【摘 要】本文首先隨本實驗的選題意義及選題依據(jù)進(jìn)行簡單的介紹，闡述了葛根素的藥理作用，進(jìn)而引入本文的研究內(nèi)容。本文的實驗部分進(jìn)行了詳細(xì)而緊密的探討，探討內(nèi)容包括總黃酮含量的測定方法、提取溶劑的選擇、提取方法的選擇。

【關(guān)鍵詞】葛根 提取 工藝

葛根在我過分分布單位較廣，具有較好的藥用價值，對各種心血管疾病、糖尿病具有較好的作用。本課題旨在通過正交實驗確定該天然藥物主要成分的最佳提取工藝，并對天然提取物的穩(wěn)定性進(jìn)行研究。

一、儀器與藥品

（一）儀器：可見分光光度計，超聲提取儀，B204-S型萬分之一電子天平，DHG-9075A型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱。

（二）藥品：葛根、無水亞硫酸鈉、亞硝酸鈉、焦性沒食子酸、氧化鈣（塊狀）、硫代硫酸鈉、氫氧化鈉（粒）、氯化鈉鐵、石油醚、乙醇

二、總黃酮含量的測定方法

稱取5g葛根至于一定量的圓底燒瓶中，添加4倍的乙醇進(jìn)行回流提取和超聲提取，提取的時間均為3h，將溶劑蒸干，得到膏狀物。稱取30mg的膏狀樣品置于量瓶中，量瓶的含量約為50mL，添加25mL乙醇，通過超聲分散的方法將膏狀物進(jìn)行溶解，將乙醇添加到25mL刻度線處。采用吸量管吸收其中的1.0mL的溶液進(jìn)行實驗。

采用去離子水、乙醇作為溶劑提取葛根素進(jìn)行比較，選擇一個較優(yōu)的溶劑。粉碎一定量的葛根至于提取瓶中，分別采用4倍、2倍的溶劑進(jìn)行回流提取，提取的時間分別為1.5 h和1 h，將兩次回流提取所得的提取液進(jìn)行混合，濃縮成膏狀物質(zhì)，測量其中葛根素的含量，進(jìn)而計算其中葛根素的提取率。

三、提取方法的選擇

采用回流提取法和超聲提取法，在相同條件下進(jìn)行實驗，并予以比較，具體實驗步驟為：采用去回流提取、超聲提取作為溶劑提取葛根素進(jìn)行比較，選擇一個較優(yōu)的方法。所得結(jié)果如表1所示。

四、葛根素提取工藝的正交實驗研究

在整個實驗的過程當(dāng)中以葛根素的提取率為主要參考指標(biāo)。具體的實驗步驟及方法是：稱取10.0g的葛根粉末，加入乙醇200mL，實驗過程中回流提取的時間為2h，每個樣品提取5次，在1000mL的乙醇中溶解，過濾后測量其中葛根素的含量，發(fā)現(xiàn)葛根素的含量為39.9mg/g。以葛根素的含量為主要的參考指標(biāo)，進(jìn)行實驗，研究提取時間、乙醇濃度、料液比三個實驗數(shù)據(jù)對提取率的影響，選出最優(yōu)的參數(shù)值。

（一）最佳提取工藝的驗證實驗

統(tǒng)計葛根的提取率，看選出的最優(yōu)工藝是否合理，假使最優(yōu)工藝并不合理，需進(jìn)一步進(jìn)行實驗研究加以驗證。

（二）提取溶劑的選擇

分別采用水和乙醇作為溶劑進(jìn)行實驗，根據(jù)實驗結(jié)果顯示，選擇水作為溶劑時，實驗結(jié)果中提取效率為85%，選擇乙醇作為溶劑時提取效率為88%，這說明乙醇為一種相對較好的溶劑。因此可以考慮將二者混合，采用混合溶劑進(jìn)行實驗，選擇不同乙醇濃度下的提取效率，確定較優(yōu)的實驗參數(shù)值。

（三）提取方法的選擇

分別采用回流提取和超聲提取兩種方法進(jìn)行實驗，根據(jù)實驗結(jié)果顯示，選擇回流提取法實驗時，實驗結(jié)果中提取效率為83%，選擇超聲提取方法實驗時提取效率為86%，這說明超聲提取法為一種較好的實驗方法，可以在后面的實驗中采用。

五、實驗的細(xì)化處理結(jié)果

實驗過程中實驗步驟參照以上提取實驗的實驗步驟，實驗過程中乙醇濃度為80%，為了節(jié)省溶劑，且考慮到溶劑量對實驗結(jié)果影響并不顯著，確定溶劑量為1倍時進(jìn)行實驗。采用單一變量法進(jìn)行實驗，實驗過程中，采用的提取時間分別為1.5 h、2.0 h、2.5h、3 h和3.5 h，實驗過程中采用的提取次數(shù)為1次、2次、3次、4次和5次。

采用該方法進(jìn)行實驗時，發(fā)現(xiàn)，隨著提取時間的延長，提取的次數(shù)不斷的增大提取的效率不斷的提高，并且在提取時間為3 h、提取次數(shù)為4次的時候達(dá)到最大值，這說明在實驗的過程中應(yīng)選擇提取時間3 h，提取次數(shù)4次為宜。

六、實驗結(jié)果討論

（一）溶劑對提取效率的影響

實驗結(jié)果如表1所示，分別采用水和乙醇作為溶劑進(jìn)行實驗，根據(jù)實驗結(jié)果顯示，選擇水作為溶劑時，實驗結(jié)果中提取效率為85%，選擇乙醇作為溶劑時提取效率為88%，這說明乙醇為一種相對較好的溶劑。因此可以考慮將二者混合，采用混合溶劑進(jìn)行實驗，選擇不同乙醇濃度下的提取效率，確定較優(yōu)的實驗參數(shù)值。

這個實驗結(jié)果可以是由于乙醇對于葛根素的溶解性要優(yōu)于水對于葛根素的溶解性，因此在實驗過程中有利于葛根素的提取工作。但是考慮到乙醇的成本要高于水，并且水無毒、無害，易取得，易回收，因此在實驗中應(yīng)該進(jìn)行選擇水進(jìn)行實驗，希望能夠在降低成本的基礎(chǔ)上保證實驗的提取效率，這將在后面的正交試驗中進(jìn)行詳細(xì)的討論，以求得最優(yōu)值。

（二）溶劑的濃度對提取效率的影響

隨著乙醇濃度的增大，葛根素的提取效率分別為72%、79%和78%，即隨著乙醇溶液濃度的增大，葛根素的提取效率先增大，后基本保持不變，或稍有減小，次實驗的極差為7%，極差相對較小，說明該實驗因素對實驗結(jié)果影響較小。據(jù)實驗結(jié)果顯示，采用乙醇的濃度為80%和90%的數(shù)據(jù)進(jìn)行實驗時，得到的葛根素提取效率相對較高。這驗證了4.1中的結(jié)論，說明采用葛根作為溶劑確實能夠制備較優(yōu)的實驗結(jié)果，但是過大的乙醇濃度并不利于葛根素的提取，因此可以考慮選擇乙醇濃度為80%作為最優(yōu)的提取值。此外，4.1中的實驗指出，采用水和乙醇作為提取溶劑時，提取效率分別為85%和88%，兩者的相差本就不大，因此該實驗得到的極差也相對較小，符合實驗結(jié)果中得到的數(shù)據(jù)。

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