【摘 要】本實驗對天麻頭風(fēng)靈膠囊的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行研究。含量測定方法：采用奧泰公司C18色譜柱（220mm×4.6mm，5μm），甲醇-水-36%乙酸（30：67：3）為流動相，檢測波長為322nm，流速為1.0ml/min，柱溫為30℃；鑒別方法：CMC-Na-G板，以 醋酸乙酯-丙酮-甲酸-水（5：5：1：1）為展開劑，置紫外光燈（365nm）下觀察熒光燈斑點。結(jié)論：本法簡便、準(zhǔn)確，可作為天麻頭風(fēng)靈膠囊的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。

【關(guān)鍵詞】天麻頭風(fēng)靈膠囊；質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)；研究

天麻頭風(fēng)靈膠囊由天麻、牛膝、玄參、地黃、當(dāng)歸、杜仲、川芎、槲寄生、野菊花、鉤藤組成。天麻頭風(fēng)靈膠囊具有滋陰潛陽，祛風(fēng)，強(qiáng)筋骨的功效。天麻頭風(fēng)靈膠囊常用于頑固性頭痛，長期手足麻木，慢性腰腿酸痛等。當(dāng)歸來源于傘形科東當(dāng)歸，又叫大和歸、日本當(dāng)歸、延邊當(dāng)歸。當(dāng)歸具有補(bǔ)血、活血、調(diào)經(jīng)止痛、潤燥滑腸的功效。當(dāng)歸具有抗缺氧、抗癌、護(hù)膚美容、補(bǔ)血活血、調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能、抑菌、抗動脈硬化的作用。川芎為傘形科植物川芎的根莖，具有活血行氣，祛風(fēng)止痛的功效。川芎常用于安撫神經(jīng)、癥瘕腹痛、跌撲腫痛、頭痛、風(fēng)濕痹痛等[1-5]。牛膝為莧科植物牛膝的根。牛膝具有補(bǔ)肝腎、強(qiáng)筋骨、活血通經(jīng)、引火（血）下行、利尿通淋的功效。牛膝常用于下肢痿軟、痛經(jīng)、癥瘕、胞衣不下、血淋、癰腫惡瘡、咽喉腫痛等。本實驗對天麻頭風(fēng)靈膠囊的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行研究。

1.儀器與試藥

（1）儀器：DR/5000紫外可見分光光度計（上海安譜科學(xué)儀器有限公司）；PS3200超聲波震蕩器清洗機(jī)（普洛帝中國服務(wù)中心）；GL-21M高速冷凍離心機(jī)（湘儀離心機(jī)儀器有限公司）；SLGH超深度高精度恒溫槽（南京順流儀器有限公司）；RE-5298旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器（上海亞榮生化儀器廠）；LC1620高效液相色譜儀（上海益絲科貿(mào)有限公司）；XYG-H帕恩特痕量分析級超純水機(jī)（北京湘順源科技有限公司）；BSA124S電子分析天平（東莞康潤儀器設(shè)備有限公司）。

（2）色譜柱：奧泰公司C18色譜柱（220mm×4.6mm，5μm）。

（3）對照品：阿魏酸。

（4）試劑： 醋酸乙酯（北京翰隆達(dá)科技發(fā)展有限公司）、丙酮（成都格雷西亞化學(xué)技術(shù)有限公司）、甲酸（天津市凱力達(dá)化工貿(mào)易有限公司）、甲醇（上海劉氏醫(yī)藥科技有限公司）、乙腈（沈陽市新光化工廠）。

（5）試藥：天麻頭風(fēng)靈膠囊。

2.測定方法確定

2.1色譜條件

依據(jù)查閱文獻(xiàn)及考查的結(jié)果，確定色譜條件如下[6-14]。流動相：甲醇-水-36%乙酸（30：67：3） 為流動相，檢測波長：322nm，流速：1.0m·min-1。柱溫：30℃。理論板數(shù)按阿魏酸峰計算應(yīng)不得低于2000。

2.2對照品溶液的制備

精密稱取阿魏酸對照品適量，置容量瓶中，加流動相制成每1mL含20μg的溶液，即得。

2.3供試品溶液的制備

取天麻頭風(fēng)靈膠囊適量，研細(xì)，精密稱定，加50毫升流動相超聲提取30分鐘，過濾，將濾液蒸至近干，殘渣用流動相溶解后轉(zhuǎn)移至5ml量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻，用微孔濾膜（0.45μm）濾過，即得。

2.4專屬性試驗

取天麻、牛膝、玄參、地黃、杜仲、槲寄生、野菊花、鉤藤藥材按樣品制備工藝制成陰性對照樣品，按上述實驗方法檢測，結(jié)果陰性試驗沒有干擾，表明本方法專屬性良好。

2.5精密度試驗

取對照品溶液按上述色譜條件，精密吸取20μl，連續(xù)進(jìn)樣6次，記錄峰面積。結(jié)果，RSD=0.69%，表明本方法精密度良好。

2.6對照品的線性考察

精密稱取適量阿魏酸對照品，加入流動相溶液使溶解分別配制成每毫升含5、10、20、30、40、50、60微克的溶液。分別精密上述溶液吸取10μL，注人液相色譜儀，依照2.1項下的色譜條件測定，記錄色譜峰。以峰面積（Y）為縱坐標(biāo)，對照品進(jìn)樣量（X）為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。結(jié)果表明，阿魏酸在5～60μg·mL-1范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。

2.7重現(xiàn)性試驗

稱取同一批的天麻頭風(fēng)靈膠囊樣品6份，按測定方法項下的方法制備供試品溶液，測定含量，并計算樣品的RSD值，結(jié)果RSD為0.83%，結(jié)果表明此方法的重現(xiàn)性良好。

2.8準(zhǔn)確度試驗

取對照品適量分別精密加入天麻頭風(fēng)靈膠囊中，按含量測定進(jìn)行測定，計算回收率為99.6%，RSD為0.67%。

2.9樣品含量測定

依照上述含量測定方法，再按外標(biāo)法以峰面積計算樣品的含量，結(jié)果三批樣品的含量分別為320μg/g、313μg/g、321μg/g。

3.鑒別

取天麻頭風(fēng)靈膠囊適量（約相當(dāng)于牛膝藥材2g），乙醇超聲提取30分鐘，過濾，蒸干，加水溶解，用水飽和的正丁醇提取2次，合并，用正丁醇飽和的水洗滌，正丁醇液蒸干，加甲醇1ml溶解，作為供試品溶液。另取2克牛膝對照藥材，按上述方法制備，作為對照品溶液。取天麻、玄參、地黃、當(dāng)歸、杜仲、川芎、槲寄生、野菊花、鉤藤藥材按樣品制備工藝制成陰性對照樣品，按上述方法制成陰性對照樣品。照薄層色譜法（附錄ⅥB）試驗，吸取上述三種溶液各10μl，分別點于同一CMC-Na-G板上，以醋酸乙酯-丙酮-甲酸-水（5：5：1：1）為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈（365nm）下觀察熒光燈斑點。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點，而陰性對照無干擾。

4.結(jié)論

本實驗分離效果好、方法簡便、快捷、準(zhǔn)確、專屬性好，可用于天麻頭風(fēng)靈膠囊中阿魏酸的含量測定。樣品與牛膝對照藥材對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點，陰性無干擾。該鑒別方法專屬性強(qiáng)，操作簡單，可用于天麻頭風(fēng)靈膠囊中牛膝的鑒別。

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