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        不同程度阿爾茨海默病患者血清可溶性Fas及其配體水平的變化

        2015-01-02 08:43:26陳同偉
        檢驗醫(yī)學 2015年6期
        關鍵詞:病程年齡血清

        陳同偉

        (嘉善縣中醫(yī)醫(yī)院檢驗科,浙江嘉善314100)

        隨著全球人口老齡化日益加劇,老年期認知障礙的發(fā)病率也逐漸增加,其中阿爾茨海默病(Alzheimer disease,AD)的發(fā)病率最高,已成為當今社會面臨的難題之一。AD是一種以進行性認知障礙和記憶能力損害為主的中樞神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病。有研究表明[1]在多種神經(jīng)系統(tǒng)疾病中存在細胞凋亡的異常,而 Fas/Fas配體(sFas ligand,F(xiàn)asL)系統(tǒng)在介導細胞凋亡過程中起到重要的信號傳遞作用。研究表明Fas介導的細胞凋亡參與了AD的病理生理過程[2]。為此,本研究通過檢測不同程度的AD患者的血清可溶性Fas(soluble Fas,sFas)及其配體(sFasL)水平,探討其與AD發(fā)生的關系。

        材料和方法

        一、研究對象

        選取2012年10月至2013年12月在嘉善縣中醫(yī)醫(yī)院住院的AD患者100例,男55例,女45例,年齡56~83歲,均符合美國精神障礙診斷與統(tǒng)計手冊(第4版)制定的AD診斷標準。根據(jù)臨床癡呆評定量表(clinical dementia rating,CDR)評分將AD患者分為輕度癡呆組(30例,男16例,女14例,年齡54~80歲)、中度癡呆組(45例,男24例,女21例,年齡57~84歲)和重度癡呆組(25例,男15例,女10例,年齡62~86歲)。另選取同期嘉善縣中醫(yī)醫(yī)院體檢者100例,根據(jù)臨床體檢結果有無異常分為老年疾病對照組和正常對照組。老年疾病對照組共54例,男28例,女26例,年齡60~87歲,包括17例糖尿病患者、18例高血壓患者、15例高血脂患者及4例其它內(nèi)分泌疾病患者。正常對照組共46名,男20名,女16名,年齡57~85歲,均無心腦血管疾病、無高血壓、無智能障礙、無神經(jīng)精神科疾病史、內(nèi)分泌疾病史及癡呆家族史,近期無感染性疾病。各組之間年齡及性別構成差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05),見表1。所有研究對象均簽署知情同意書。

        表1 AD組和對照組一般資料比較

        二、納入及排除標準

        1.納入標準 (1)根據(jù)神經(jīng)心理量表檢測證實有癡呆,簡易智能精神狀態(tài)量表(mini-mental state examination,MMSE)評分 <17(文盲)、20(小學)、24(中學及以上)測評確定;Hachinski缺血指數(shù)量表(Hachinski ischemic scale,HIS)<4分,不以抑郁為起病形式;(2)至少有兩項認知功能的受損:記憶力、計算力或定向力等;(3)記憶或其他認知功能進行性損害;(4)無意識障礙;(5)發(fā)病年齡在50~90歲;(6)進行性記憶力和其他認知功能障礙,不能用系統(tǒng)性疾病或其它腦部疾病來解釋;(7)病程半年以上。

        2.排除標準 (1)突然地卒中樣起病;(2)早期出現(xiàn)局灶性神經(jīng)系統(tǒng)特征,如偏癱、感覺喪生、視野缺損、共濟失調(diào);(3)早期或起病時出現(xiàn)癲癇發(fā)作或步態(tài)障礙;(4)近期有感染性疾病發(fā)生;(5)近期服用激素類藥物;(6)顱內(nèi)腫瘤、占位性病變等疾病。

        三、方法

        1.測試工具 (1)以MMSE為癡呆篩查工具,篩選對照組;(2)以HIS評定癡呆類型,4分以下多為AD;(3)以CDR評定癡呆程度。以上評定均由2名具有高級職稱的臨床醫(yī)生進行。

        2.標本的采集和測定 血樣本采集均經(jīng)當事人或家屬同意,患者于入院后次日早晨8點前抽取空腹靜脈血4 mL,室溫靜置凝集1 h后,以900×g離心10 min,取血清分裝于EP管中,置-70℃保存待檢。體檢者同樣按上述要求留取血樣保存待檢。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(enzymelinked immunosorbent assay,ELISA)檢測血清 sFas和sFasL水平,試劑盒購自美國R&D公司,嚴格按照操作說明書進行。測定標本在450 nm波長下的吸光度(A)值,根據(jù)標準曲線的直線回歸方程計算出sFas和sFasL水平。

        四、統(tǒng)計學方法

        采用SPSS 13.0軟件進行統(tǒng)計分析。數(shù)據(jù)均呈正態(tài)分布,采用±s表示,組間比較采用獨立樣本t檢驗,多組比較采用單因素方差分析,相關分析采用Pearson相關。以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

        結 果

        一、AD組、老年疾病對照組及正常對照組血清sFas、sFasL水平比較

        AD組血清sFas、sFasL水平明顯高于老年疾病對照組和正常對照組(P<0.01)。AD組輕度癡呆、中度癡呆及重度癡呆血清sFas、sFasL水平明顯高于正常對照組(P<0.01),且隨著癡呆程度的加重,血清sFas和sFasL水平也逐漸增高。見表2。

        二、AD患者血清 sFas和 sFasL與病程、年齡、MMSE評分及HIS評分的相關性分析

        血清sFas與年齡、病程、MMSE評分呈正相關(r值分別為 0.856、0.834、0.799,P <0.01),與 HIS評分呈負相關(r= -0.714,P <0.01);血清sFasL與年齡、病程呈正相關(r值分別為0.863、0.857,P <0.01),與 MMSE、HIS 評分呈負相關(r值分別為 -0.801、-0.745,P <0.01)。

        表2 AD組、老年疾病對照組及正常對照組血清sFas、sFasL水平比較 (±s,μg/L)

        表2 AD組、老年疾病對照組及正常對照組血清sFas、sFasL水平比較 (±s,μg/L)

        注:與正常對照組比較,*P<0.01;與老年疾病對照組比較,#P <0.01

        組別 例數(shù)sFas sFasL AD 組 100 52.4 ±16.7*#118.2 ±34.1*#輕度癡呆組 30 34.3 ±5.7*# 89.3 ±11.7*#中度癡呆組 45 50.4 ±8.5*# 107.4 ±22.1*#重度癡呆組 25 64.5 ±12.4*#123.5 ±29.5*#老年疾病對照組 54 20.3 ±8.3* 75.5 ±25.6*正常對照組46 12.4 ±5.5 51.8 ±22.7

        討 論

        細胞凋亡是機體在生長、發(fā)育過程中受到外來刺激時,為保持機體內(nèi)環(huán)境的一種自我調(diào)節(jié)方式,而Fas/FasL途徑是細胞凋亡中最主要的途徑之一。Fas屬腫瘤壞死因子(tumor necrosis factor,TNF)家族,主要在激活的B細胞、巨噬細胞、NK細胞上表達,F(xiàn)asL主要在激活的T細胞上表達,兩者結合可致表達Fas的細胞凋亡[2]。研究認為Fas抗原介導凋亡的機制是通過與之相應的配體(FasL)或單克隆抗體結合后發(fā)出凋亡信號,并傳遞至細胞內(nèi),調(diào)節(jié)基因轉(zhuǎn)錄,從而誘導細胞凋亡。細胞過度凋亡會引起神經(jīng)退行疾病,如AD。AD是常見的中樞神經(jīng)系統(tǒng)退行性病變。研究表明Fas介導的細胞凋亡參與了AD的疾病發(fā)展過程[3-4]。本研究結果顯示 AD患者血清 sFas和sFasL水平明顯高于正常對照組和老年疾病對照組,與文獻報道[5]相符;且隨著癡呆程度的提高,血清sFas和sFasL呈逐漸升高趨勢。由此提示sFas和sFasL可能參與了AD疾病中的神經(jīng)細胞凋亡的過程,與AD的發(fā)生、發(fā)展有密切關系。因此血清sFas和sFasL對于癡呆的嚴重程度有一定的預示作用,臨床上可考慮將血清sFas和sFasL水平作為癡呆病情發(fā)展的監(jiān)測指標之一。

        智能水平和腦缺血指數(shù)是評定老年人大腦神經(jīng)細胞功能的量化指標。本研究結果顯示AD患者sFas與年齡、病程及MMSE評分呈正相關(r值分別為0.856、0.834、0.799,P <0.01),而與 HIS評分呈負相關(r= -0.714,P <0.01),這與國外研究結果(隨著年齡增長,sFas的表達明顯增高)[6]相一致。血清sFasL與年齡、病程呈正相關(r值分別為0.863、0.857,P <0.01),而與 MMSE和HIS評分呈負相關(r值分別為 -0.801、-0.745,P <0.01)。原因可能是 sFas形成寡聚體與sFasL結合,反過來加劇sFasL陽性細胞的死亡,從而加速患者的癡呆進程,這與PROUSSAKOVA等[7]的報道一致。提示血清sFas和sFasL濃度與患者的智能水平和腦缺血程度存在某些關聯(lián)。但因本研究的病例數(shù)較少,該結論還需要大樣本、長期的研究才能進一步證實。

        總之,AD患者存在血清sFas和sFasL水平異常,且其水平的高低與患者的癡呆程度有關,可能是AD患者病情進一步發(fā)展的原因之一。

        [1]許靜,蒲傳強.Fas/FasL在神經(jīng)系統(tǒng)疾病作用的研究進展[J].國際神經(jīng)病學神經(jīng)外科學雜志,2013,40(3):297-298.

        [2]張玲英,洪華,葉長寧,等.類風濕關節(jié)炎患者血清sFas、sFasL和 IL-18水平及意義[J].檢驗醫(yī)學,2004,19(2):104-105.

        [3]CRAIG-SCHAPIRO R,KUHN M,XIONG C,et al.Multiplexed immunoassay panel identifies novel CSF biomarkers for Alzheimer's disease diagnosis and prognosis[J].PLoS One,2011,6(4):e18850.

        [4]SU JH,ANDERSON AJ,CRIBBS DH,et al.Fas and Fas ligand are associated with neuritic degeneration in the AD brain and participate in beta-amyloid-induced neuronal death [J].Neurobiol Dis,2003,12(3):182-193.

        [5]ERTEN-LYONS D,JACOBSON A,KRAMER P,et al.The FAS gene,brain volume,and disease progression in Alzheimer's disease[J].Alzheimers Dement,2010,6(2):118-124.

        [6]COLLAZIOL D,LUZ C,DORNELLES F,et al.Psychoneurodendocrine correlates of lymphocyte subsets during healthy ageing[J].Mech Ageing Dev,2004,125(3):219-227.

        [7]PROUSSAKOVA OV,RABAYA NA,MOSHNIKOVA AB,et al.Oligomerization of soluble Fas antigen indues its cytotoxicity [J].J Biol Chem,2003,278(38):36236-36241.

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