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        大豬屎豆化學(xué)成分系統(tǒng)預(yù)試及TCL測定研究

        2014-12-31 00:00:00潘東來陸海琳銀勝高曾憲志
        醫(yī)學(xué)信息 2014年17期

        摘要:目的對大豬屎豆進行化學(xué)成分初步分析與TCL測定。方法采用化學(xué)成分系統(tǒng)預(yù)試法和薄層色譜法。結(jié)果大豬屎豆化學(xué)成分預(yù)實驗表明,其含有生物堿、鞣質(zhì)、有機酸、黃酮類、酚類、香豆素類、內(nèi)酯、強心苷、甾體類、三萜類和油脂等化學(xué)成分。TLC測定研究表明大豬屎豆莖、葉中均含β-谷甾醇。結(jié)論該研究可為了解大豬屎豆的化學(xué)成分及對其進一步開發(fā)利用提供參考。

        關(guān)鍵詞:大豬屎豆;化學(xué)成分;薄層色譜大豬屎豆Crotalaria assamica Benth.為豆科植物,全株均可入藥,夏秋季采收,去凈鮮用或者曬干用。其莖葉藥材名為\"自消容\",根藥材名為\"自消容根\",莖葉及根味淡、性微涼[1]?!端幱弥参镛o典》中記載大豬屎豆產(chǎn)于中國華南、西南地區(qū)及安徽、臺灣等地。莖、葉、根、種子均具有清熱解毒,止血消腫,涼血降壓,利水的作用??捎糜邳S疸型肝炎、 咳嗽吐血、腫脹、牙痛、小兒頭瘡、疳積、高血壓、白血病、惡性腫瘤、跌打損傷、風(fēng)濕骨痛、外傷出血、刀傷、小便不利、腎結(jié)石、腎炎、腎虛耳鳴等疾病的治療。文獻研究表明,目前尚未見有對大豬屎豆的化學(xué)成分系統(tǒng)預(yù)試與TLC測定的相關(guān)研究報道。因此,我們對其進行化學(xué)成分系統(tǒng)預(yù)試與TLC測定的進行研究,具體如下。

        1資料與方法

        1.1一般資料 DHG-9241型電熱恒溫干燥箱(上海精宏實驗設(shè)備有限公司);ZF-2型三用紫外儀(上海市安亭電子儀器廠);UPK-Ⅰ型優(yōu)普超純水機(成都超純科技有限公司);電子分析天平(上海方瑞儀器有限公司);電熱恒溫水浴鍋(上海申賢恒溫水浴鍋有限公司)。939型自動鋪板器(重慶南岸貝爾德儀器技術(shù)廠)。對照品為β-谷甾醇(中國藥品生物制品檢定所,供鑒別用,批號:0851-9601),試劑均為分析純。

        大豬屎豆的3批樣品均采自廣西藥用植物園,經(jīng)廣西中醫(yī)藥大學(xué)郭敏副教授鑒定為豆科植物豬屎豆屬大豬屎豆Crotalaria assamica Benth.的全株,標本存于廣西中醫(yī)藥大學(xué)藥用植物教研室。

        1.2方法與結(jié)果

        1.2.1化學(xué)成分預(yù)實驗

        1.2.1.1水提取液的制備 分別稱取粗粉10.0 g,分別置入200 mL的三角燒瓶中,加入蒸餾水100 mL,室溫浸泡過夜。濾過,取濾液約20 mL,每試管1~2 mL供檢查氨基酸、多膚、蛋白質(zhì)用。剩余藥渣加水適量,在60℃左右水浴上加熱30 min,濾過,濾液取每試管1~2 mL作氨基酸、多膚、蛋白質(zhì)、糖、多糖、皂苷、苷類、鞭質(zhì)、有機酸等成分定性檢測。3批樣品的實驗測定結(jié)果一致,見表1。

        1.2.1.2乙醇提取液的制備 分別稱取3批樣品粗粉10.0 g,分別置入250 mL圓底燒瓶中,加入95%乙醇100 mL于水浴上加熱回流1 h,稍冷后加人蒸餾水使其含醇量為70%,冷至室溫,過濾,濾液轉(zhuǎn)移至分液漏斗中;用100 mL石油醚(60℃~90℃)分2次萃取,每次用石油醚50 mL,以除去葉綠素等,分出下層乙醇提取液,濃縮至40~50 mL,加95%乙醇50 mL溶解后過濾,濾液取每試管1~2mL供檢查黃酮、蒽醌、香豆素、萜類、甾體化合物、有機酸、酚類、鞣質(zhì)等成分用。3批樣品的實驗測定結(jié)果一致,見表2。

        1.2.1.3石油醚提取液的制備 分別稱取樣品粗粉1.0 g,分別置入50 mL的燒杯中,加入石油醚(60℃~90℃)10 mL,密閉浸泡2 h,過濾,濾液供檢查揮發(fā)油、甾體化合物等成分用。3批樣品的實驗測定結(jié)果一致,見表3。

        1.2.2 TLC測定

        1.2.2.1供試品溶液的制備 分別稱取3個批大豬屎豆莖、葉粉末20 g,分別置入250 mL塞錐形瓶中,加入250 mL 95%乙醇于水浴回流2 h,濾過,濾渣再加250 mL 95%乙醇水浴回流2 h,提取3次,合并乙醇提取液,水浴濃縮,得到供試品溶液。

        1.2.2.2對照品溶液的制備 取β-谷甾醇對照品少量,加無水乙醇適量,溶解,制成對照品溶液。

        1.2.2.3展開與檢識 用毛細管吸取上述供試品溶液10 μL,對照品溶液5 μL,分別點于同一硅膠G板上,以石油醚:丙酮4∶1(V/V)為展開劑展開,取出,晾干,噴以磷鉬酸試液顯色,晾干,至斑點出現(xiàn)。結(jié)果表明:大豬屎豆莖和葉與β-谷甾醇對照品在黃色背景的相應(yīng)位置上均出現(xiàn)相同的藍色斑點,提示其莖、葉中均含有β-谷甾醇;不同月份的莖、葉中均能檢測出β-谷甾醇,見圖1。

        圖1 大豬屎豆TLC測定實驗結(jié)果圖

        注:1、5、9為β-谷甾醇對照品;2、3、4為①、②、③批莖;6、7、8為①、②、③批葉;比移值Rf=0.42。

        2討論

        大豬屎豆始載于清代的《生草藥性備要》,該本草中稱其為\"自消容\",具有散結(jié)、清濕熱、利濕解毒之功效。近代對大豬屎豆研究表明,其對小鼠肉瘤S-180、S-37及淋巴肉瘤1號腹水型的生長,有顯著的抑制作用[3]。此外,它還可用作綠肥植物[4]。該實驗研究結(jié)果表明:大豬屎豆中含有生物堿、鞣質(zhì)、有機酸、黃酮類、酚類、香豆素、內(nèi)酯、強心苷、植物甾醇、三萜類和油脂等化學(xué)成分。TLC結(jié)果表明:其莖、葉中均含有β-谷甾醇。該研究結(jié)果可為大豬屎豆生物活性成分的提取、分離、純化研究提供參考,并為大豬屎豆的深入研究與開發(fā)、利用提供一定的研究基礎(chǔ)與數(shù)據(jù)支持。

        參考文獻:

        [1]國家中醫(yī)藥管理局中華本草編委會.中華本草 第四冊[M].上海:上??茖W(xué)技術(shù)出版社,1999:421-423.

        [2]連文琰.豬屎豆屬藥用植物的調(diào)查[J].中藥材,1986,29(3):6-9.

        [3]劉忠輝,劉國道,黃必志.云南豬屎豆屬遺傳多樣性的ISSR分析[J].草業(yè)學(xué)報,2009,10(5):7-9.編輯/肖慧

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