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        24GHz生物雷達對雄性大鼠生殖系統(tǒng)的影響*

        2014-12-25 02:08:02第四軍醫(yī)大學基礎部教學實驗中心西安710032路國華
        陜西醫(yī)學雜志 2014年5期
        關鍵詞:生物血清水平

        第四軍醫(yī)大學基礎部教學實驗中心(西安710032) 楊 芳 景 行 車 路 路國華

        隨著人口老齡化的社會壓力逐漸增大,我們越來越關注老年人的日常健康,我們希望實現(xiàn)的就是實時的非接觸檢測的,所以我們研發(fā)了SI-3型生物雷達[1]。

        眾所周知,已經有報道稱電磁輻射是機體疾病的誘因[2]。而且,暴露于復雜的變頻輻射環(huán)境,可以導致機體代謝水平的變化,如抑制褪黑素分泌、干擾抗氧化酶平衡[3,4]。鑒于我們在射頻及微波輻射對人體生物應答的知識欠缺[5,6],我們需要評估其安全性。我們將通過實驗動物血清激素水平及行為學的變化來論證SI-3的非接觸監(jiān)測是否具有臨床可行性。

        材料與方法

        1 動物與儀器 清潔級SD雄性大鼠48只,體重200~250g均由第四軍醫(yī)大學實驗動物中心提供;24GHz生物雷達SI-3由美國Decatur電子公司生產,功率0.01W,12V直流電源輸出。動物實驗房實驗前清潔、消毒,溫度23±2℃,為保證動物處于相對安靜環(huán)境,采用全天候黑暗處理。檢測試劑由深圳市新產業(yè)生物醫(yī)學工程有限公司提供,試劑批號分別為T:03615805018267LH:012120802GH:033120423;全自動化學發(fā)光免疫分析儀購自德國西門子公司(SIEMENS)。

        2 實驗方法

        2.1 將健康成年雄性SD大鼠48只(200±25g),隨機均分,飼養(yǎng)在4個盒式飼養(yǎng)籠(60cm ×40cm×20cm)中,飼養(yǎng)籠放置在動物房飼養(yǎng),穩(wěn)定室溫25℃。大鼠在飼養(yǎng)籠中可以隨意采食和飲水。大鼠在飼養(yǎng)房間飼喂14d,待大鼠適應周圍環(huán)境。每天由實驗者定時加糧換水,及時更換墊料,記錄各組大鼠進食量、飲水量及適應狀態(tài)。期間保證大鼠的正常生長,盡量避免大鼠受到劇烈刺激。

        2.2 輻照時,將SD大鼠飼喂在飼養(yǎng)盒中,雷達放置在飼養(yǎng)盒一側30cm處,對準飼養(yǎng)盒一側進行照射。飼養(yǎng)盒剩余三面用鋁箔紙貼嚴,盡可能將雷達所發(fā)出的微波都反射集中,輻照到SD大鼠,大鼠在飼養(yǎng)盒內可自由活動。

        2.3 4d適應飼養(yǎng)期結束后,進行隨機分組,將每籠12只大鼠隨機編號,然后重新分為4組,確保每組大鼠存在體重差異度相似。我們根據報道[7]將24h作為最短輻照時程、7d作為最長輻照時程分組:A組為空白對照組,無輻照;B組為長時程輻照組,時間24h/次,無間隔,累計輻照7d;C組為短時程輻照組,時間8h/次,每次間隔12h,累計輻照24h;D組為短時程輻照組,時間12h/次,每次間隔8h,累計輻照24h。

        2.4 輻照過程中記錄大鼠飲水量、進食量及活動量的變化情況。在采血24h前,各組均采取斷水處理。

        2.5 大鼠血液的采集、保存及送檢通過乙醚麻醉,在無菌臺上用消毒后的止血鉗摘去其一側眼球,取外周血4ml,置于真空管,10℃保存送檢,離心(轉速3500r/min,離心5min)。經過3次沖洗后,反應杯轉送到測量室,光電倍增管(PMT)檢測。反應孔位于激發(fā)底物噴頭正下方,激發(fā)底物1將被注射到反應孔內,泵動力延遲2.5s后將激發(fā)底物2注射到相同的反應孔內并啟動化學發(fā)光反應。反應發(fā)生后0.1s開始檢測,獲取0.1~3.0s的檢測信號,構成完整的檢測范圍。數(shù)據通過兩點定標后的工作曲線圖表示。數(shù)據處理時依據主曲線,存儲在試劑盒標簽芯片中。根據發(fā)光結果,得到不同血清樣本激素水平。

        3 統(tǒng)計學處理 激素數(shù)據統(tǒng)計繪圖分析對比,使用SPSS19.0軟件進行分析,先使用Shapiro– Wilk test進行正態(tài)分布檢驗,符合正態(tài)分布則用t檢驗,否則使用單因素方差分析進行組間對照分析,以P<0.05為有顯著性差異,P<0.01為有極顯著性差異。

        結 果

        1 行為學變化

        1.1 進食量變化最明確的為B組(24h組),在輻照的第2天開始,進食量為實驗前的1.5~2倍,而C、D兩組有增加,但較B組弱,且兩組間無顯著性差異(P>0.05)。

        1.2 飲水量輻照前,各組進水量均保持在500±50ml之間,輻照第1天,B組飲水量迅速增加至750±50ml,并持續(xù)至實驗結束。鑒于C、D兩組累積量僅為24h,故不予參考。

        1.3 各組大鼠在重新分組后均出現(xiàn)鼻部不適癥狀,在10~14h后均緩解,B組在輻照第5天時,有7只大鼠出現(xiàn)打斗現(xiàn)象,持續(xù)至實驗結束,打斗大鼠的數(shù)目為6~8只不等。

        2 激素檢測結果 見圖1~3。從圖1中可以看出,3個實驗組大鼠雄激素T水平均比對照組顯著升高(P<0.05);從圖2~3中可以看出,長時程輻照組的生長激素GH和黃體生成素LH水平在輻照2d之后,相比其他3組顯著升高(P<0.05)。

        圖1 四組大鼠雄激素檢測結果對比

        圖2 四組大鼠生長激素檢測結果對比

        圖3 四組大鼠黃體生成素檢測結果對比

        討 論

        實驗結果顯示:在不同的輻照后,大鼠生長激素(GH)和黃體生成素(LH)并未出現(xiàn)明顯差異,提示輻照引起的雄激素(T)升高在一定時期內可能并不引起下丘腦-垂體-性腺軸的上游的調控;而輻照所致的T升高,引起負反饋調節(jié)的作用亦不明顯,所以我們推測這可能是機體應激性的表現(xiàn)。而實驗各組大鼠的雄激素(T)均發(fā)生明顯升高。目前研究表明:動脈粥樣硬化(AS)、骨質疏松、胰島素抵抗等疾病的患病風險也隨血清雄激素水平下降而增加[8,9],所以我們可以考慮將SI-3提高血清T水平的作用應用于降低上述疾病的風險。但是,不同劑量的輻照并未出現(xiàn)顯著差異,長時程輻照組提示,較長時間的應用并未導致不良結果。因此,我們可以間歇式的應用SI-3進行輻照,既可保證有效,又可將風險降低。另有研究證實:雄激素水平下降,體內氧自由基增加[10],而有關電磁輻射導致精子DNA損傷機制更多傾向于自由基的產生[11],尤其是過氧化氫酶活性增加,谷胱甘肽過氧化物酶(GPx)、超氧化物歧化酶(SOD)和組蛋白激酶活性明顯降低[12],鑒于SI-3輻照后雄激素水平會明顯升高,故其在保護男性生殖能力,避免因精子DNA損傷所致的男性不育、早期流產方面具有廣闊的前景。此外,雄激素可以降低總膽固醇和低密度脂蛋白膽固醇水平,有利于膽固醇代謝[13],因而適量提高血清T水平在促進膽固醇代謝、降低心腦血管疾病風險有潛在的有利影響。

        總之,SI-3生物雷達可以明顯提高血清雄激素水平,而雄激素水平下降嚴重者可引起中老年男性雄激素部分缺乏癥(PADAM),故在中老年的生命體征監(jiān)測中,SI-3還可能具有潛在生物效應,故而可以考慮其進行臨床試驗。但是,我們現(xiàn)在仍未確定雷達輻照引起雄激素水平升高的機制,及其升高是否與下丘腦-垂體-性腺軸的上游調控有關等問題還有待研究。

        [1] 楊 芳,張 戈,路國華.24GHz生物雷達對大鼠空間學習記憶的實驗進展[J].陜西醫(yī)學雜志,2013,42(9):1109-1111.

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