鐘 偉 鮑 坤 張 婷 劉鳳華 楊雅涵 張海華 李光玉

(中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院特產(chǎn)研究所，吉林省特種經(jīng)濟(jì)動(dòng)物分子生物學(xué)省部共建實(shí)驗(yàn)室，長(zhǎng)春 130112)

銅在促進(jìn)毛皮動(dòng)物生長(zhǎng)和毛色沉積方面發(fā)揮著重要作用，是毛皮動(dòng)物生長(zhǎng)必需的微量元素之一［1－2］。高銅能促進(jìn)仔豬的快速增長(zhǎng)，然而高銅在促進(jìn)毛皮動(dòng)物生長(zhǎng)方面不及豬明顯。吳學(xué)壯等［3］研究報(bào)道，添加30 mg/kg硫酸銅組比添加高水平銅組水貂的生長(zhǎng)更快。Zhong等［4］研究報(bào)道，添加高水平檸檬酸銅組銀狐的生長(zhǎng)性能與低水平檸檬酸銅組差異不顯著，添加30 mg/kg檸檬酸銅組銀狐的毛皮性能較佳。在仔豬養(yǎng)殖生產(chǎn)中，在研究高銅對(duì)生產(chǎn)帶來(lái)巨大效益的同時(shí)，開始關(guān)注高銅對(duì)豬組織器官銅沉積量增加引起的肉品質(zhì)的安全隱患及高銅排泄對(duì)環(huán)境、土壤的嚴(yán)重污染等帶來(lái)的負(fù)面效應(yīng)。大量研究表明，高銅增加了生長(zhǎng)豬組織中銅的沉積量［5－6］，增加了糞銅排出量［7］，同時(shí)高銅導(dǎo)致了組織器官的一些病變［8］。李宏等［9］研究報(bào)道，高銅增加了毛兔肝銅的沉積量并增加了糞銅和尿銅的排出量。然而在銀狐上尚無(wú)相關(guān)研究報(bào)道，因此，本試驗(yàn)旨在研究飼糧銅水平對(duì)銀狐銅表觀生物學(xué)利用率及組織器官銅沉積量的影響，進(jìn)而為銀狐養(yǎng)殖生產(chǎn)中適宜的銅添加水平提供理論數(shù)據(jù)參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)飼糧與試驗(yàn)設(shè)計(jì)

基礎(chǔ)飼糧配制參考NRC(1982)［10］狐貂營(yíng)養(yǎng)需求標(biāo)準(zhǔn)，其組成及營(yíng)養(yǎng)水平見表1。各組分別在基礎(chǔ)飼糧中添加6(Ⅰ組)、30(Ⅱ組)、60(Ⅲ組)、90(Ⅳ組)和150 mg/kg(Ⅴ組)的檸檬酸銅配制5組銅飼糧，5組飼糧中的銅含量分別近似是11、35、65、95和155 mg/kg。檸檬酸銅是有機(jī)形式，銅含量≥34%，購(gòu)自上海華亭化工廠有限公司。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diet(air-dry basis) %

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物與飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)選取50只120日齡、平均體重為(5 134±540)g的健康雌性銀狐，隨機(jī)分成5組，每組設(shè)10個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)1只銀狐。試驗(yàn)在中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院特產(chǎn)研究所毛皮動(dòng)物實(shí)驗(yàn)基地完成。試驗(yàn)動(dòng)物單籠飼養(yǎng)。試驗(yàn)從2011年10月15日開始至2011年12月13日結(jié)束，預(yù)試期7 d，正試期51 d，每天早、晚各飼喂1次，自由飲水。

1.3 消化代謝試驗(yàn)

預(yù)試期每天準(zhǔn)確稱量、記錄飼喂量和剩余料量，計(jì)算采食量，觀察動(dòng)物健康和采食狀況。試驗(yàn)開始第30天后，于2011年11月15—18日進(jìn)行消化代謝試驗(yàn)，每組選擇8只采食和排便正常、體況接近的銀狐進(jìn)行消化代謝試驗(yàn)。消化代謝試驗(yàn)共進(jìn)行4 d，利用自制的糞盤進(jìn)行全糞收集，65℃烘干，粉碎后過(guò)40目篩保存用于糞樣中銅含量測(cè)定。

1.4 樣品采集

銀狐取皮后，剪下尾部的部分毛樣產(chǎn)品;從取皮后的銀狐屠體中摘取肝臟、心臟和腎臟存于－20℃冰箱，用于毛銅及組織銅含量的檢測(cè)分析。

1.5 測(cè)定指標(biāo)及方法

基礎(chǔ)飼糧、糞樣、毛樣及組織中銅含量采用奧地利安東帕Mlultiwave 3000微波消解儀進(jìn)行前處理，利用德國(guó)耶拿Nov AA 400原子吸收光譜儀火焰法測(cè)定。

1.6 計(jì)算公式

1.7 數(shù)據(jù)整理與統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Excel 2003進(jìn)行整理，結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。采用SAS 8.0軟件中GLM程序?qū)?shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，多重比較采用Duncan氏法，其中 P＜0.01 為差異極顯著，P＜0.05 為差異顯著，P＞0.05 為差異不顯著。

2 結(jié)果

2.1 飼糧銅水平對(duì)冬毛期銀狐銅表觀生物學(xué)利用率的影響

由表2可知，飼糧銅水平對(duì)銀狐平均日采食量和糞排出量均無(wú)顯著影響(P＞0.05)。飼糧銅水平對(duì)銀狐銅攝入量有極顯著影響(P＜0.01)，隨著飼糧銅水平的增加，銅攝入量極顯著升高(P＜0.01)，Ⅴ組最高;糞銅排出量變化趨勢(shì)與銅攝入量相同，隨著飼糧銅水平的增加，糞銅排出量極顯著升高(P＜0.01)，Ⅴ組最高。飼糧銅水平對(duì)銅表觀生物學(xué)利用率無(wú)顯著影響(P＞0.05)。

表2 飼糧銅水平對(duì)冬毛期銀狐銅表觀生物學(xué)利用率的影響Table 2 Effects of dietary copper level on copper apparent biological utilization of silver foxes during the winter hair period

2.2 飼糧銅水平對(duì)冬毛期銀狐組織器官銅沉積量的影響

由表3可知，飼糧銅水平對(duì)銀狐毛銅沉積量有極顯著影響(P＜0.01)，高銅組(Ⅴ組)毛銅沉積量最高，然后依次是Ⅲ組、Ⅳ組、Ⅰ組和Ⅱ組。飼糧銅水平對(duì)肝銅沉積量有極顯著影響(P＜0.01)，Ⅱ、Ⅳ組肝銅沉積量極顯著高于Ⅰ、Ⅲ組(P＜0.01)，但與Ⅴ組均差異不顯著(P＞0.05)，Ⅰ、Ⅲ組之間差異不顯著(P＞0.05)，Ⅱ、Ⅳ組之間差異不顯著(P＞0.05)。飼糧銅水平對(duì)心銅沉積量有極顯著影響(P＜0.01)，Ⅲ組極顯著高于其他組(P＜0.01);Ⅰ組極顯著高于Ⅱ、Ⅴ組(P＜0.01)，與Ⅳ組差異不顯著(P＞0.05);Ⅱ、Ⅳ和Ⅴ組之間差異不顯著(P＞0.05)。飼糧銅水平對(duì)腎銅沉積量有極顯著影響(P＜0.01)，Ⅰ組極顯著高于Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ組(P＜0.01)，與Ⅱ組差異不顯著(P＞0.05);Ⅱ組極顯著高于Ⅳ、Ⅴ組(P＜0.01)，與Ⅲ組差異不顯著(P＞0.05);Ⅲ組極顯著高于Ⅳ、Ⅴ組(P＜0.01)，Ⅳ、Ⅴ組之間差異不顯著(P＞0.05)。

表3 飼糧銅水平對(duì)冬毛期銀狐組織器官銅沉積量的影響Table 3 Effects of dietary copper level on copper deposition in tissue and organ of silver foxes during the winter hair period mg/kg

2.3 飼糧銅水平對(duì)冬毛期銀狐組織器官發(fā)育的影響

由表4可知，飼糧銅水平對(duì)銀狐心臟重有顯著影響(P＜0.05)，Ⅱ組顯著重于Ⅰ、Ⅴ組(P＜0.05)，與Ⅲ、Ⅳ組之間差異不顯著(P＞0.05);Ⅲ、Ⅳ組之間差異不顯著(P＞0.05)，Ⅰ、Ⅴ組之間差異不顯著(P＞0.05)。飼糧銅水平對(duì)銀狐脾臟重、肝 臟重和腎臟重?zé)o顯著影響(P＞0.05)。

表4 飼糧銅水平對(duì)冬毛期銀狐組織器官發(fā)育影響Table 4 Effects of dietary copper level on tissue and organ development of silver foxes during the winter hair period g

3 討論

3.1 飼糧銅水平對(duì)冬毛期銀狐銅消化利用的影響

高銅增加了銅攝入量和糞銅排出量，但對(duì)銅表觀生物學(xué)利用率未產(chǎn)生影響，這個(gè)結(jié)果與李宏等［9］在兔上和鄭春田等［7］在豬上研究報(bào)道相一致，動(dòng)物對(duì)外源添加的高銅會(huì)自身調(diào)節(jié)，吸收利用滿足機(jī)體需要的用量，多余的銅大部分會(huì)通過(guò)糞便的形式排出體外，但長(zhǎng)期飼喂高銅會(huì)增加動(dòng)物組織器官中銅的沉積量，并對(duì)周圍的土壤和環(huán)境造成嚴(yán)重污染，建議在動(dòng)物養(yǎng)殖生產(chǎn)中謹(jǐn)慎控制銅添加量。

3.2 飼糧銅水平對(duì)冬毛期銀狐組織銅沉積量的影響

高銅促進(jìn)了銀狐毛銅的沉積，最高銅組(Ⅴ組)是低銅組(Ⅱ組)毛銅沉積量的2.25倍，與李宏等［9］在兔上的報(bào)道不一致，可能由于銅在兔和銀狐毛皮上的沉積機(jī)制差異造成，具體原因還有待于進(jìn)一步研究。銅對(duì)毛色沉積發(fā)揮重要作用，毛皮中銅沉積量也能反映出毛皮的顏色，研究報(bào)道高銅飼糧能增加水貂皮的著色度［11］。本試驗(yàn)隨飼糧銅添加水平增加，毛銅沉積量未呈規(guī)律性升高趨勢(shì)，Ⅴ組毛銅沉積量最高，其次是Ⅲ組、Ⅳ組、Ⅰ組和Ⅱ組。肝臟是動(dòng)物存儲(chǔ)銅的重要器官，是銅代謝的主要場(chǎng)所，本試驗(yàn)得出隨著飼糧銅水平增加，肝銅沉積量有升高趨勢(shì)，這與多數(shù)研究報(bào)道一致［5，12］。本試驗(yàn)得出隨著飼糧銅水平增加，心銅和腎銅沉積量產(chǎn)生無(wú)規(guī)律變化，這與張力等［5］在豬上研究報(bào)道一致，但與有些研究報(bào)道不一致［6，8，13］，可能是由于銀狐與豬、雞在銅代謝方面存在一些差異。此外，添加的銅源形式及水平也可能是導(dǎo)致沉積量呈不同的變化規(guī)律的原因，具體的差異還有待于深入研究。本試驗(yàn)得出銀狐組織器官銅沉積量從高到低分別為肝銅、毛銅、心銅和腎銅，與兔研究報(bào)道相一致［9］。

3.3 飼糧銅水平對(duì)冬毛期銀狐組織器官發(fā)育的影響

飼糧銅水平雖然對(duì)母銀狐心臟重產(chǎn)生顯著影響，但高銅并未致心臟變大，從Ⅱ組(30 mg/kg銅)至Ⅴ組(150 mg/kg銅)，心臟重呈降低趨勢(shì)，表明飼糧添加高銅會(huì)影響心臟的發(fā)育。袁施彬等［8］研究報(bào)道，高銅會(huì)導(dǎo)致大量的銅在組織中蓄積，抑制了多種酶的活性，引起了組織器官發(fā)生炎性反應(yīng)，進(jìn)而能導(dǎo)致各組織器官毛細(xì)血管紅細(xì)胞破裂，在生長(zhǎng)肥育豬上研究發(fā)現(xiàn)，添加200 mg/kg銅組豬心臟肌間出血。但本試驗(yàn)未對(duì)各組織器官進(jìn)行病理分析檢測(cè)，所以高銅影響心臟發(fā)育的具體原因還有待進(jìn)一步研究。本試驗(yàn)心銅沉積量與心臟重間未呈現(xiàn)出較強(qiáng)的正或負(fù)相關(guān)性，但Ⅰ組(6 mg/kg銅)至Ⅱ組(30 mg/kg銅)，心臟重隨心銅沉積量的減少而升高，而從Ⅲ組(60 mg/kg銅)至Ⅴ組(150 mg/kg銅)，心臟重隨心銅沉積量的減少而降低，高銅并未導(dǎo)致銀狐心銅沉積量增加，而出現(xiàn)先降低后升高再降低的變化趨勢(shì)，心臟重出現(xiàn)先升高后降低的變化趨勢(shì)，這一結(jié)果說(shuō)明適宜的銅水平有利于銀狐機(jī)體對(duì)銅的吸收利用來(lái)促進(jìn)其心臟的發(fā)育。然而高銅對(duì)肝臟重、腎臟重和脾臟重未產(chǎn)生顯著影響。

4 結(jié)論

在本試驗(yàn)條件下，銀狐冬毛期基礎(chǔ)飼糧中添加60 mg/kg檸檬酸銅(飼糧中銅含量約65 mg/kg)時(shí)，有利于銀狐對(duì)銅的消化利用。

［1］ BUSH C R，RESTUM J C，BURSIAN S J，et al.Responses of growing mink to supplemental dietary copper and biotin［J］.Scientifur，1995，19(2):141－147.

［2］ AULERICH R J，RINGER R K.Feeding copper sulfate.Could it have benefits in nutrition of mink［J］.U.S.Fur Rancher，1976，56(12):4－9.

［3］ 吳學(xué)壯，張鐵濤，崔虎，等.飼糧添加銅水平對(duì)育成期水貂生長(zhǎng)性能、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化率及氮代謝的影響［J］.動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào)，2012，24(6):1078－1084.

［4］ ZHONG W，LIU H L，LUO G L，et al.Dietary copper supplementation improves pelt characteristics of female silver fox(Vulpes fulva)during the winter furgrowing season［J］.Animal Science Journal，2014，85(7):757－762.

［5］ 張力，柳樹青.日糧不同銅水平對(duì)生長(zhǎng)豬組織器官礦物元素和血液生化指標(biāo)的影響［J］.福建農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào):自然科學(xué)版，1994，23(2):196－198.

［6］ 高鳳仙，田科雄，方熱軍，等.不同銅源和水平對(duì)生長(zhǎng)豬組織銅含量和含銅酶的影響［J］.中國(guó)畜牧獸醫(yī)，2008，35(3):13－17.

［7］ 鄭春田，蔣宗勇，林映才，等.銅的來(lái)源和水平對(duì)生長(zhǎng)豬生長(zhǎng)性能和糞銅排出量的影響［J］.中國(guó)畜牧雜志，2007，43(13):24－27.

［8］ 袁施彬，陳代文，彭西，等.添加高銅對(duì)生長(zhǎng)肥育豬組織銅殘留量及病理學(xué)變化影響的研究［J］.四川農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2006，24(2):222－227.

［9］ 李宏，鄭中朝，郭天芬，等.日糧銅水平對(duì)兔組織器官中銅沉積量及銅代謝的影響［J］.中國(guó)草食動(dòng)物，2000，2(4):11－13.

［10］ NRC.Nutrient requirements of mink and foxes［S］.2nd ed.Washington，D.C.:National Academy Press，1982.

［11］ AULERICH R J，RINGER R K，BLEAVINS M R，et al.Effects of supplemental dietary copper on growth，reproductive performance and kit survival of standard dark mink and acute toxicity of copper in minks［J］.Journal of Animal Science，1982，55(2):337－343.

［12］ 劉英麗，趙云煥.飼料銅水平對(duì)雛雞組織器官中銅、鐵、鋅含量的影響［J］.中國(guó)飼料，2009(23):42－43.

［13］ 譚芳，胡堅(jiān).日糧銅水平對(duì)肉雞組織中礦物質(zhì)元素含量的影響［J］.獸醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào)，1990，10(1):67－72.