黃文麗 李 強(qiáng) 李小林 陳祖琴 鄭林用

(1.四川省農(nóng)業(yè)科學(xué)院生物技術(shù)核技術(shù)研究所，成都 610066;2.四川大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，成都 610064;3.四川省農(nóng)業(yè)科學(xué)院土壤肥料研究所，成都 610066;4.四川省農(nóng)業(yè)科學(xué)院，成都 610066)

隨著社會經(jīng)濟(jì)的發(fā)展，人民生活水平的提高，因熱量、營養(yǎng)成分?jǐn)z取過?；蛏攀巢黄胶庵路逝职Y患者越來越多。肥胖不僅影響人們的日常工作和生活，且嚴(yán)重危害身心健康，易發(fā)高脂血癥、高血壓、糖尿病、腎臟病、心腦血管疾病。面對這一社會現(xiàn)實(shí)，加強(qiáng)優(yōu)質(zhì)減肥降脂食品的研發(fā)，具有積極深遠(yuǎn)的社會意義和廣闊的市場前景。

毛木耳［Auricularia polytricha(Mont.)Sacc.］又稱黃背木耳，屬木耳科(Auriculariaceae)木耳屬。其營養(yǎng)豐富，富含纖維素和多種生物活性物質(zhì)［1］，脂肪含量低［2］，具廣泛的藥用價(jià)值［3－6］。研究表明，毛木耳具有補(bǔ)氣血、降血液黏度、降血脂、清肺潤燥、清滌胃腸、通便降壓、化結(jié)石、抗血栓、預(yù)防動(dòng)脈粥樣硬化、中風(fēng)和心肌梗死等功效［7－8］。清源等［9］從毛木耳子實(shí)體中提取出了活性多糖APPⅡA，并探討了它的結(jié)構(gòu);毛木耳多糖是毛木耳的主要活性成分［10－12］，具有抗凝血和降血脂的作用［13］;毛木耳多糖及糖蛋白能顯著降低老鼠血液中膽固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白含量［14－15］。原材料若經(jīng)超微粉碎可增大粉體的比表面積，促進(jìn)活性成分的溶出，提高功效［16］。但是毛木耳的粒徑與功效活性之間關(guān)系的研究未見報(bào)道。本研究旨在考察不同劑量、粒徑(300～400目和＞400目)的毛木耳細(xì)粉對SD大鼠高脂性飲食誘發(fā)肥胖的減肥功效，為進(jìn)一步開發(fā)毛木耳營養(yǎng)食品提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 樣品

毛木耳(川耳6號)干品，主要成分有粗蛋白質(zhì)(6.10%)、粗脂肪(0.15%)、粗纖維(32.20%)、粗灰分(1.61%)、水分(9.02%)、碳水化合物(50.90%)、鈣 (0.25%)、鎂 (0.14%)、鐵(43.10 mg/kg)、鉀(0.22%)，經(jīng)超微粉碎，再分別過300和400目篩得到300～400目和＞400目的毛木耳細(xì)粉。

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物及飼料

1.2.1 動(dòng)物

清潔級雄性 SD大鼠 138只，體重 180～220 g。分籠飼養(yǎng)，每籠3～4只。飼養(yǎng)地點(diǎn):成都中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院試驗(yàn)動(dòng)物房，控制室溫(22±2)℃，相對濕度(60±10)%。

1.2.2 飼料

空白對照組:基礎(chǔ)飼料(購于成都達(dá)碩生物科技有限公司，粗蛋白質(zhì)＞18%，粗脂肪＞4%，粗纖維＜5%，賴氨酸＞1.32%)。

模型對照組和毛木耳細(xì)粉組:營養(yǎng)飼料組成為15.0%蔗糖、15.0%豬油和70%基礎(chǔ)飼料。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 適應(yīng)期

將大鼠飼喂基礎(chǔ)飼料觀察5 d。

1.3.2 造模篩選期

適應(yīng)期后，按體重隨機(jī)分成2組，12只大鼠給予基礎(chǔ)飼料作為空白對照組，126只給予營養(yǎng)飼料作為模型組。每周記錄給食量、剩食量，稱量體重1次。喂養(yǎng)2周后，給予營養(yǎng)飼料的大鼠按體重增重排序，淘汰體重增重較低的1/3肥胖抵抗大鼠。

1.3.3 受試樣品給予

將篩選出的84只肥胖敏感大鼠隨機(jī)分成7組，每組12只，分別為模型對照組和6個(gè)毛木耳細(xì)粉組(300～400目及＞400目毛木耳細(xì)粉高、中、低劑量組)。模型對照組和6個(gè)毛木耳細(xì)粉組給予營養(yǎng)飼料，空白對照組給予基礎(chǔ)飼料。各毛木耳細(xì)粉組灌胃給予不同劑量(1 250、1 000和750 mg/kg)的受試樣品，模型對照組和空白對照組給予等量的純化水，受試樣品給予6周。每周記錄給食量、剩食量，稱量體重1次。

試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，給各鼠腹腔注射10%水合氯醛(每100 g體重0.2 mL)麻醉，腹主靜脈取血后解剖取腎周圍脂肪、睪丸周圍脂肪，并稱重，計(jì)算脂/體比。

1.3.4 檢測指標(biāo)

體重、體增重、攝食總量、攝入總熱量(攝食量×每千克飼料熱量)、食物利用率、脂重(睪丸及腎周圍脂肪墊)、脂/體比。

1.4 數(shù)據(jù)處理

數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，采用SPSS 19.0，首先進(jìn)行正態(tài)分布與方差齊性檢驗(yàn)，在服從正態(tài)分布以及方差齊性的條件下，采用一般線性模型下的單變量多因素方差分析(one-way ANOVA，LSD)，分析不同時(shí)間、不同粒徑、不同劑量對體重增重與降脂功效的影響。

2 結(jié)果

2.1 肥胖模型構(gòu)建

試驗(yàn)所用基礎(chǔ)飼料和營養(yǎng)飼料的總能分別為14.16 和 17.06 kJ/kg，模型對照組雄性 SD 大鼠經(jīng)過 2 周飼喂，體重增長(59.6±21.7)g，顯著高于飼喂基礎(chǔ)飼料的空白對照組［(38.0±7.3)g］(P＜0.05)，篩選出的肥胖敏感大鼠體重在(70.5±14.0)g，與空白對照組比較有極顯著差異(P＜0.01)。

2.2 不同劑量的毛木耳細(xì)粉對肥胖大鼠食物利用的影響

毛木耳細(xì)粉經(jīng)口灌胃至肥胖敏感的雄性SD大鼠42 d后，各組試組大鼠每周的攝食總量和攝入總熱量如表1所示，各組大鼠的攝食總量無顯著差異(P＞0.05)，攝入總熱量空白對照組與模型對照組有顯著差異(P＜0.05)，其他試驗(yàn)組的攝入總熱量與模型對照組無顯著差異(P＞0.05)。毛木耳細(xì)粉經(jīng)口灌胃至肥胖敏感的雄性SD大鼠42 d后，食物利用率結(jié)果見表2，結(jié)果顯示各組的食物利用率無顯著性差異(P＞0.05)。

2.3 不同劑量的毛木耳細(xì)粉對肥胖大鼠體重及體增重的影響

毛木耳細(xì)粉經(jīng)口灌胃至肥胖敏感的雄性SD大鼠42 d后，體重及體增重結(jié)果見表3，模型對照組大鼠食用營養(yǎng)飼料后體重一直高于空白對照組，差異極顯著(P＜0.01)。300～400目和＞400目高劑量(1 250 mg/kg)毛木耳細(xì)粉組大鼠體重較模型對照組大鼠體重更輕，且從第2周持續(xù)到第6周，都有極顯著差異(P＜0.01)，300～400目和＞400目中劑量(1 000 mg/kg)毛木耳細(xì)粉組大鼠體重從第4周開始與模型對照組比較有顯著差異(P＜0.05)。300～400目和＞400 目高、中劑量毛木耳細(xì)粉組大鼠的體增重均比模型對照組低(P＜0.05或 P＜0.01)。

表1 不同劑量毛木耳細(xì)粉對大鼠攝食總量和攝入總熱量的影響Table 1 Effects of Auricularia polytricha powder with different doses on total food and calorie intake of rats

表2 不同劑量毛木耳細(xì)粉對大鼠食物利用率的影響Table 2 Effects of Auricularia polytricha powder with different doses on food utilization rate of rats %

2.4 不同劑量的毛木耳細(xì)粉對大鼠血清生化指標(biāo)的影響

毛木耳細(xì)粉經(jīng)口灌胃至肥胖敏感的雄性SD大鼠42 d后，腹主靜脈取血測血清總膽固醇(total cholestrol，TC)、甘油三酯(triglyceride，TG)、低密度脂蛋白膽固醇(low-density lipoprotein cholesterol，LDL-C)、高密度脂蛋白膽固醇(high-density lipoprotein cholesterol，HDL-C)含量，結(jié)果見表 4。模型對照組大鼠食用高脂營養(yǎng)飼料后血清TC和LDL-C含量顯著高于空白對照組大鼠(P＜0.05)，表明高脂模型成功。300～400目、＞400目高劑量的毛木耳細(xì)粉可降低肥胖模型大鼠的血清TC、LDL-C 含量 (P＜0.05 或 P＜0.01)，300～400目中劑量的毛木耳細(xì)粉可降低肥胖模型大鼠的血清TC含量(P＜0.05)。

表3 毛木耳細(xì)粉對肥胖大鼠體重和體增重的影響Table 3 Effects of Auricularia polytricha powder with different doses on body weight and body weight gain of rats g

毛木耳細(xì)粉經(jīng)口灌胃至肥胖敏感的雄性SD大鼠42 d后，放血處死，解剖取腎周圍脂肪、睪丸周圍脂肪，并稱重，計(jì)算脂/體比，結(jié)果見表5。模型對照組大鼠食用高脂營養(yǎng)飼料后脂重和脂/體比均高于空白對照組(P＜0.01)，表明模型建立成功。300～400目高、中劑量，＞400目高劑量的毛木耳細(xì)粉可降低肥胖模型大鼠的脂重(P＜0.05或P＜0.01)。

表5 不同劑量毛木耳細(xì)粉對大鼠脂/體比的影響Table 5 Effects of Auricularia polytricha powder with different doses on fat body ratio of rats

3 討論

肥胖是糖尿病、心血管疾病等多種疾病的危險(xiǎn)因素［2］。減肥是一個(gè)世界性話題，對于肥胖人群來說，減肥是一個(gè)艱難的歷程，如果能開發(fā)出功效顯著的減肥產(chǎn)品，那將是肥胖者的福音。毛木耳是一種食藥兼用的蕈菌，具有多種藥用功效。在我國分布廣、易栽培，來源廣泛，價(jià)格低廉，是不可多得的食品加工材料。目前已有毛木耳有減肥降脂功效的報(bào)道，若將其開發(fā)成保健品，則市場潛力巨大。

本次試驗(yàn)結(jié)果顯示，模型對照組大鼠體重、體增重、脂/體比等指標(biāo)均顯著高于空白對照組，表明肥胖模型成功建立;同時(shí)，模型對照組大鼠血清TC、LDL-C含量均顯著高于空白對照組，表明高脂血癥模型也成立。在各試驗(yàn)組大鼠食物攝入量及利用率無顯著差異的情況下，300～400目和＞400目1 250和1 000 mg/kg毛木耳細(xì)粉可降低肥胖模型大鼠的體重，同時(shí)可降低肥胖模型大鼠的體增重，說明毛木耳細(xì)粉具有減肥的功效。此外，結(jié)果還發(fā)現(xiàn)毛木耳細(xì)粉可降低肥胖模型大鼠的脂重、脂/體比以及血清 TC、LDL-C含量，且劑量越高降脂效果越明顯。早在1999年，吳春敏等［13］就證明了毛木耳浸提物具有降血脂的功能，后來恩威藥業(yè)將毛木耳子實(shí)體烘干研成細(xì)粉，制成“活血降脂顆?！保?7］。本試驗(yàn)證實(shí)了毛木耳細(xì)粉對高脂營養(yǎng)飼料誘導(dǎo)的肥胖大鼠有降血脂功效，與前人研究相符。本研究在前人的基礎(chǔ)上，系統(tǒng)的研究300～400目和＞400目毛木耳細(xì)粉的減肥降脂功效，確實(shí)得出毛木耳可減肥降脂。

研究發(fā)現(xiàn)毛木耳多糖是毛木耳主要活性成分［18］，將其經(jīng)超微粉碎可增大粉體的比表面積，促進(jìn)活性成分的溶出，但粉碎得過細(xì)導(dǎo)致雜質(zhì)物質(zhì)溶出，影響活性物質(zhì)吸收。本試驗(yàn)中雖然300目以上的毛木耳細(xì)粉均有減肥降脂功效，但300～400目毛木耳細(xì)粉的減肥降脂功效略優(yōu)于＞400目的，而且劑量越高減肥降脂功效越好，300～400目高劑量組的減肥降脂功效最好。其原因可能是＞400目的毛木耳細(xì)粉過細(xì)，影響活性物質(zhì)吸收，影響了其減肥降脂效果。

綜合來看，300～400目和＞400目毛木耳細(xì)粉均有減肥降脂功效，且功效與劑量呈正相關(guān)，300～400目高劑量毛木耳細(xì)粉的減肥降脂功效最好。本研究為毛木耳減肥產(chǎn)品的開發(fā)提供參考依據(jù)，為毛木耳精深加工奠定基礎(chǔ)。但在保健品開發(fā)中，如何平衡攝入量與減肥降脂效果之間的關(guān)系，攝入適當(dāng)量的毛木耳細(xì)粉，有待進(jìn)一步的試驗(yàn)。

4 結(jié)論

不同劑量的毛木耳細(xì)粉的減肥降脂功效差異顯著，300目以上毛木耳細(xì)粉的動(dòng)物減肥功能試驗(yàn)結(jié)果陽性，300～400目高劑量毛木耳細(xì)粉的減肥降脂功效最好。

［1］ 曹蕊，清源.毛木耳水溶性粗多糖的提取工藝［J］.食品研究與開發(fā)，2010，31(12):89－92.

［2］ 呂文英.黑木耳和毛木耳中無機(jī)營養(yǎng)元素含量的測定與研究［J］.微量元素與健康研究，2007，24(4):30－31.

［3］ 鄭林用，何希德，何權(quán)，等.毛木耳對小鼠免疫功能的影響研究［J］.中國食用菌，2010，29(5):43－45.

［4］ 沈叢微，羅霞，江南，等.毛木耳補(bǔ)血作用的試驗(yàn)研究［J］.時(shí)珍國醫(yī)國藥，2012，23(7):1674－1675.

［5］ 張丹，鄭有良.毛木耳(Auricularia polytricha)的研究進(jìn)展［J］.西南農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2004，17(5):668－673.

［6］ 鐘韓，楊振湖，李惠英，等.毛木耳多糖誘導(dǎo)血小板聚集作用研究［J］.廣東藥學(xué)院學(xué)報(bào)，2002，18(1):27－28.

［7］ ZHOU J，CHEN Y，XIN M T.Structure analysis and antimutagenic activity of a novel salt-soluble polysaccharide from Auricularia polytricha［J］.Journal of the Science of Food and Agriculture，2013，93(13):3225－3230.

［8］ WANG W，ZHANG G G，ZOU J M.The interaction of polysaccharide from Auricularia polytricha with quantum dots and the protection of plasmid DNA from damage［J］.Applied Biochemistry and Biotechnology，2013，169(8):2263－2272.

［9］ 清源，余夢瑤，羅霞，等.毛木耳子實(shí)體中活性多糖APPⅡA的分離純化與結(jié)構(gòu)初探［J］.菌物學(xué)報(bào)，2009，28(6):813－818.

［10］ 沈叢微，羅霞，江南，等.毛木耳多糖的藥理研究進(jìn)展［J］.安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2011，39(22):13407－13408.

［11］ SONG G L，DU Q Z.Structure characterization and antitumor activity of an alpha beta-glucan polysaccharide from Auricularia polytricha［J］.Food Research International，2012，45(1):381－387.

［12］ SONG G L，DU Q Z.Structure characterisation of a alpha beta-glucan polysaccharide from Auricularia polytricha［J］.Natural Product Research，2012，26(21):1963－1970.

［13］ 吳春敏，陳瓊?cè)A.毛木耳多糖的抗凝血和降血脂作用［J］.中國藥科大學(xué)學(xué)報(bào)，1991，22(3):164－166.

［14］ 趙爽，劉宇，許峰，等.毛木耳多糖降血脂功效研究［J］.食品科技，2013，38(6):192－195.

［15］ 趙爽，劉宇，許峰，等.毛木耳子實(shí)體蛋白降血脂活性的研究［J］.現(xiàn)代食品科技，2013，29(5):941－944.

［16］ 鄧美林，吳天祥.超微粉碎對絞股藍(lán)總皂苷提取工藝的影響［J］.食品工業(yè)，2009(2):34－36.

［17］ 趙因，張悅.毛木耳的藥理作用及其臨床應(yīng)用［J］.基層中藥雜志，2001，15(1):49.

［18］ 王栩，王偉.毛木耳多糖的研究進(jìn)展［J］.漳州師范學(xué)院學(xué)報(bào):自然科學(xué)版，2010，23(4):104－107.