摘要：目的觀察消渴脂平膠囊對(duì)2型糖尿病大鼠糖脂代謝及肝臟組織NF-κB的影響。方法將健康雄性Wistar大鼠48只，分為正常組、模型組、消渴脂平膠囊治療組、馬來酸羅格列酮治療組。測(cè)定肝臟組織中NF-κB的表達(dá)水平。結(jié)果消渴脂平膠囊組NF-κB陽性反應(yīng)產(chǎn)物低于模型組。結(jié)論消渴脂平膠囊可降低T2DM大鼠肝臟組織中NF-κB蛋白表達(dá)水平，減輕炎癥狀態(tài)，從而起到減輕胰島素抵抗，改善血糖的作用。

關(guān)鍵詞：消渴脂平膠囊；2型糖尿病；核因子κB；肝內(nèi)炎癥；胰島素抵抗近年來研究表明許多炎癥因子與T2DM，IR關(guān)系密切?？寡字委熆筛纳艻R，提高胰島素的敏感性，從而起到降血糖，調(diào)節(jié)血脂的作用。在炎癥和應(yīng)激反應(yīng)時(shí)肝臟能產(chǎn)生多種炎癥因子，而IR時(shí)肝臟產(chǎn)生炎癥敏感蛋白增加，血漿濃度增高，進(jìn)一步促使蛋白產(chǎn)物的增加，增強(qiáng)了機(jī)體的炎癥反應(yīng)。中醫(yī)學(xué)認(rèn)為肝的疏泄功能可直接影響肺、脾（胃）、腎多臟腑功能，從而消渴乃成，變證叢生。消渴脂平膠囊為我院院內(nèi)制劑，作為治療T2DM氣陰兩虛挾痰瘀的基礎(chǔ)方藥，以益氣養(yǎng)陰，化瘀瀉濁為治療原則。

1資料與方法

1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組選擇Wistar大鼠48只，雄性，隨機(jī)分為兩組，即正常組（n=12只），高脂組（n=36只）。將成模的Wistar大鼠隨機(jī)分為消渴脂平膠囊治療組12只，馬來酸羅格列酮治療組12只，模型組12只。

1.2藥物消渴脂平膠囊：由山楂、何首烏、黃精、葛根、人參、澤瀉、桑葉組成，長春中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院制劑中心提供，長衛(wèi)藥制字（96）1372號(hào)。馬來酸羅格列酮片：葛蘭素史克（天津）有限公司提供。

1.3動(dòng)物模型的建立按Srinivasan等和周迎生等[1]的方法為基礎(chǔ)，一次性腹腔注射2%STZ 30mg·kg-1。所有大鼠于STZ注射后72h時(shí)眼眶取血，分離血清，-20℃冰箱冷凍保存?zhèn)溆谩?/p>

1.4方法消渴脂平膠囊和馬來酸羅格列酮以蒸餾水稀釋，灌胃劑量分別為3.6g/（kg·d）、4mg/（kg·d），各組灌胃給藥8w，1次/d。處死前1d，隔夜禁食不禁水12 h，次晨將大鼠乙醚麻醉，快速切除肝臟，用于檢測(cè)指標(biāo)。

1.5統(tǒng)計(jì)方法采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。

2結(jié)果

2.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物一般情況實(shí)驗(yàn)期間意外死亡動(dòng)物9只，其中正常組1只，消渴脂平膠囊組2只，馬來酸羅格列酮組2只，模型組4只。正常組大鼠生長良好，體質(zhì)量有所增加，無其他癥狀。模型組大鼠較其他三組比較肥胖，活動(dòng)遲緩、懶動(dòng)、毛色干枯無光澤。

2.2大鼠肝臟組織中NF-кB蛋白表達(dá)情況，見表1。

正常組：陽性反應(yīng)產(chǎn)物呈棕褐色，主要表達(dá)于肝庫普弗細(xì)胞核、門管區(qū)細(xì)胞核、膽管上皮細(xì)胞核、少數(shù)肝細(xì)胞核及中央靜脈壁。

模型組：肝細(xì)胞彌漫脂肪變。NF-kB陽性反應(yīng)產(chǎn)物主要表達(dá)于庫普弗細(xì)胞核、肝內(nèi)浸潤的炎癥細(xì)胞核、肝脂滴小泡壁及少數(shù)肝細(xì)胞核，染色濃重、累及范圍廣。

馬來酸羅格列酮組：部分肝細(xì)胞出現(xiàn)脂變，小泡性、大泡性脂變共存。NF-kB陽性反應(yīng)產(chǎn)物主要表達(dá)于庫普弗細(xì)胞核、肝內(nèi)浸潤的炎癥細(xì)胞核、肝脂滴小泡壁及少數(shù)肝細(xì)胞核，但受累細(xì)胞數(shù)和染色強(qiáng)度模型低于模型組。

消渴脂平組：部分肝細(xì)胞出現(xiàn)脂變。NF-кB陽性反應(yīng)產(chǎn)物主要表達(dá)于庫普弗細(xì)胞核、肝內(nèi)浸潤的炎癥細(xì)胞核、肝脂滴小泡壁及少數(shù)肝細(xì)胞核，但受累細(xì)胞數(shù)和染色強(qiáng)度模型低于模型組，見圖1。

3討論

近年來，大量的流行病學(xué)、臨床和實(shí)驗(yàn)室研究表明，肥胖、胰島素抵抗、2型糖尿病與慢性炎癥密切相關(guān)。肥胖患者體內(nèi)的脂肪組織能分泌TNF-α、IL-6、瘦素、抵抗素、脂聯(lián)素等炎癥因子均參與胰島素抵抗和2型糖尿病的發(fā)生發(fā)展。核因子-кB（NF-кB）最初是從B細(xì)胞核提取物中發(fā)現(xiàn)的一種核蛋白因子，當(dāng)它被激活后，即可進(jìn)入核內(nèi)，啟動(dòng)或調(diào)節(jié)基因的早期轉(zhuǎn)錄。高脂血癥、高血糖、 高血壓、各類炎癥、創(chuàng)傷性疾病中均可見組織中NF-кB的高表達(dá)[2]。NF-кB作為炎癥啟動(dòng)和調(diào)節(jié)的關(guān)鍵核因子，參與多種炎癥因子基因表達(dá)的調(diào)控，研究證明激活的NF-кB可誘導(dǎo)TNF-α（腫瘤壞死因子-α）、黏附分子、白細(xì)胞介素等炎癥因子的高表達(dá)。同時(shí)亦有研究證明NF-кB是高血糖和氧化應(yīng)激的主要靶點(diǎn)，而糖尿病與多種細(xì)胞因子TNF-α，IL-6，CRP等之間存在必然的聯(lián)系。

胰島素抵抗不僅是機(jī)體的一種異常狀態(tài)，同時(shí)也是2型糖尿病發(fā)病的重要機(jī)制。研究發(fā)現(xiàn)肥胖患者外周血單個(gè)核細(xì)胞中NF-кB的活性明顯升高，從而可能導(dǎo)致胰島素抵抗。石秀林等[3]研究顯示，T2DM患者血清炎性因子水平及單個(gè)核細(xì)胞中NF-кB活性均升高，提示2型糖尿病患者處于炎性狀態(tài)，且可能與胰島素抵抗和動(dòng)脈粥樣硬化的形成有關(guān)。從而證實(shí)了合理的抑制NF-кB的活性，可以起到抗炎作用，減輕胰島素抵抗，改善血糖。慢性炎癥產(chǎn)生的過程都會(huì)抑制胰島素作用，造成胰島素抵抗；同樣，胰島素抵抗又會(huì)加重炎癥反應(yīng)，引起一系列機(jī)體內(nèi)環(huán)境的改變，形成惡性循環(huán)[4]。因此改善機(jī)體的炎癥環(huán)境是治療T2DM胰島素抵抗的重要途徑之一。模型組大鼠肝臟組織中NF-кB表達(dá)明顯升高，這與NF-кB是各種炎癥啟動(dòng)和調(diào)節(jié)的因子相符，提示其可能是致T2DM的重要因素。經(jīng)消渴脂平膠囊治療后，NF-кB水平明顯降低，提示NF-кB是該中藥復(fù)方的作用靶點(diǎn)之一[5]。消渴脂平膠囊防治T2DM、IR的作用機(jī)制之一可能是通過阻斷肝內(nèi)NF-кB過度表達(dá)來實(shí)現(xiàn)的。為臨床應(yīng)用中醫(yī)防治IR提供理論依據(jù)。

參考文獻(xiàn)：

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[2]陳紅，孫明杰，彭娟，等.黃連解毒湯對(duì)糖尿病大鼠肝臟核因子-κB、腫瘤壞死因子-α表達(dá)的影響[J].中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2010，16(18):153-156.

[3]石秀林，李芳萍，蔡夢(mèng)茵，等.新診斷2型糖尿病患者血清炎癥因子及外周血單個(gè)核細(xì)胞中核因子κB活性變化[J].中山大學(xué)學(xué)報(bào)醫(yī)學(xué)科學(xué)版，2006，27(3):266-270.

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[5]陸君.慢性炎癥與2型糖尿病[J].實(shí)用心腦肺血管病雜志，2006，14(8):600-602.

編輯/申磊