劉匯濤 楊 穎 邢秀梅 張鐵濤吳學(xué)壯 楊福合*

(1.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院特產(chǎn)研究所，長春 130112;2.吉林省特種經(jīng)濟(jì)動物分子生物學(xué)省部共建實(shí)驗(yàn)室，長春 130112;3.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院飼料研究所，北京 100081)

植物性飼料原料的細(xì)胞壁主要由非淀粉多糖(NSP)構(gòu)成［1］，但由于水貂等單胃動物體內(nèi)缺乏分解NSP的酶［2］，所以細(xì)胞內(nèi)的淀粉、蛋白質(zhì)等營養(yǎng)成分難以釋放，同時，NSP可以增加消化道食糜黏度和引起生理變化，從而導(dǎo)致飼料營養(yǎng)成分的消化利用率下降［3］，因此，NSP是水貂植物性飼料原料中的一種重要的抗?fàn)I養(yǎng)成分。水貂屬于肉食動物，對植物性飼料的消化能力較差［4］，目前關(guān)于畜禽玉米-豆粕型飼糧中添加復(fù)合酶制劑的應(yīng)用研究較多，實(shí)踐已經(jīng)證明復(fù)合酶制劑具有很好的效果，但是國內(nèi)在水貂飼糧中添加復(fù)合酶制劑的研究非常缺乏［5］。本試驗(yàn)主要研究了飼糧中添加不同水平和配伍的復(fù)合酶制劑對育成期水貂生長性能、營養(yǎng)物質(zhì)消化率及氮代謝的影響，旨在篩選獲得一種適宜在水貂飼糧中使用的復(fù)合酶制劑配伍及其添加水平，為復(fù)合酶制劑在水貂養(yǎng)殖中的推廣應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)用酶制劑由北京挑戰(zhàn)農(nóng)業(yè)科技有限公司提供，均為固體粉末狀。各單酶制劑的酶活分別為:淀粉酶2 354 U/g、酸性蛋白酶51 269 U/g、阿拉伯木聚糖酶14 285 U/g、甘露聚糖酶46 500 U/g、果膠酶10 000 U/g、植酸酶7 500 U/g。根據(jù)飼糧原料及育成期水貂的生理特點(diǎn)分別將上述單一酶制劑按不同比例配伍，設(shè)計了3種復(fù)合酶制劑，分別為復(fù)合酶制劑Ⅰ(compound enzyme preparationⅠ，CEPⅠ)、復(fù)合酶制劑Ⅱ(compound enzyme preparationⅡ，CEPⅡ)和復(fù)合酶制劑Ⅲ(compound enzyme preparation Ⅲ，CEPⅢ)，各復(fù)合酶制劑的酶譜見表1。

表1 試驗(yàn)用3種復(fù)合酶制劑的酶譜Table 1 Zymogram of the three kinds of compound enzyme preparation in the experiment %

1.2 試驗(yàn)設(shè)計

試驗(yàn)選用60日齡健康公水貂90只，隨機(jī)分為9組，每組10個重復(fù)，每個重復(fù)1只水貂，各組水貂初始體重相近［(1.19±0.09)kg］，組間差異不顯著(P＞0.05)。為避免遺傳因素導(dǎo)致的試驗(yàn)誤差，來自同窩的水貂分在不同組中。A組為對照組，飼喂育成期水貂基礎(chǔ)飼糧，基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平見表2，其他各組分別在基礎(chǔ)飼糧中添加不同水平的復(fù)合酶制劑Ⅰ、復(fù)合酶制劑Ⅱ和復(fù)合酶制劑Ⅲ，各組復(fù)合酶制劑的添加水平見表3。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 飼養(yǎng)試驗(yàn)

試驗(yàn)于2011年7月10日至2011年9月6日在農(nóng)業(yè)部長白山野生生物資源重點(diǎn)野外科學(xué)觀測試驗(yàn)站進(jìn)行。預(yù)試期13 d，正試期45 d。水貂單籠飼養(yǎng)，每天08:00和16:00各飼喂1次，自由采食，自由飲水。試驗(yàn)開始前，按規(guī)定對水貂進(jìn)行常規(guī)免疫。試驗(yàn)期間仔細(xì)觀察并詳細(xì)記錄水貂的采食量、發(fā)病和死亡等情況。

1.3.2 消化代謝試驗(yàn)

采用全收糞法進(jìn)行消化代謝試驗(yàn)。試驗(yàn)從正試期第36天08:00開始，至第38天08:00結(jié)束，共計3 d。每組挑選體重接近群體均值的水貂7只進(jìn)行試驗(yàn)，消化代謝試驗(yàn)期間的飼養(yǎng)管理與日常飼養(yǎng)管理保持一致。每天收集的糞便按鮮重的5%加入10%硫酸溶液，并加少量甲苯防腐，于-20℃保存。每天收集的尿液按體積的2%加入10%硫酸溶液，并加4滴甲苯防腐，于-20℃保存。試驗(yàn)結(jié)束后，將3 d收集的糞便混合均勻后稱取一部分于65℃烘干至恒重，粉碎過40目篩，制成風(fēng)干樣本，密封保存，以備測定分析;將3 d收集的尿液混合均勻后量取20 mL，于-20℃保存，以備測定分析。

1.3.3 測定指標(biāo)

水貂體重均在晨飼前(07:00—07:30)進(jìn)行空腹稱量。正試期第1天的水貂體重作為始重，之后每15 d稱1次體重，正試期第45天的體重作為末重。記錄每只水貂每天的給料量和殘余料量，計算每只水貂的采食量以及每組水貂的平均日采食量(ADFI)。根據(jù)每組水貂的平均日增重(ADG)和平均日采食量計算料重比(F/G)。

表2 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))Table 2 Composition and nutrient levels of the basal diet(air-dry basis) %

樣品分析:干物質(zhì)含量采用105℃烘干法［6］測定，粗蛋白質(zhì)含量采用凱氏定氮法［7］測定，粗脂肪含量采用索氏浸提法［8］測定。相關(guān)指標(biāo)的計算公式如下:

表3 各組復(fù)合酶制劑的添加水平Table 3 Compound enzyme preparation supplemented level in each group

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析

采用 SAS 6.12軟件包的一般線性模型(GLM)進(jìn)行統(tǒng)計分析，結(jié)果用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，P＜0.05 為差異顯著，P＜0.01 為差異極顯著。

2 結(jié)果

2.1 飼糧添加不同復(fù)合酶制劑對育成期水貂生長性能的影響

由表4可知，C組的水貂末體重和平均日增重分別顯著高于對照組 9.38%和 38.57%(P＜0.05)，其他試驗(yàn)組與對照組沒有顯著差異(P＞0.05)。各組水貂的平均日采食量和料重比與對照組相比差異不顯著(P＞0.05)。

表4 飼糧添加不同復(fù)合酶制劑對育成期水貂生長性能的影響Table 4 Effects of dietary different compound enzyme preparations on growth performance of growing minks

2.2 飼糧添加不同復(fù)合酶制劑對育成期水貂營養(yǎng)物質(zhì)消化率的影響

由表5可知，B組、C組、E組和F組水貂的干物質(zhì)消化率均極顯著高于對照組(P＜0.01)，其他試驗(yàn)組的干物質(zhì)消化率與對照組差異不顯著(P＞0.05)。B組、C組、E組、F組和I組水貂的蛋白質(zhì)消化率均極顯著高于對照組(P＜0.01)，D組、H組與對照組差異不顯著(P＞0.05)。各組水貂的脂肪消化率差異不顯著(P＞0.05)。

表5 飼糧添加不同復(fù)合酶制劑對育成期水貂營養(yǎng)物質(zhì)消化率的影響Table 5 Effects of dietary different compound enzyme preparations on nutrient digestibility of growing minks %

2.3 飼糧添加不同復(fù)合酶制劑對育成期水貂氮代謝的影響

由表6可知，試驗(yàn)組水貂的食入氮含量與對照組沒有顯著差異(P＞0.05)，I組顯著高于 C組和H組(P＜0.05)。F組和G組水貂糞氮含量顯著高于對照組(P＜0.05)，C組顯著低于 E組、F組、G 組、H 組和 I組(P＜0.05)，其他各組之間沒有顯著差異(P＞0.05)。試驗(yàn)組水貂尿氮含量與對照組沒有顯著差異(P＞0.05)，C組顯著低于I組(P＜0.05)。B組水貂的氮沉積含量顯著高于對照組、D組和H組(P＜0.05)，其他試驗(yàn)組與對照組沒有顯著差異(P＞0.05)。B組和C組的凈蛋白質(zhì)利用率顯著高于對照組和D組(P＜0.05)，其他試驗(yàn)組與對照組沒有顯著差異(P＞0.05)。各組水貂的蛋白質(zhì)生物學(xué)價值與凈蛋白質(zhì)利用率呈現(xiàn)的趨勢相一致。

表6 飼糧添加不同復(fù)合酶制劑對育成期水貂氮代謝的影響Table 6 Effects of dietary different compound enzyme preparations on nitrogen metabolism of growing minks

3 討 論

3.1 飼糧添加不同復(fù)合酶制劑對育成期水貂生長性能的影響

添加飼用復(fù)合酶制劑既能降解植物性飼料原料中NSP等抗?fàn)I養(yǎng)物質(zhì)，同時還可彌補(bǔ)機(jī)體內(nèi)源消化酶的不足，從而促進(jìn)動物對飼料的消化和利用，提高飼料報酬和生長性能［9］。前人在肉仔雞、肉鴨、仔豬、肥育豬等動物［10-15］的試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加酶制劑可在不同程度上提高動物的平均日增重和末重，同時降低料重比。本研究表明，在飼糧中添加890 mg/kg復(fù)合酶制劑Ⅰ，育成期水貂生長性能得到明顯提高，末重和平均日增重顯著增加，試驗(yàn)結(jié)果與前人在雞豬等其他動物方面的研究結(jié)果［10-15］一致。

3.2 飼糧添加不同復(fù)合酶制劑對育成期水貂營養(yǎng)物質(zhì)消化率的影響

水貂屬于肉食性動物，其消化道僅為體長的3.5～4.0倍，消化道內(nèi)蛋白酶和脂肪酶較多，而淀粉酶較少，對植物性飼料中纖維素等NSP的消化能力很弱［16］，所以細(xì)胞內(nèi)的淀粉、蛋白質(zhì)等營養(yǎng)成分難以釋放，同時，NSP可以增加消化道食糜黏度，減慢已消化營養(yǎng)物質(zhì)向腸黏膜的擴(kuò)散速度，從而導(dǎo)致飼料營養(yǎng)成分的消化利用率下降［17］。飼糧中添加適宜配伍和水平的NSP酶制劑，一方面可以降低食糜黏度，降解NSP，減弱其抗?fàn)I養(yǎng)特性;另一方面可摧毀植物細(xì)胞壁，促進(jìn)胞內(nèi)營養(yǎng)成分的釋放，有利于腸道內(nèi)的消化酶對營養(yǎng)物質(zhì)的充分接觸，增加營養(yǎng)物質(zhì)的消化利用率［14］。大量試驗(yàn)已經(jīng)證實(shí)，復(fù)合酶制劑對飼糧營養(yǎng)物質(zhì)消化率具有改善效果［18-24］。本研究表明，在飼糧中添加890 mg/kg復(fù)合酶制劑Ⅰ，育成期水貂的營養(yǎng)物質(zhì)消化率得到明顯提高，這與前人的研究報道［18-24］一致。

3.3 飼糧添加不同復(fù)合酶制劑對育成期水貂氮代謝的影響

添加酶制劑可以提高飼糧氮沉積率。據(jù)報道，在肉仔雞玉米-豆粕型飼糧中添加α-半乳糖苷酶制劑能夠使豆粕的氮沉積率提高10%以上［25-26］。本研究結(jié)果顯示，飼糧中添加890 mg/kg復(fù)合酶制劑Ⅰ后，水貂的氮沉積、凈蛋白質(zhì)利用率和蛋白質(zhì)生物學(xué)價值均明顯增加。這可能與外源復(fù)合酶制劑(尤其是蛋白酶)提高了水貂腸道內(nèi)蛋白質(zhì)的降解率有關(guān)［21，27］。

3.4 復(fù)合酶制劑的飼喂效果與其配伍和添加水平的關(guān)系

本研究表明，復(fù)合酶制劑的飼喂效果差異與其配伍和添加水平有關(guān)。飼糧中添加890 mg/kg的復(fù)合酶制劑Ⅰ時水貂末體重和平均日增重最大，生長性能得到顯著提高，獲得了最佳的飼養(yǎng)效果，其他添加水平的復(fù)合酶制劑的飼喂效果未得到明顯改善。余有貴等［28］和張輝華等［29］報道，酶制劑的效果在一定程度上與劑量呈依賴關(guān)系，過量添加時效果開始下降，本研究中的復(fù)合酶制劑Ⅰ和復(fù)合酶制劑Ⅱ也表現(xiàn)出了類似的趨勢。這可能與不同配伍和添加水平的外源酶制劑對內(nèi)源酶活性的影響不同有關(guān)。已有研究證明外源酶對內(nèi)源酶活性有影響，對內(nèi)源酶活性具有促進(jìn)或抑制作用。過量的外源酶制劑會降低動物消化道食糜黏性，增快排空速度，甚至當(dāng)酶活性過高時酶的作用產(chǎn)物反饋抑制內(nèi)源酶的分泌及活性，進(jìn)而導(dǎo)致飼用效果不佳［30］。這說明在水貂飼糧中添加適宜水平的酶制劑才可獲得良好的生長性能，過高或過低添加水平都可能會影響到酶制劑的應(yīng)用效果。

3.5 復(fù)合酶制劑比例設(shè)計及經(jīng)濟(jì)性分析

畜禽玉米-豆粕型飼糧中添加復(fù)合酶制劑的應(yīng)用研究較多，且實(shí)踐已經(jīng)證明復(fù)合酶制劑具有很好的效果，但是國內(nèi)在水貂飼糧中添加復(fù)合酶制劑的研究非常缺乏［5］。因此，本研究中復(fù)合酶制劑的比例主要參考豬、雞等畜禽研究經(jīng)驗(yàn)，并結(jié)合水貂的生理和飼糧特點(diǎn)進(jìn)行設(shè)計。水貂干粉料飼糧中的主要植物性原料是玉米和豆粕，玉米中的NSP主要是纖維素、阿拉伯木聚糖和β-葡聚糖等，豆粕中的NSP主要是果膠、甘露聚糖和α-半乳糖苷等［13-14］。本研究根據(jù)這些原料中各種NSP的含量設(shè)計出針對水貂飼糧的復(fù)合酶制劑的配伍和劑量范圍，然后進(jìn)行動物飼養(yǎng)和消化代謝試驗(yàn)，從而篩選出適合在水貂飼糧中添加的最佳復(fù)合酶制劑配伍和水平。需要指出的是，酶制劑只有在最適條件(如溫度、pH)下才能發(fā)揮出最佳的作用，今后應(yīng)加強(qiáng)水貂消化道生理方面的研究，為更加精確地選用水貂用酶制劑提供理論依據(jù)。

高秀華等［31］報道，冬毛生長期結(jié)束打皮時的活體重與水貂在育成前期的活體重呈正相關(guān)。從本研究結(jié)果來看，飼糧中添加890 mg/kg的復(fù)合酶制劑Ⅰ時育成前期水貂體重最大，根據(jù)相關(guān)系數(shù)計算，有可能在取皮時獲得最大的皮張面積。由于飼糧中所添加酶制劑的劑量非常少，其添加成本平均至每只水貂幾乎可以忽略不計，因此，在水貂飼糧中添加酶制劑可以用小投入獲得最佳的經(jīng)濟(jì)收益。

4 結(jié)論

育成期水貂飼糧中添加適宜配伍和水平的復(fù)合酶制劑可明顯改善水貂對飼糧的消化利用率，并提高其生長性能。本試驗(yàn)條件下，以添加890 mg/kg復(fù)合酶制劑Ⅰ(25.7%淀粉酶+25.6%酸性蛋白酶+20.5%阿拉伯木聚糖酶+12.8%果膠酶+2.6%甘露聚糖酶+12.8%植酸酶)的飼養(yǎng)效果最佳。

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