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        氣質(zhì)聯(lián)用法對艾納香中龍腦含量的測定

        2014-12-22 12:09:34嚴(yán)敏石成亮湯洪敏
        湖北農(nóng)業(yè)科學(xué) 2014年21期
        關(guān)鍵詞:艾納香龍腦

        嚴(yán)敏+石成亮+湯洪敏

        摘要:以艾納香(Blumea balsamifera L.)組織培養(yǎng)過程中的愈傷組織、組培苗以及羅甸野生苗為研究對象,以乙醇為溶劑提取艾納香中的龍腦,運(yùn)用氣質(zhì)聯(lián)用法分別測定艾納香組培愈傷組織、組培苗、羅甸野生苗中龍腦的相對百分含量。結(jié)果表明,艾納香組培愈傷組織中不含龍腦,組培苗、羅甸野生苗中龍腦的含量分別為3.216 7和3.620 0 mg/g。該方法簡便、精密度和重復(fù)性良好,龍腦在0.020 0~0.060 0 mg/mL內(nèi)線性關(guān)系良好。組培苗和羅甸野生苗的添加回收率分別為97.11%和97.78%。

        關(guān)鍵詞:艾納香(Blumea balsamifera L.);龍腦;氣質(zhì)聯(lián)用儀

        中圖分類號:O657.63 ? ? ? ?文獻(xiàn)標(biāo)識碼:A ? ? ? ?文章編號:0439-8114(2014)21-5256-04

        DOI:10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2014.21.054

        Determinating Borneol in Blumea balsamifera L with GC-MS

        YAN Min, SHI Cheng-liang, TANG Hong-min

        (College of Chemistry and Environmental Science, Guizhou Minzhu University, Guiyang 550025, China)

        Abstract: Using callus and somaclone of Blumea balsamifera L seed, Luodian wild seedlings as materials, borneol of Blumea balsamifera L was extracted by ethanol and analysed by GC-MS. The results showed that callus of of Blumea balsamifera L seed did not contain borneol. The borneol content in somaclone and Luodian wild plants were 3.216 7 and 3.620 0 mg/g, respectively. The method is simple, precise with good repeatability. Borneol content in the range of 0.020 0~0.060 0 mg/mL had good linear relationship. The recoveries of standard addition were 97.11% and 97.78% for borneol in somaclone and Luodian wild seedlings.

        Key words:Blumea balsamifera L; borneol; GC-MS

        艾納香(Blumea balsamifera L),別名管芽,假東風(fēng)草[1]、大風(fēng)艾、大艾、冰片艾等,屬于菊科艾納香屬多年生木質(zhì)草本植物,在我國主要產(chǎn)于廣西、貴州、云南、廣東等省[2],以其全草或地上部分入藥,具有鎮(zhèn)痛、發(fā)汗、祛風(fēng)除濕、去痰止咳、通經(jīng)止血等功效,是一種重要的民間藥物。作為天然中草藥,艾納香含有多種有效成分,已經(jīng)鑒定的有黃酮類、有機(jī)酸、萜類等[3-5]。同時,艾納香是天然龍腦的重要來源,艾納香精油中含30%左右龍腦[6],是名貴藥材、高級香料、化妝品的理想原料及食品保健品的添加劑。

        艾納香屬多年生宿根植物,主要以宿根分株繁殖,分生苗移栽成活率低;艾納香利用種子育苗發(fā)現(xiàn)種子結(jié)實率低、休眠期長、發(fā)芽率低[7,8]。這些情況導(dǎo)致艾納香種苗短缺,嚴(yán)重制約了艾納香的規(guī)?;a(chǎn),因此必須研究艾納香的組織培養(yǎng)以快速獲得批量種苗,擴(kuò)大種植規(guī)模以滿足日益增長的市場需求。此外,在進(jìn)行組織培養(yǎng)時,直接以組織培養(yǎng)物替代原藥材是解決艾納香資源短缺的重要方法。對不同培養(yǎng)條件下的艾納香中龍腦含量進(jìn)行比較,有利于擴(kuò)寬艾納香藥材的應(yīng)用,使這一古老的中藥為人類健康發(fā)揮更大的作用。

        1 ?材料與方法

        1.1 ?儀器

        7890A/5975C氣質(zhì)聯(lián)用儀(Agilent公司)。

        1.2 ?試劑

        龍腦對照品,無水乙醇。

        1.3 ?供試材料

        艾納香組培愈傷組織;艾納香組培苗由貴州民族大學(xué)化學(xué)與環(huán)境科學(xué)學(xué)院組織培養(yǎng)實驗室培養(yǎng)了7個月的組培苗;艾納香野生苗采自貴州羅甸縣。

        1.4 ?龍腦對照品溶液的制備

        精確稱取龍腦對照品10 mg,置于10 mL的容量瓶中,加無水乙醇溶解并加至刻度,搖勻,即可得到濃度為1 mg/mL的溶液,作為標(biāo)準(zhǔn)品貯備液;另取200、300、400、500、600 μL的貯備液,分別置于10 mL容量瓶中加無水乙醇稀釋至刻度,搖勻,作為對照品溶液備用,濃度分別為0.02、0.03、0.04、0.05、0.06 mg/mL。

        1.5 ?氣質(zhì)聯(lián)用條件

        1.5.1 ?色譜條件 ?采用HP-5MS氣相色譜柱(30 m×0.25 mm×0.25 μm);進(jìn)樣口溫度為280 ℃,采用程序升溫,柱溫起始溫度為90 ℃,以5 ℃/min升溫至100 ℃,維持3 min;再以5 ℃/min升溫至150 ℃,維持2 min;分流比為40∶1;載氣為高純氦氣,載流速度為1.0 mL/min;進(jìn)樣量為1.0 μL。

        1.5.2 ?質(zhì)譜條件 ?電子轟擊粒子源,電離能量為70 eV;離子源溫度為230 ℃;傳輸線溫度為210 ℃;四級桿溫度為150 ℃。

        1.6 ?樣品的處理

        分別將艾納香愈傷組織、艾納香組培苗、野生苗3種樣品用研缽粉碎,準(zhǔn)確稱取粉碎樣品8 g,放至250 mL的錐形瓶中,加無水乙醇100 mL,進(jìn)行超聲提?。ǔ晻r間為120 min,頻率為59 Hz,功率為80%),冷卻、搖勻、過濾,濾液置于100 mL容量瓶中,放冷,加無水乙醇至刻度,搖勻,從100 mL容量瓶中再取1 mL溶液,置10 mL容量瓶中,加無水乙醇至刻度,搖勻,即為樣品溶液。

        1.7 ?龍腦對照品的氣質(zhì)聯(lián)用分析

        分別從0.03 mg/mL的龍腦對照品溶液及樣品溶液中精密量取1 μL溶液,運(yùn)用氣質(zhì)聯(lián)用儀進(jìn)行測定。

        1.7.1 ?標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 ?分別精密吸取濃度為0.02、0.03、0.04、0.05、0.06 mg/mL的龍腦對照品溶液各1 μL,依次進(jìn)樣,運(yùn)用氣質(zhì)聯(lián)用儀分別測定其峰面積,以龍腦對照品的峰面積為縱坐標(biāo),龍腦對照品濃度為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

        1.7.2 ?精密度測定 ?取濃度為0.03 mg/mL的龍腦對照品溶液1 μL,連續(xù)進(jìn)樣6次,根據(jù)峰面積計算其相對標(biāo)準(zhǔn)偏差。

        1.7.3 ?重復(fù)性試驗 ?取艾納香野生苗,按照樣品溶液制備方法配制6份100 mL的溶液,根據(jù)氣質(zhì)聯(lián)用法依次對6份供試品溶液進(jìn)行測定,記錄樣品的峰面積,計算其相對標(biāo)準(zhǔn)偏差。

        1.7.4 ?加標(biāo)回收率試驗 ?分別稱取艾納香組培苗和貴州羅甸野生苗各0.04 g,制備成樣品溶液,從中各取出6份,先測出藥材中龍腦的含量,再向每份中加入0.300 mg龍腦對照品,由氣質(zhì)聯(lián)用儀測定6個樣品峰面積,計算平均回收率以及相對標(biāo)準(zhǔn)偏差。

        1.7.5 ?樣品含量的測定 ?分別量取愈傷組織供試品溶液、組培苗供試品溶液和野生苗供試品溶液各1 μL依次進(jìn)樣,測定出峰面積,計算供試品溶液中龍腦的含量,每份平行測定3次。

        2 ?結(jié)果與分析

        2.1 ?龍腦對照品溶液及樣品溶液氣質(zhì)聯(lián)用分析

        從0.03 mg/mL的對照品溶液及樣品溶液中精密量取1 μL溶液進(jìn)樣,從圖1至4可以看出,龍腦標(biāo)準(zhǔn)品的出峰時間在7.621 min;樣品色譜圖在7.621 min有一吸收峰與龍腦標(biāo)準(zhǔn)品保留時間一致;質(zhì)譜圖檢索結(jié)果為龍腦成分。

        2.2 ?線性關(guān)系分析

        以龍腦的濃度為橫坐標(biāo),峰面積為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,見表1、圖5,計算回歸方程為:y=173.602 5 x,R2為0.997 01。結(jié)果表明,龍腦在0.02~0.06 mg/mL內(nèi)線性關(guān)系良好(n=5)。

        2.3 ?精密度測定結(jié)果

        由精密度試驗方法,用氣質(zhì)聯(lián)用儀進(jìn)行分析,結(jié)果見表2,其相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為0.44%。表明方法的精密度良好。

        2.4 ?重復(fù)性試驗結(jié)果

        根據(jù)重復(fù)性試驗考察方法,由氣質(zhì)聯(lián)用儀進(jìn)行測定,結(jié)果見表3。

        由表3可得,6份供試品溶液中龍腦平均含量為3.621 6 mg/g,RSD為0.16%,表明方法的重復(fù)性好。

        2.5 ?加標(biāo)回收率試驗結(jié)果

        測得組培苗中龍腦的平均回收率97.11%,RSD為1.14%;野生苗中龍腦的平均回收率97.78%,RSD為0.67%,表明該方法的準(zhǔn)確度高(表4)。

        2.6 ?樣品含量的測定

        從表5可以得出艾納香組培苗中龍腦的平均含量為3.216 7 mg/g,貴州羅甸艾納香野生苗中龍腦的平均含量為3.620 0 mg/g。

        3 ?小結(jié)與討論

        在擬定的色譜條件下,以無水乙醇作為艾納香中龍腦的提取溶劑,采用超聲提取,簡化了樣品的制備方法,而且艾納香中龍腦的含量測定沒有受到其他成分的干擾。氣質(zhì)聯(lián)用儀用于檢測揮發(fā)性物質(zhì)靈敏度高、準(zhǔn)確度好。運(yùn)用該方法,在對照品標(biāo)準(zhǔn)溶液中,色譜圖中龍腦出峰的時間在7.621 min,愈傷組織的色譜分析顯示,在該時間處沒有吸收峰,這說明愈傷組織中不存在龍腦。組培苗、羅甸野生苗質(zhì)譜圖分析確定是龍腦,其中組培苗中龍腦的含量較野生苗低,但差異不大,原因可能是組培苗培養(yǎng)時間較短,龍腦在植物體內(nèi)有一個逐步累積的過程。但組培苗可以人工快速培育繁殖,縮短培育周期,為艾納香藥材應(yīng)用提供大量的苗木,以滿足日益增長的市場需求。

        參考文獻(xiàn):

        [1] 中國科學(xué)院中國植物編輯委員會.中國植物志[M].北京:科學(xué)出版社,1979.

        [2] 全國中草藥匯編編寫組.全國中草藥匯編(上冊)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,1996.

        [3] 郝小燕,余 ?珍,丁智慧.黔產(chǎn)艾納香揮發(fā)油化學(xué)成分研究[J].貴陽醫(yī)學(xué)院學(xué)報,2000,25(2):121-122.

        [4] 王治平,孟祥平,樊 ?華.滇桂艾納香揮發(fā)油化學(xué)成分的GC-MS分析[J].中草藥,2005,36(8):1138-11.

        [5] 周 ?欣,楊小生,趙 ?超.艾納香揮發(fā)油化學(xué)成分的氣相色譜-質(zhì)譜分析[J].分析測試學(xué)報,2001,20(5):76-78.

        [6] 方 ?燦,陳 ?琳.氣相色譜法測定艾納香油中左旋龍腦的含量[J].中國醫(yī)院藥學(xué)雜志,2006,26(9):1166-1167.

        [7] 江興龍,潘俊鋒,司 ?健,等.艾納香人工栽培技術(shù)[J].林業(yè)科技開發(fā),2005,19(2):68-70.

        [8] 何元農(nóng),丁 ?映,曾令祥,等.影響艾納香移栽成活率的因素分析及技術(shù)對策[J].貴州農(nóng)業(yè)科學(xué),2005,33(3):40-43.

        (責(zé)任編輯 ?胡西洲)

        1.5.2 ?質(zhì)譜條件 ?電子轟擊粒子源,電離能量為70 eV;離子源溫度為230 ℃;傳輸線溫度為210 ℃;四級桿溫度為150 ℃。

        1.6 ?樣品的處理

        分別將艾納香愈傷組織、艾納香組培苗、野生苗3種樣品用研缽粉碎,準(zhǔn)確稱取粉碎樣品8 g,放至250 mL的錐形瓶中,加無水乙醇100 mL,進(jìn)行超聲提取(超聲時間為120 min,頻率為59 Hz,功率為80%),冷卻、搖勻、過濾,濾液置于100 mL容量瓶中,放冷,加無水乙醇至刻度,搖勻,從100 mL容量瓶中再取1 mL溶液,置10 mL容量瓶中,加無水乙醇至刻度,搖勻,即為樣品溶液。

        1.7 ?龍腦對照品的氣質(zhì)聯(lián)用分析

        分別從0.03 mg/mL的龍腦對照品溶液及樣品溶液中精密量取1 μL溶液,運(yùn)用氣質(zhì)聯(lián)用儀進(jìn)行測定。

        1.7.1 ?標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 ?分別精密吸取濃度為0.02、0.03、0.04、0.05、0.06 mg/mL的龍腦對照品溶液各1 μL,依次進(jìn)樣,運(yùn)用氣質(zhì)聯(lián)用儀分別測定其峰面積,以龍腦對照品的峰面積為縱坐標(biāo),龍腦對照品濃度為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

        1.7.2 ?精密度測定 ?取濃度為0.03 mg/mL的龍腦對照品溶液1 μL,連續(xù)進(jìn)樣6次,根據(jù)峰面積計算其相對標(biāo)準(zhǔn)偏差。

        1.7.3 ?重復(fù)性試驗 ?取艾納香野生苗,按照樣品溶液制備方法配制6份100 mL的溶液,根據(jù)氣質(zhì)聯(lián)用法依次對6份供試品溶液進(jìn)行測定,記錄樣品的峰面積,計算其相對標(biāo)準(zhǔn)偏差。

        1.7.4 ?加標(biāo)回收率試驗 ?分別稱取艾納香組培苗和貴州羅甸野生苗各0.04 g,制備成樣品溶液,從中各取出6份,先測出藥材中龍腦的含量,再向每份中加入0.300 mg龍腦對照品,由氣質(zhì)聯(lián)用儀測定6個樣品峰面積,計算平均回收率以及相對標(biāo)準(zhǔn)偏差。

        1.7.5 ?樣品含量的測定 ?分別量取愈傷組織供試品溶液、組培苗供試品溶液和野生苗供試品溶液各1 μL依次進(jìn)樣,測定出峰面積,計算供試品溶液中龍腦的含量,每份平行測定3次。

        2 ?結(jié)果與分析

        2.1 ?龍腦對照品溶液及樣品溶液氣質(zhì)聯(lián)用分析

        從0.03 mg/mL的對照品溶液及樣品溶液中精密量取1 μL溶液進(jìn)樣,從圖1至4可以看出,龍腦標(biāo)準(zhǔn)品的出峰時間在7.621 min;樣品色譜圖在7.621 min有一吸收峰與龍腦標(biāo)準(zhǔn)品保留時間一致;質(zhì)譜圖檢索結(jié)果為龍腦成分。

        2.2 ?線性關(guān)系分析

        以龍腦的濃度為橫坐標(biāo),峰面積為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,見表1、圖5,計算回歸方程為:y=173.602 5 x,R2為0.997 01。結(jié)果表明,龍腦在0.02~0.06 mg/mL內(nèi)線性關(guān)系良好(n=5)。

        2.3 ?精密度測定結(jié)果

        由精密度試驗方法,用氣質(zhì)聯(lián)用儀進(jìn)行分析,結(jié)果見表2,其相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為0.44%。表明方法的精密度良好。

        2.4 ?重復(fù)性試驗結(jié)果

        根據(jù)重復(fù)性試驗考察方法,由氣質(zhì)聯(lián)用儀進(jìn)行測定,結(jié)果見表3。

        由表3可得,6份供試品溶液中龍腦平均含量為3.621 6 mg/g,RSD為0.16%,表明方法的重復(fù)性好。

        2.5 ?加標(biāo)回收率試驗結(jié)果

        測得組培苗中龍腦的平均回收率97.11%,RSD為1.14%;野生苗中龍腦的平均回收率97.78%,RSD為0.67%,表明該方法的準(zhǔn)確度高(表4)。

        2.6 ?樣品含量的測定

        從表5可以得出艾納香組培苗中龍腦的平均含量為3.216 7 mg/g,貴州羅甸艾納香野生苗中龍腦的平均含量為3.620 0 mg/g。

        3 ?小結(jié)與討論

        在擬定的色譜條件下,以無水乙醇作為艾納香中龍腦的提取溶劑,采用超聲提取,簡化了樣品的制備方法,而且艾納香中龍腦的含量測定沒有受到其他成分的干擾。氣質(zhì)聯(lián)用儀用于檢測揮發(fā)性物質(zhì)靈敏度高、準(zhǔn)確度好。運(yùn)用該方法,在對照品標(biāo)準(zhǔn)溶液中,色譜圖中龍腦出峰的時間在7.621 min,愈傷組織的色譜分析顯示,在該時間處沒有吸收峰,這說明愈傷組織中不存在龍腦。組培苗、羅甸野生苗質(zhì)譜圖分析確定是龍腦,其中組培苗中龍腦的含量較野生苗低,但差異不大,原因可能是組培苗培養(yǎng)時間較短,龍腦在植物體內(nèi)有一個逐步累積的過程。但組培苗可以人工快速培育繁殖,縮短培育周期,為艾納香藥材應(yīng)用提供大量的苗木,以滿足日益增長的市場需求。

        參考文獻(xiàn):

        [1] 中國科學(xué)院中國植物編輯委員會.中國植物志[M].北京:科學(xué)出版社,1979.

        [2] 全國中草藥匯編編寫組.全國中草藥匯編(上冊)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,1996.

        [3] 郝小燕,余 ?珍,丁智慧.黔產(chǎn)艾納香揮發(fā)油化學(xué)成分研究[J].貴陽醫(yī)學(xué)院學(xué)報,2000,25(2):121-122.

        [4] 王治平,孟祥平,樊 ?華.滇桂艾納香揮發(fā)油化學(xué)成分的GC-MS分析[J].中草藥,2005,36(8):1138-11.

        [5] 周 ?欣,楊小生,趙 ?超.艾納香揮發(fā)油化學(xué)成分的氣相色譜-質(zhì)譜分析[J].分析測試學(xué)報,2001,20(5):76-78.

        [6] 方 ?燦,陳 ?琳.氣相色譜法測定艾納香油中左旋龍腦的含量[J].中國醫(yī)院藥學(xué)雜志,2006,26(9):1166-1167.

        [7] 江興龍,潘俊鋒,司 ?健,等.艾納香人工栽培技術(shù)[J].林業(yè)科技開發(fā),2005,19(2):68-70.

        [8] 何元農(nóng),丁 ?映,曾令祥,等.影響艾納香移栽成活率的因素分析及技術(shù)對策[J].貴州農(nóng)業(yè)科學(xué),2005,33(3):40-43.

        (責(zé)任編輯 ?胡西洲)

        1.5.2 ?質(zhì)譜條件 ?電子轟擊粒子源,電離能量為70 eV;離子源溫度為230 ℃;傳輸線溫度為210 ℃;四級桿溫度為150 ℃。

        1.6 ?樣品的處理

        分別將艾納香愈傷組織、艾納香組培苗、野生苗3種樣品用研缽粉碎,準(zhǔn)確稱取粉碎樣品8 g,放至250 mL的錐形瓶中,加無水乙醇100 mL,進(jìn)行超聲提取(超聲時間為120 min,頻率為59 Hz,功率為80%),冷卻、搖勻、過濾,濾液置于100 mL容量瓶中,放冷,加無水乙醇至刻度,搖勻,從100 mL容量瓶中再取1 mL溶液,置10 mL容量瓶中,加無水乙醇至刻度,搖勻,即為樣品溶液。

        1.7 ?龍腦對照品的氣質(zhì)聯(lián)用分析

        分別從0.03 mg/mL的龍腦對照品溶液及樣品溶液中精密量取1 μL溶液,運(yùn)用氣質(zhì)聯(lián)用儀進(jìn)行測定。

        1.7.1 ?標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 ?分別精密吸取濃度為0.02、0.03、0.04、0.05、0.06 mg/mL的龍腦對照品溶液各1 μL,依次進(jìn)樣,運(yùn)用氣質(zhì)聯(lián)用儀分別測定其峰面積,以龍腦對照品的峰面積為縱坐標(biāo),龍腦對照品濃度為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

        1.7.2 ?精密度測定 ?取濃度為0.03 mg/mL的龍腦對照品溶液1 μL,連續(xù)進(jìn)樣6次,根據(jù)峰面積計算其相對標(biāo)準(zhǔn)偏差。

        1.7.3 ?重復(fù)性試驗 ?取艾納香野生苗,按照樣品溶液制備方法配制6份100 mL的溶液,根據(jù)氣質(zhì)聯(lián)用法依次對6份供試品溶液進(jìn)行測定,記錄樣品的峰面積,計算其相對標(biāo)準(zhǔn)偏差。

        1.7.4 ?加標(biāo)回收率試驗 ?分別稱取艾納香組培苗和貴州羅甸野生苗各0.04 g,制備成樣品溶液,從中各取出6份,先測出藥材中龍腦的含量,再向每份中加入0.300 mg龍腦對照品,由氣質(zhì)聯(lián)用儀測定6個樣品峰面積,計算平均回收率以及相對標(biāo)準(zhǔn)偏差。

        1.7.5 ?樣品含量的測定 ?分別量取愈傷組織供試品溶液、組培苗供試品溶液和野生苗供試品溶液各1 μL依次進(jìn)樣,測定出峰面積,計算供試品溶液中龍腦的含量,每份平行測定3次。

        2 ?結(jié)果與分析

        2.1 ?龍腦對照品溶液及樣品溶液氣質(zhì)聯(lián)用分析

        從0.03 mg/mL的對照品溶液及樣品溶液中精密量取1 μL溶液進(jìn)樣,從圖1至4可以看出,龍腦標(biāo)準(zhǔn)品的出峰時間在7.621 min;樣品色譜圖在7.621 min有一吸收峰與龍腦標(biāo)準(zhǔn)品保留時間一致;質(zhì)譜圖檢索結(jié)果為龍腦成分。

        2.2 ?線性關(guān)系分析

        以龍腦的濃度為橫坐標(biāo),峰面積為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,見表1、圖5,計算回歸方程為:y=173.602 5 x,R2為0.997 01。結(jié)果表明,龍腦在0.02~0.06 mg/mL內(nèi)線性關(guān)系良好(n=5)。

        2.3 ?精密度測定結(jié)果

        由精密度試驗方法,用氣質(zhì)聯(lián)用儀進(jìn)行分析,結(jié)果見表2,其相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為0.44%。表明方法的精密度良好。

        2.4 ?重復(fù)性試驗結(jié)果

        根據(jù)重復(fù)性試驗考察方法,由氣質(zhì)聯(lián)用儀進(jìn)行測定,結(jié)果見表3。

        由表3可得,6份供試品溶液中龍腦平均含量為3.621 6 mg/g,RSD為0.16%,表明方法的重復(fù)性好。

        2.5 ?加標(biāo)回收率試驗結(jié)果

        測得組培苗中龍腦的平均回收率97.11%,RSD為1.14%;野生苗中龍腦的平均回收率97.78%,RSD為0.67%,表明該方法的準(zhǔn)確度高(表4)。

        2.6 ?樣品含量的測定

        從表5可以得出艾納香組培苗中龍腦的平均含量為3.216 7 mg/g,貴州羅甸艾納香野生苗中龍腦的平均含量為3.620 0 mg/g。

        3 ?小結(jié)與討論

        在擬定的色譜條件下,以無水乙醇作為艾納香中龍腦的提取溶劑,采用超聲提取,簡化了樣品的制備方法,而且艾納香中龍腦的含量測定沒有受到其他成分的干擾。氣質(zhì)聯(lián)用儀用于檢測揮發(fā)性物質(zhì)靈敏度高、準(zhǔn)確度好。運(yùn)用該方法,在對照品標(biāo)準(zhǔn)溶液中,色譜圖中龍腦出峰的時間在7.621 min,愈傷組織的色譜分析顯示,在該時間處沒有吸收峰,這說明愈傷組織中不存在龍腦。組培苗、羅甸野生苗質(zhì)譜圖分析確定是龍腦,其中組培苗中龍腦的含量較野生苗低,但差異不大,原因可能是組培苗培養(yǎng)時間較短,龍腦在植物體內(nèi)有一個逐步累積的過程。但組培苗可以人工快速培育繁殖,縮短培育周期,為艾納香藥材應(yīng)用提供大量的苗木,以滿足日益增長的市場需求。

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        (責(zé)任編輯 ?胡西洲)

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