摘要：目的 建立蛛網(wǎng)膜下腔出血SD大鼠模型，觀察蛛網(wǎng)膜下腔出血模型大鼠不同時間段學習記憶功能。方法 隨機分為蛛網(wǎng)膜下腔出血模型組，蛛網(wǎng)膜下腔出血模型假手術組，正常對照組，蛛網(wǎng)膜下腔出血模型組分1d，7d，30d亞組。觀察大鼠行為學改變，采用避暗試驗方法記錄各組大鼠實驗潛伏期（LT）及來回穿梭次數(shù)（EN）。結果 蛛網(wǎng)膜下腔出血模型大鼠制作成功后后大鼠有認知改變表現(xiàn)；蛛網(wǎng)膜下腔出血模型大鼠模型組與對照組比學習記憶能力明顯下降（P＜0.05），組間對比，模型組大鼠1d、7d、30d組認知功能逐漸增強，學習記憶有所增強，有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），但均較正常組差，比值均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。結論 蛛網(wǎng)膜下腔出血模型大鼠在不同時間段學習記憶功能不同，證明蛛網(wǎng)膜下腔出血模型大鼠學習記憶等認知功能受損。

關鍵詞：蛛網(wǎng)膜下腔出血（SAH）；學習記憶蛛網(wǎng)膜下腔出血（subarachnoid hemorrhage，SAH）一般指顱底或腦組織內(nèi)部的異常血管破裂，短時間內(nèi)血液直接進入蛛網(wǎng)膜下腔而引起的一種臨床綜合征，時間快，發(fā)展迅速，病情嚴重，約占急性腦卒中的10%，是一種非常嚴重且為常見類急癥病[1]；蛛網(wǎng)膜下腔出血患者在各個不同方面表現(xiàn)認知功能特別是學習記憶方面的功能障礙，經(jīng)典動物模型可以模擬人體機能方面的變化反映。本研究在與建立蛛網(wǎng)膜下腔出血大鼠模型，檢測大鼠各個時間段學習記憶功能，為臨床提供依據(jù)。

1資料與方法

1.1蛛網(wǎng)膜下腔出血大鼠模型的制作

1.1.1實驗動物 6～8w齡健康成年SD大鼠24只，體重（225±25）g均購自河南科技大學醫(yī)學院動物實驗中心。所有大鼠單籠飼養(yǎng)，避免強光、強噪音刺激，24h晝夜循環(huán)。1w后進行篩選，篩選后大鼠行嚴格固定喂食、喂水時間，嚴格控制食物的量，自由飲水。積極培養(yǎng)本批大鼠統(tǒng)一生活習性及覓食規(guī)律。隨機分為蛛網(wǎng)膜下腔出血模型組、蛛網(wǎng)膜下腔出血模型假手術組（同蛛網(wǎng)膜下腔出血組手術方式，只注入生理鹽水，不注入血液，排除手術對大鼠學習記憶的影響）以及空白對照組，，蛛網(wǎng)膜下腔出血組n=8只。假手術組每次按照模型組一樣條件，唯一不同就是不注入血液，注入同用量生理鹽水即可，空白對照組，在每次刺激實驗組的大鼠時以相同的方法刺激抓取1～2次即可，以排除人為刺激影響。

1.1.2模型制作照季鷹等報道的方法完成蛛網(wǎng)膜下腔出血實驗動物模型[2]。在前囪前5mm、中線旁3mm處用電動牙科鉆鉆孔。在手術顯微鏡下仔細將腦膜挑破，切勿傷及腦組織或一級周圍血管，當清亮腦脊液流出時，將PE10塑料管尖端指向雙耳連線中點，緊貼前顱窩底蛛網(wǎng)膜下腔送入，深度約1cm，使該管頂端恰好位于相當于人類Willis環(huán)前或中部，盡量不碰及任何血管，以避免腦血管機械性痙攣對結果的影響，蛛網(wǎng)膜下腔出血組自插管內(nèi)注入非肝素化的自體血，大鼠尾動脈血液100μl。假手術對照組操作步驟同實驗組，但最后經(jīng)插管注入100μl 生理鹽水，盡量保持與蛛網(wǎng)膜下腔出血組一致，減小手術所引起結果誤差。

1.2學習記憶實驗（避暗試驗）全部大鼠均采用避暗試驗箱進行行為學測試，軟件分析系統(tǒng)進行學習記憶能力測試[3]。由于大鼠有喜暗的習性，將大鼠背對暗室的洞口放入明室，并開始計時，進行學習實驗，大鼠可很快自由進入暗室，此時即為大鼠潛伏期，并記錄，同時接通暗室電源，直流電電擊，受到電刺激后大鼠會逃出暗室，研究大鼠記憶功能，記錄大鼠從明室第1次進入暗室的時間即為本次實驗大鼠LT，大鼠受電擊后會逃避性地跑出暗室，然后記錄10min大鼠進入暗室的次數(shù)即EN，并記錄和觀察大鼠在明暗是活動時間和活動路線距離，共同作為記憶成績表現(xiàn)為LT和EN。

1.3統(tǒng)計學處理及分析收集計數(shù)資料及計量資料均采用SPSS15.5統(tǒng)計軟件包進行分析避暗試驗所得LT及EN，所得數(shù)據(jù)以（x±s）表示，數(shù)據(jù)采用單因素因素方差分析，組間比較用LSD-t檢驗，P＜0.05、1＜0.01為有統(tǒng)計學意義。

2結果

模型制作：蛛網(wǎng)膜下腔出血模型大鼠制作成功后后大鼠有認知改變表現(xiàn)，檢測大鼠腦電波可收集典型的腦電波活動模型。模型制作成功率為97.9%。空白組避暗試驗結果LT為（56.00±2.71）s、EN為（3.29±1.14）次，模型組模型組：模型成功后1d避暗試驗結果的LT為（38.51±1.28）s、EN為（5.15±1.21）次；蛛網(wǎng)膜下腔出血模型組7d避暗試驗結果為LT（42.81±3.31）s、EN為（3.76±1.29）次；蛛網(wǎng)膜下腔出血模型組30d避暗試驗結果(46.73±2.61)s、EN為（2.35±1.01）次，假手術組避暗試驗結果LT為（53.14±3.11）s、EN為（3.55±1.51）次蛛網(wǎng)膜下腔出血模型大鼠模型組與對照組比學習記憶能力明顯下降（P＜0.05），組間對比，模型組大鼠1d、7d、30d組認知功能逐漸增強，學習記憶有所增強，有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），但均較正常組差，比值均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。見表1。

3討論

腦功能障礙特別是認知功能障礙是目前神經(jīng)系統(tǒng)疾病患者治愈康復回歸社會生活的主要阻礙因素之一[4-6]，尤為重要，目前國內(nèi)外多方研究已經(jīng)得到證實，即使通過多種手段臨床治療預后良好或無明顯神經(jīng)功能障礙如運動語言等的自發(fā)性蛛網(wǎng)膜下腔出血患者，基本大部分會存在不同程度的認知功能損害主要表現(xiàn)為言語功能，文字或非文字學習記憶功能，不同程度認知管理能力及其他認知如思維、學習等區(qū)域功能不同程度缺失[7]，本研究通過大鼠蛛網(wǎng)膜下腔出血模型研究蛛網(wǎng)膜下腔出血模型的認知功能，蛛網(wǎng)膜下腔出血模型大鼠制作成功后后大鼠有認知改變表現(xiàn)，檢測大鼠腦電波可收集典型的腦電波活動模型。模型制作點燃成功率為92.4%。蛛網(wǎng)膜下腔出血模型大鼠模型組與對照組比學習記憶能力明顯下降，組間對比，模型組大鼠1d、7d、30d組認知功能逐漸增強，學習記憶有所增強，有統(tǒng)計學意義，但均較正常組差，比值均有統(tǒng)計學意義，從結果看出，大鼠在蛛網(wǎng)膜下腔出血初期，認知功能明顯受損，考慮有多種原因，出血后血液對腦實質(zhì)的刺激影響，腦功能明顯受損，血管痙攣，出血血液分解后的多種離子對腦組織的影響；蛛網(wǎng)膜下腔出血后，顱腦壓力增高，進一步加強多腦功能的損傷，隨著時間的遷延，腦功能有部分的回復，一部分腦功能有回復可能，但也會給腦功能帶來不可逆的腦損傷，另就是蛛網(wǎng)膜下腔出血后，腦內(nèi)多種因子的作用，維系腦認知功能的重要因子的減少或缺失等。

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編輯/哈濤