高岐

（廣東省韶關(guān)學(xué)院化學(xué)與環(huán)境工程學(xué)院，廣東韶關(guān)512005）

金線蓮大多分布在我國東南沿海地區(qū)，具有保肝、降血糖、降血壓等功效，在民間素有“藥王”、“神草”、烏人參”等美稱。金線蓮富含有生物堿、多糖、黃酮類化合物等多種成分，常用的提取方法有加熱回流提取法、水煎煮法、超臨界CO2法等。本文利用微波加熱技術(shù)，對金線蓮中總生物堿進行了微波提取，討論了料液比、微波提取時間、微波提取功率等因素對提取結(jié)果的影響，確定了最佳的提取條件。與常規(guī)的回流提取法對照，測定速度提高了數(shù)十倍，并大大簡化了操作步驟，提高了分析效率，結(jié)果令人滿意。

1 主要儀器與試劑

1.1 主要儀器

美的牌KJ23C-AN2型微波爐：廣東美的微波爐制造有限公司；722S型可見分光光度計：上海棱光技術(shù)有限公司；電熱恒溫水浴鍋（HH-SZ1—6）：北京長安科學(xué)儀器廠。

1.2 主要試劑

鹽酸麻黃堿對照品（購于中國藥品生物制品檢定所，批號：171242-200405）；氯仿；檸檬酸；檸檬酸鈉；溴百里香酚藍。以上試劑均為分析純，實驗用水為二次蒸餾水。

pH5.4檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液：稱取檸檬酸20.01 g，水配制并定容 1000 mL，檸檬酸三鈉29.41 g，水配制并定容 1000 mL，以1∶2體積混合。

0.1%溴百里香酚藍：稱取溴百里香酚藍0.1 g，用乙醇定容100 mL。

金線蓮樣品：（購于韶關(guān)藥業(yè)集團公司同康連鎖藥店）將金線蓮用蒸餾水洗凈后，在110℃下干燥2 h后，將其研磨成粉，過60目篩，置于干燥器中保存?zhèn)溆谩?/p>

2 實驗方法

2.1 標準曲線的繪制

精密稱取鹽酸麻黃堿對照品0.0200g，置于100mL容量瓶中，加水定容至刻度，得含鹽酸麻黃堿濃度為200 μg/mL對照品溶液，精密量取鹽酸麻黃堿對照品標準溶液 1.00、2.00、3.00、4.00、5.00 mL 分別置于干燥的分液漏斗中，分別加水至5.00 mL，再加入5.00 mL pH5.4檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液，1.00 mL 0.1%溴百里香酚藍溶液，氯仿10.00 mL，振搖混勻。精確量取萃取液2.00 mL于10 mL容量瓶中，用氯仿定容至刻度、搖勻。于722S分光光度計413 nm處測定其吸光度，同時做空白，以取樣量為橫坐標，吸光度為縱坐標，繪出標準曲線（見圖）。

圖1 標準曲線Fig.1 Standard curve

2.2 回流法測定

精確稱取金線蓮樣品5.0 g左右，加入蒸餾水100 mL，于85℃回流提取2 h后，過濾。濾液定容于100 mL容量瓶中，精確移取濾液10.00 mL，置于干燥的分液漏斗中，其它操作同2.1，由標準曲線計算樣品中生物堿含量。

2.3 微波法測定

準確稱取一定量的金線蓮樣品，置于聚四氟乙烯消解罐中，加入一定量蒸餾水、密封，放入微波爐中，根據(jù)設(shè)置的功率和時間，提取一定時間后，取出，冷卻至室溫，開罐，過濾，其它操作同2.2，由標準曲線計算樣品中生物堿含量。

3 結(jié)果與討論

3.1 正交試驗

以料液比、微波功率、微波時間為影響因素，提取量為指標，進行L9（33）正交試驗，討論了因素對提取結(jié)果的影響。其因素—水平及正交試驗結(jié)果見表1及表2。

表1 正交試驗方案Table 1 Orthogonal experimentaldesign

表2 正交試驗結(jié)果Table 2 Orthogonal experiment results

由表2極差分析可知，各因素影響提取量的程度大小順序為A＞B＞C，即最大影響因素是料液比，依次是提取功率，提取時間。同時，根據(jù)正交試驗結(jié)果分析可知最佳提取條件為 A1、B3、C2，即料液比 1 ∶15，提取功率616 W，提取時間6 min。

3.2 回流提取與微波提取結(jié)果的比較

在最佳條件下，做微波提取實驗，并與回流提取結(jié)果對照，見表3。

從表3可以看出，微波提取法有明顯的優(yōu)點，其提取時間大大縮短，約為回流法的1/20，結(jié)果令人滿意。

表3 微波提取與回流提取結(jié)果的比較（n=11，置信度為0.95）Table 3 Comparison of microwave extraction and reflux extraction results（n=11，the confidence level is 0.95）

4 結(jié)論

微波提取不僅速度快，提取時間短、操作簡便，減少樣品和溶劑的消耗量，節(jié)約了人力、物力，同時還減少對環(huán)境的污染和環(huán)境的干擾，與常規(guī)的加熱回流法相比，更適應(yīng)現(xiàn)代科技發(fā)展對化學(xué)工藝的要求。由于微波加熱是里外同時進行，提取溫度低，樣品受熱均勻，不會糊化，有效成分不受分解，從而提高產(chǎn)品的產(chǎn)量和質(zhì)量。該法不失為是一種快速、高效、節(jié)能的新型提取工藝，有著比常規(guī)方法更好的優(yōu)勢和應(yīng)用前景。

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[3] 于超,張明,王宇,等．紫外分光光度法測定不同產(chǎn)地半夏中總生物堿的含量．時珍國醫(yī)國藥,2002,13(2)：73-75