisolariciresinol diglucoside was transformed into secoisolariciresinol and anhydrosecoisolariciresinol or into secoisolariciresinol monoglucosides during the acid hydrolysis. Six compounds were isolated from the acid hydrolysates of flaxseeds, and were respectively identified as secoisolariciresinol monoglucoside, secoisolariciresinol, anhydrosecoisolariciresinol,p-coumaric acid methyl ester, ferulic acid methyl ester, and 5-hydroxymethyl-2-furfural on the basis of their spectral data.p-Coumaric acid glucoside methyl ester,p-coumaric acid methyl ester and ferulic acid methyl ester were separated for the first time from the flaxseed hydrolysates, which were produced by the transesterification ofp-coumaric acid glucoside,p-coumaric acid, and ferulic acid with methanol in hydrolysis. Interestingly, secoisolariciresinol diglucoside, secoisolariciresinol monoglucoside, and secoisolariciresinol had scavenging capabilities against 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) free radical, hydroxy radical and superoxide aion radicals, and had a good dose-effect relationship between their concentrations and antioxidant activities.

flaxseed; lignans; hydrolysates; antioxidant activities

TS201.2

1002-6630（2015）17-0099-05

10.7506/spkx1002-6630-201517019

2014-11-30

教育部高等學(xué)校博士學(xué)科點(diǎn)專(zhuān)項(xiàng)科研基金項(xiàng)目（20090171110015）；廣東省科技攻關(guān)計(jì)劃項(xiàng)目（2013B020311005）

李欣（1980—），女，副教授，博士，研究方向?yàn)樘烊划a(chǎn)物分離與應(yīng)用。E-mail：lylx08@126.com

*通信作者：王江海（1965—），男，研究員，博士，研究方向?yàn)楹Ｑ笊飳W(xué)。E-mail：wangjhai@mail.sysu.edu.cn