王露，江偉，劉翔，4，王德良，劉玉梅

1(新疆大學(xué)化學(xué)化工學(xué)院，新疆烏魯木齊，830046)2(中國食品發(fā)酵工業(yè)研究院，北京，100015)

3(中德發(fā)酵酒品質(zhì)與安全國際聯(lián)合研究中心，北京，100015)4(天津科技大學(xué)生物工程學(xué)院，天津，300457)

啤酒釀造過程中，酒花是重要原料之一，其中的化學(xué)成分主要包括萜烯類和萜烯醇類［1-3］。其中，親水性較強(qiáng)的萜烯醇(如里那醇、β-香茅醇、α-萜品醇、香葉醇等)，在啤酒中的含量較高［4］，范圍在1～100 μg/L(加拿大精釀啤酒中里那醇含量高達(dá)393～906 μg/L［6］)，接近或高于其相應(yīng)的感官閾值［7］，對啤酒酒花香氣具有重要的貢獻(xiàn)［8］。

萜烯醇在麥汁煮沸及發(fā)酵過程會發(fā)生一系列的變化［9］。同時(shí)，啤酒中同一種萜烯醇因其不同的分子結(jié)構(gòu)及空間構(gòu)型而存在不同的感官閾值。以里那醇為例，因其在高品質(zhì)啤酒中的含量高，且香氣宜人，已成為目前公認(rèn)的對啤酒酒花香氣具有重要貢獻(xiàn)的化合物之一，酒花制品中的 R-(-)-里那醇和 S-(+)-里那醇分布穩(wěn)定，R 型占 92% ～94%［10-11］。然而，在啤酒釀造過程中R型異構(gòu)化轉(zhuǎn)變?yōu)镾型，S型在啤酒中的感官閾值高達(dá)180 μg/L，而R型僅為2.2 μg/L，二者相差約 81 倍［11］。Steinhaus等強(qiáng)調(diào)，R-(-)-里那醇異構(gòu)化為S-(+)-里那醇是導(dǎo)致啤酒酒花香氣下降的原因之一［12］。除里那醇外，β-香茅醇、α-萜品醇同樣存在立體異構(gòu)體，它們在釀造過程中都伴有異構(gòu)化現(xiàn)象，往往受酒花品種和不同添加工藝等條件的影響。另一方面，同一種物質(zhì)的兩種構(gòu)型可能呈現(xiàn)出的香氣也有細(xì)微差別，如香葉醇呈現(xiàn)類似玫瑰花香及柑橘香，而其順式同分異構(gòu)體橙花醇還具有生青味［13］。一些對酒花香氣貢獻(xiàn)顯著的萜烯醇在啤酒中的閾值如表1所示。

目前，關(guān)于萜烯醇立體異構(gòu)體在啤酒釀造過程中變化規(guī)律的系統(tǒng)研究較少。2000年，King等采用GC-MS法，嘗試?yán)檬中灾蛛x(-)-α-萜品醇、(+)-α-萜品醇及 R-(-)-里那醇、S-(+)-里那醇，α-萜品醇兩種構(gòu)型色譜峰得以完全分離，而里那醇兩種構(gòu)型色譜峰卻難以實(shí)現(xiàn)完全分離［16］。2003年，Steinhaus等采用穩(wěn)定同位素稀釋法，通過兩根色譜柱串聯(lián)的方式，利用高分辨率二維HPGC/MS，實(shí)現(xiàn)了對啤酒中R-(-)-里那醇、S-(+)-里那醇的分離并在線定量分析［12］。該方法的缺點(diǎn)在于成本較高，操作復(fù)雜，不易向國內(nèi)啤酒企業(yè)推廣普及。本研究采用課題組前期建立的GC-MS分析法，嘗試?yán)靡桓中陨V柱，同時(shí)測定啤酒釀造過程中，不同香花添加工藝下(R)-(-)-里那醇、S-(+)-里那醇、(R)-(+)-β-香茅醇、(S)-(-)-β-香茅醇、(+)-α-萜品醇、(-)-α-萜品醇及香葉醇、橙花醇、橙花叔醇、乙酸香茅酯、香葉酸甲酯、乙酸香葉酯，共12種萜烯醇的變化特點(diǎn)，并找出了影響啤酒酒花香氣的4種關(guān)鍵性萜烯醇，初步揭示了啤酒釀造過程中其變化規(guī)律。

表1 萜烯醇風(fēng)味描述及感官閾值Table 1 Olfactory descriptions and sensory thresholds of the terpene alcohols in commercial beer

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)所用材料

1.1.1 原料

麥芽:澳麥，由國內(nèi)啤酒企業(yè)提供。

酒花:青島大花、薩茲，由國內(nèi)一啤酒企業(yè)提供。

1.1.2 儀器與試劑

100 L微型釀造設(shè)備(D-8050型)，德國聯(lián)邦材料試驗(yàn)研究院;Clarus 600型氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀，配EI離子源，PerkinElmer;低溫恒溫水浴鍋，杭州雪中炭恒溫技術(shù)有限公司;磁力攪拌器，Corning;萬分之一天平，Shimadzu。

里那醇、(R)-(-)-里那醇、α-萜品醇、(+)-α-萜品醇、(R)-(+)-β-香茅醇、(S)-(-)-β-香茅醇、香葉醇、橙花叔醇、橙花醇、乙酸香葉酯、乙酸香茅酯、香葉酸甲酯、2-壬醇(內(nèi)標(biāo))。上述試劑均購自Acros公司和Sigma-Aldrich公司，純度均≥95.0%。

1.2 分析方法

1.2.1 頂空固相微萃取

稱取3 g NaCl于20 mL頂空瓶中，加入發(fā)酵液或除氣啤酒5 mL及內(nèi)標(biāo)溶液(頂空瓶中內(nèi)標(biāo)最終濃度為20 μg/L)，放入磁力攪拌，加蓋密封。將SPME針管穿透頂空瓶隔墊，纖維頭置于距離樣品表面約20 mm的上部空間，在一定的水浴溫度下，以550 r/min攪拌并萃取一段時(shí)間后，取出手柄，直接進(jìn)樣，并解析一定時(shí)間。所有樣品均平行測定3次。

1.2.2 色譜條件

色譜柱類型:RESTEK Rt?-bBEXsa。進(jìn)樣口溫度:240℃。不分流進(jìn)樣。柱溫:起始溫度50℃，10℃/min升至95℃;3℃/min升至120℃;18℃/min升至210℃，保持10 min。載氣:氦氣(純度≥99.999%)，流速:1 mL/min，進(jìn)樣方式:采用固相微萃取方式進(jìn)樣，萃取頭類型為85 μmPA，解析5 min。

1.2.3 質(zhì)譜條件

離子源溫度:230℃;傳輸線溫度:230℃;電子轟擊源:70 eV，比對結(jié)果后對酒花香氣化合物進(jìn)行定性，掃描范圍:29～300 amu。定性采用全掃描模式(SCAN)，定量采用選擇離子掃描模式(SIM)。每個(gè)化合物選擇1個(gè)定量離子，2～3個(gè)定性離子。全離子掃描圖如圖1所示。

圖1 Rt?-bBEXsa對12種酒花香氣及異構(gòu)體的全離子掃描圖Fig.1 Total ion current chromatogram of 12 kinds of hop aroma and stereoisomers scanned by Rt?-bBEXsa

1.2.4 感官品評分析

品評小組由接受過專業(yè)訓(xùn)練的8位品評員組成。

1.3 釀造工藝實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方案

在100 L的規(guī)模下，參考國內(nèi)13°P純生大生產(chǎn)配料糖化工藝，設(shè)計(jì)不同香花添加工藝以考察萜烯醇及其立體異構(gòu)體在發(fā)酵過程中的變化。香花分別選擇在煮沸結(jié)束前10 min、回旋沉淀槽及主酵結(jié)束后添加，其他釀造工藝和條件按國內(nèi)一知名啤酒企業(yè)的正常工藝進(jìn)行，添加量如表2所示。

表2 不同香花添加工藝實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)Table 2 The experiment design of different hopping regimes

2 結(jié)果與討論

2.1 不同香花添加工藝釀造的啤酒比對研究

2.1.1 不同香花添加工藝中萜烯醇及其立體異構(gòu)體含量對比

表3列出了4種香花添加工藝所釀造的啤酒中萜烯醇及其立體異構(gòu)體的含量。

其中R-(-)-里那醇含量受香花添加工藝影響較大，煮沸結(jié)束、回旋沉淀槽及主酵結(jié)束后添加香花工藝可大幅增加啤酒中R-(-)-里那醇的含量，相比煮沸結(jié)束前10 min工藝提升4.15～6.42倍，其含量相較于其他萜烯醇同樣也占有絕對優(yōu)勢。4種香花添加工藝釀造出的啤酒中里那醇立體異構(gòu)體之間的比例如圖2所示，R-(-)-里那醇占里那醇總量的60% ～89%，含量范圍在1.94 ～14.39 μg/L，按閾值2.2 μg/L［14］可計(jì)算出 OAV 值。R-(-)-里那醇在 4種工藝下的OAV值為0.88～6.54，表明R-(-)-里那醇對啤酒酒花香氣具有重要貢獻(xiàn)。煮沸結(jié)束前10 min添加香花工藝中，里那醇R/S構(gòu)型比例最為接近，說明R型異構(gòu)化嚴(yán)重，這將極大的影響啤酒的酒花香氣，導(dǎo)致其品質(zhì)下降。而采用其他3種工藝不僅增加了里那醇含量，而且異構(gòu)化程度明顯降低，R-(-)-里那醇所占比例超過80%，尤其是主酵結(jié)束后添加香花工藝，使R型占總里那醇比例高至89%，OAV值高達(dá)6.54，對提高啤酒酒花香氣起到了關(guān)鍵性作用。這種由酒花添加工藝所引起的異構(gòu)化差異與Steinhaus在研究定量里那醇立體異構(gòu)體過程中得到的結(jié)果是一致的［12］。

表3 不同香花添加工藝下啤酒中萜烯醇及其立體異構(gòu)體的含量μg/LTable 3 Content of terpene alcohols(μg/L)of differernt hopping regimes in beer

從表3可以看出，與里那醇相比，啤酒中香葉醇的含量受香花添加工藝的影響較小，說明香葉醇在糖化高溫條件下依舊能夠保留在麥汁當(dāng)中，四種工藝最終保留在啤酒中的含量范圍在9.83 ～12.1 μg/L，按其閾值 6 μg/L［7］計(jì)算 OAV 值為 1.64 ～2.02，波動較小，在啤酒中的含量僅次于里那醇，對啤酒酒花香氣具有重要貢獻(xiàn)。

β-香茅醇在酒花中的含量很少，在啤酒釀造過程中大部分由其他物質(zhì)轉(zhuǎn)化而來。β-香茅醇在麥汁煮沸過程中會發(fā)生異構(gòu)化現(xiàn)象，隨著4種工藝的香花添加時(shí)間逐漸推后，啤酒中R-(+)-β-香茅醇含量明顯增多，主酵結(jié)束后添加工藝相比煮沸結(jié)束前10 min工藝增加了1.33倍。4種工藝釀造出的啤酒中β-香茅醇立體異構(gòu)體之間的比例如圖3所示，R-(+)-β-香茅醇在4種工藝中占 β-香茅醇總量的66% ～91%，含量范圍在2.91 ～6.79 μg/L，說明香花添加工藝對R-(+)-β-香茅醇異構(gòu)化影響顯著，尤其是主酵結(jié)束后添加香花工藝，使R型占總β-香茅醇比例高至91%。盡管β-香茅醇OAV值小于1，但對啤酒酒花香氣的貢獻(xiàn)體現(xiàn)在與里那醇、香葉醇的協(xié)同作用［7］，而究竟是R型還是S型更有利于啤酒酒花香氣的提高還有待于進(jìn)一步研究。

圖2 不同香花添加工藝啤酒中R-(-)-里那醇和S-(+)-里那醇的組成Fig.2 Composition of(R)-(-)and(S)-(+)-Linalool of differernt hopping regimes in beer

圖3 不同香花添加工藝啤酒中S-(-)-β-香茅醇和R-(+)-β-香茅醇的組成Fig.3 Composition of S-(-)and R-(+)-β-citronellol of differernt hopping regimes in beer

啤酒中橙花叔醇在4種香花添加工藝下的變化情況略為反常，煮沸結(jié)束前10 min工藝含量最高，高達(dá)6.81 μg/L，說明高溫更利于橙花叔醇在麥汁中的保留，而另外3種香花添加工藝含量范圍在5.34～5.86 μg/L，OAV 值均大于 0.25。

另外，OAV值較低的一些物質(zhì)如:S-(+)-里那醇、(-)-α-萜品醇、(+)-α-萜品醇、S-(-)-β-香茅醇、橙花醇、香葉酸甲酯、乙酸香葉酯、乙酸香茅酯含量范圍在0.01 ～2.8 μg/L，其OAV值小于0.15，說明這些物質(zhì)對啤酒酒花香氣的貢獻(xiàn)不顯著，4種香花添加工藝對其含量的影響也較小，可忽略不計(jì)。

綜上所述，R-(-)-里那醇、香葉醇、R-(+)-β-香茅醇、橙花叔醇含量較高且對啤酒酒花香氣具有重要貢獻(xiàn)，其中R-(-)-里那醇、R-(+)-β-香茅醇含量受香花添加工藝影響較大，因此我們將有針對性的對這4種物質(zhì)進(jìn)行釀造過程中的變化規(guī)律進(jìn)一步分析研究。

2.1.2 發(fā)酵過程中4種重要的萜烯醇在不同香花添加工藝下的變化規(guī)律

在啤酒發(fā)酵過程中，萜烯醇及其立體異構(gòu)體在酵母的作用下會發(fā)生生物化學(xué)變化，由圖4可知，4種香花添加工藝所釀造的啤酒中，R-(-)-里那醇、香葉醇、R-(+)-β-香茅醇、橙花叔醇的含量均高于其各自在冷麥汁中的含量，國外學(xué)者指出，這些增加的萜烯醇并非自發(fā)產(chǎn)生，也不是完全經(jīng)由酵母自身代謝而成，而是二者共同作用的結(jié)果，即在酵母作用下發(fā)生了相互間的轉(zhuǎn)化［16-17］。

如圖4A所示，當(dāng)采用煮沸結(jié)束前10 min添加香花工藝進(jìn)行發(fā)酵時(shí)，啤酒中R-(-)-里那醇含量不超過2 μg/L，發(fā)酵過程中也沒有明顯的變化趨勢，這是由于高溫使溶解在麥汁中的R-(-)-里那醇大量揮發(fā)，保留下來的量很少，后期通過酵母轉(zhuǎn)化含量略微有所增加。而采用煮沸結(jié)束、回旋沉淀槽工藝添加香花時(shí)，冷麥汁中的R-(-)-里那醇含量大幅增加。這兩種工藝變化趨勢基本上相同，發(fā)酵前3天內(nèi)含量不斷地積累，3天后又迅速下降，分別低至5.81 μg/L、7.23 μg/L。下降的原因是由于發(fā)生了生物化學(xué)轉(zhuǎn)化。根據(jù)全巧玲的研究結(jié)果可知，游離的里那醇很快被酵母利用而減少，轉(zhuǎn)化成α-萜品醇，還產(chǎn)生少量香葉醇［18］。第7天后再次回升，最終啤酒中的含量分別為9.99和12.24 μg/L，這可能是由于酵母對糖苷鍵的利用釋放出了部分與糖苷鍵相連的R-(-)-里那醇，使其含量有所回升［19-20］。與冷麥汁相比，這兩種工藝釀造的啤酒中，R-(-)-里那醇含量分別上升45%、35%。而采用主酵結(jié)束后添加香花工藝，情況又有所不同。添加香花之前，該工藝發(fā)酵液與煮沸結(jié)束前10 min添加香花工藝中R-(-)-里那醇的含量基本持平，而主酵結(jié)束(第7天)添加香花后，R-(-)-里那醇含量快速增加，后酵期繼續(xù)小幅增長使得最終保留在啤酒中的含量高達(dá)13.79 μg/L，是該工藝下冷麥汁中含量的10.1倍，說明避開了高溫的作用下，酒花中的R-(-)-里那醇能夠直接溶解于發(fā)酵液中，同時(shí)也說明酒花中的R-(-)-里那醇含量很高。JP

如圖4B所示，香葉醇與R-(-)-里那醇的變化趨勢較為相似。不同之處在于，采用煮沸結(jié)束和回旋沉淀槽添加香花工藝時(shí)，雖然發(fā)酵前3天香葉醇保留在發(fā)酵液中的含量明顯高于煮沸結(jié)束前10 min添加工藝，但是發(fā)酵第3天后，這3種工藝條件下的香葉醇含量都開始大幅下降，降至8.30±0.3 μg/L，根據(jù)King和Dickinson［13-16］繪制的酵母作用下萜醇轉(zhuǎn)化路徑圖可知，香葉醇可以轉(zhuǎn)化為β-香茅醇和里那醇。然而，從第7天起，發(fā)酵液主酵結(jié)束，香葉醇由于某種原因含量又開始回升，部分來自于里那醇的轉(zhuǎn)化［18］。觀察主酵結(jié)束后香花添加工藝下香葉醇在冷麥汁中的含量可知，此時(shí)保留在冷麥汁中的香葉醇完全由苦花賦予，其在高溫糖化作用下仍能大量存在，含量高達(dá)5.67 μg/L，是此工藝條件下冷麥汁中R-(-)-里那醇含量的4.12倍，說明香葉醇比R-(-)-里那醇在高溫條件能更穩(wěn)定地保留在麥汁當(dāng)中，還有一種可能是由于青島大花本身所含有的香葉醇含量很高所致。有學(xué)者們認(rèn)為，香葉醇的含量比里那醇更具有酒花品種特異性［6，21］(即不同的酒花品種，香葉醇含量相差較大)。

對比圖4C四種工藝可知，R-(+)-β-香茅醇在冷麥汁中的含量很少，均不超過1 μg/L，隨著發(fā)酵的進(jìn)行，前3天內(nèi)R-(+)-β-香茅醇含量有明顯增加，這與發(fā)酵液中香葉醇的轉(zhuǎn)化有一定關(guān)聯(lián)。發(fā)酵3天后，回旋沉淀槽和煮沸結(jié)束添加香花工藝R-(+)-β-香茅醇含量不斷下降，根據(jù)全巧玲的研究可知，它們部分轉(zhuǎn)化成為了乙酸香茅酯，以及少量香葉醇［18］。而值得關(guān)注的是主酵結(jié)束后添加香花工藝，添加香花后R-(+)-β-香茅醇在發(fā)酵液中的含量并沒有大幅度增長，而是繼續(xù)緩緩上升，證明了酒花中R-(+)-β-香茅醇含量較少，含量的增加是由于其他物質(zhì)的生物化學(xué)轉(zhuǎn)化作用，一直到發(fā)酵結(jié)束，含量達(dá)到6.79 μg/L。Takoi等研究表明，β-香茅醇含量在發(fā)酵后期的含量增加并非是簡單的香葉醇含量迅速下降直接轉(zhuǎn)化而來的結(jié)果，這其中可能還存在一些尚不明確的途徑［7］，4種香花添加工藝在主酵結(jié)束后(第七天)R-(+)-β-香茅醇含量均緩慢增加，據(jù)文獻(xiàn)記載，Lager酵母在發(fā)酵后期細(xì)胞膜的通透性增加，外切1，4-糖苷酶被分泌到細(xì)胞外，糖苷酶可以將部分結(jié)合態(tài)存在的萜烯醇水解成相應(yīng)的游離態(tài)［17，22］，從而可能促使R-(+)-β-香茅醇含量增加。

圖4 發(fā)酵過程中不同香花添加工藝下4種萜烯醇的含量變化(μg/L)Fig.4 Comparison of four terpene alcohols(μg/L)during fermentation of differernt hopping regimes in beer

如圖4D所示，橙花叔醇在4種香花添加工藝下的變化趨勢基本一致，而較為反常的是，發(fā)酵進(jìn)行到第3天時(shí)，主酵結(jié)束后添加香花工藝的橙花叔醇含量略高于其他3種已添加了香花的工藝。而主酵結(jié)束后(第7天)添加了香花，該工藝卻并沒有因?yàn)樾绿砑恿讼慊ㄊ钩然ㄊ宕嫉暮吭俣仍黾樱@可能是由于酒花本身所含有的橙花叔醇含量就很低所致。直到發(fā)酵液主酵結(jié)束，四種工藝中橙花叔醇含量基本一致，均高于 5 μg/L。

綜上所述，R-(-)-里那醇、R-(+)-β-香茅醇、香葉醇在主酵結(jié)束后添加香花工藝條件下，含量均最高，相較于煮沸結(jié)束前10 min添加香花工藝分別提高6.42、0.19、1.33倍，其次是回旋沉淀槽添加香花工藝，煮沸結(jié)束和煮沸結(jié)束前10 min添加香花工藝含量相對較低。而橙花叔醇在煮沸結(jié)束前10 min添加香花工藝中含量最高，而主酵結(jié)束后、煮沸結(jié)束、回旋沉淀槽添加香花工藝含量較低且相差不顯著。

2.2 感官品評

香花添加工藝對啤酒中的萜烯醇及其立體異構(gòu)體含量影響較大，結(jié)合感官品評方式對啤酒做出評價(jià)，并對香氣進(jìn)行描述，可確定出最佳的香花添加工藝。圖5給出了品評小組針對5種香氣(花香、柑橘香、生青味、酒花味、苦味)及協(xié)調(diào)性的綜合評分。

煮沸結(jié)束前10 min添加香花工藝感官評分?jǐn)?shù)各項(xiàng)都較低，酒花香氣不明顯，整體協(xié)調(diào)性也欠佳。另外3種工藝評分較高，且分?jǐn)?shù)較為接近。綜合得分最高的是回旋沉淀槽添加香花工藝，其中R-(-)-里那醇、香葉醇、R-(+)-β-香茅醇含量均較高，以該工藝添加香花，可能有助于其累加協(xié)同作用，使釀造出的啤酒香氣明顯，富含花香及典型柑橘香，整體協(xié)調(diào)性最佳。采用主酵結(jié)束后添加香花工藝，使萜烯醇及其立體異構(gòu)體最大程度的保留在麥汁當(dāng)中，但生青味較為明顯，這可能與R-(+)-β-香茅醇含量過高有關(guān)。本研究在測定酒花香氣閾值時(shí)，品評小組普遍反映:當(dāng) R-(+)-β-香茅醇含量在 8 μg/L 左右，會給啤酒帶來香氣的同時(shí)，加重啤酒的生青味及苦澀感，采用主酵結(jié)束后添加香花工藝時(shí)R-(+)-β-香茅醇含量達(dá)6.79 μg/L，使得整體的協(xié)調(diào)性受到了影響。因此，本研究香氣綜合評分中，4種工藝效果由高到低分別為回旋沉淀槽＞主酵結(jié)束后＞煮沸結(jié)束＞煮沸結(jié)束前10 min(試驗(yàn)前3者差異較小)。

圖5 不同香花添加工藝釀造的啤酒感官風(fēng)味輪廓Fig.5 Flavour profile of sensory evaluation of differernt hopping regimes in beer

3 結(jié)論

本文采用頂空固相微萃取-氣相色譜質(zhì)譜技術(shù)(HS-SPME/GC-MS)，跟蹤檢測了啤酒釀造過程中源自酒花的12種香氣物質(zhì)，包括(R)-(-)-里那醇、S-(+)-里那醇、(R)-(+)-β-香茅醇、(S)-(-)-β-香茅醇、(+)-α-萜品醇、(-)-α-萜品醇及香葉醇、橙花醇、橙花叔醇、乙酸香茅酯、香葉酸甲酯、乙酸香葉酯，對比研究不同的香花添加工藝，發(fā)現(xiàn)R-(-)-里那醇、香葉醇、R-(+)-β-香茅醇、橙花叔醇含量較高且對啤酒酒花香氣具有重要貢獻(xiàn)，它們在4種工藝下釀造的啤酒中含量最高分別可達(dá)14.39 μg/L、12.10 μg/L、6.79 μg/L、6.81 μg/L，OAV 值范圍在 0.29 ～6.54。前3者在主酵結(jié)束后添加香花工藝中含量最高，其次是回旋沉淀槽添加香花工藝。而高溫更利于橙花叔醇在麥汁中的保留，煮沸結(jié)束前10 min添加香花工藝中其含量最高。4種重要的萜烯醇在發(fā)酵過程中，受不同香花添加工藝影響下遵循一定的變化規(guī)律。

將檢測結(jié)果和感官評品結(jié)合對4種香花添加方式進(jìn)行對比，發(fā)現(xiàn)4種工藝效果由高到低分別為:回旋沉淀槽＞主酵結(jié)束后＞煮沸結(jié)束＞煮沸結(jié)束前10 min，回旋沉淀槽添加香花工藝綜合得分最高，使啤酒富含酒花香氣，該工藝更有利于提高國產(chǎn)啤酒酒花香氣，打造具有典型酒花香氣的優(yōu)質(zhì)啤酒。

［1］ Inui T，Tsuchiya F，Ishimaru M，et al.Different beers with different hops.Relevant compounds for their aroma characteristics［J］.Journal of Agricultural and Food Chemistry，2013，61(20):4 758-4 764.

［2］ Kishimoto T，Wanikawa A，Kono K，et al.Comparison of the odor-active compounds in unhopped beer and beers hopped with different hop varieties［J］.Journal of Agricultural and Food Chemistry，2006，54(23):8 855-8 861.

［3］ Aberl A，Coelhan M.Determination of volatile compounds in different hop varieties by headspace-trap GC/MS-in comparison with conventional hop essential oil analysis［J］.Journal of Agricultural and Food Chemistry，2012，60(11):2 785-2 792.

［4］ 陶鑫涼，閆鵬，郝俊光，等.氣相色譜-質(zhì)譜法分析啤酒中酒花香氣成分［J］.分析試驗(yàn)室，2012，31(6):009.

［5］ Kishimoto T，Wanikawa A，Kagami N，et al.Analysis of hop-derived terpenoids in beer and evaluation of their behavior using the stir bar-sorptive extraction method with GC-MS［J］.Journal of Agricultural and Food Chemistry，2005，53(12):4 701-4 707.

［6］ Takoi K，Itoga Y，Koie K，et al.The contribution of geraniol metabolism to the citrus flavour of beer:synergy of geraniol and β ‐ citronellol under coexistence with excess linalool［J］.Journal of the Institute of Brewing，2010，116(3):251-260.

［7］ Takoi K，Koie K，Itoga Y，et al.Biotransformation of hopderived monoterpene alcohols by lager yeast and their contribution to the flavor of hopped beer［J］.Journal of Agricultural and Food Chemistry，2010，58(8):5 050-5 058.

［8］ 全巧玲，江偉，王德良，等.酒花香氣成分的檢測及富含典型酒花香氣啤酒的試驗(yàn)研究［J］.啤酒科技，2013(2):28-36.

［9］ Sch?nberger C，Kostelecky T.125th anniversary review:the role of hops in brewing［J］.Journal of the Institute of Brewing，2011，117(3):259-267.

［10］ Hanke S.Linalool-a key contributor to hop aroma.MBAA Global Emerging Issues［J］.

［11］ Opstaele F，Rouck G，Clippeleer J，et al.Analytical and sensory assessment of hoppy aroma and bitterness of conventionally hopped and advanced hopped pilsner beers［J］.Journal of the Institute of Brewing，2010，116(4):445-458.

［12］ Steinhaus M，F(xiàn)ritsch H T，Schieberle P.Quantitation of(R)-and(S)-linalool in beer using solid phase microextraction(SPME)in combination with a stable isotope dilution assay(SIDA)［J］.Journal of Agricultural and Food Chemistry，2003，51(24):7 100-7 105.

［13］ King A J，Dickinson J R.Biotransformation of hop aroma terpenoids by ale and lager yeasts［J］.FEMS Yeast Research，2003，3(1):53-62.

［14］ Opstaele F，Rouck G，Clippeleer J，et al.Analytical and sensory assessment of hoppy aroma and bitterness of conventionally hopped and advanced hopped pilsner beers［J］.Journal of the Institute of Brewing，2010，116(4):445-458.

［15］ 王憬，崔巍偉，王莉娜，等.啤酒中酒花香組分分析方法的研究及其在啤酒酒花香氣質(zhì)量評定中的應(yīng)用［J］.啤酒科技，2007(12):29-34.

［16］ King A， Richard Dickinson J. Biotransformation of monoterpene alcohols by Saccharomyces cerevisiae，Torulaspora delbrueckii and Kluyveromyces lactis［J］.Yeast，2000，16(6):499-506.

［17］ Kollmannsberger H，Biendl M，Nitz S.Occurrence of glycosidically bound flavour compounds in hops，hop products and beer［J］.Monatsschr Brauwiss，2006，5(6):83-89.

［18］ 全巧玲，江偉，王德良，等.單萜醇類在啤酒發(fā)酵過程中的變化及對酒花香氣的貢獻(xiàn)［J］.食品與發(fā)酵工業(yè)，2013，39(5):170-175.

［19］ Daenen L，Saison D，De Cooman L，et al.Flavour enhancement in beer:hydrolysis of hop glycosides by yeast beta-glucosidase［J］.Cerevisia:Belgian Journal of Brewing and Biotechnology，2007，32(1):24-36.

［20］ Hammond J R M.Genetically‐ modified brewing yeasts for the 21st century.Progress to date［J］.Yeast，1995，11(16):1 613-1 627.

［21］ Peacock V E，Deinzer M L，Likens S T，et al.Floral hop aroma in beer［J］.Journal of Agricultural and Food Chemistry，1981，29(6):1 265-1 269.

［22］ 陶鑫涼，閆鵬，郝俊光，等.啤酒釀造過程中萜烯醇類化合物變化規(guī)律［J］.食品與發(fā)酵工業(yè)，2012，38(3):1-6.