譚曉彬等

[摘要] 目的 探討夜來香多糖對小鼠鎮(zhèn)靜催眠作用的影響。 方法 將小鼠隨機分為生理鹽水組（戊巴比妥鈉組）、1.0 mg/kg夜來香多糖組、2.0 mg/kg夜來香多糖組、4.0 mg/kg夜來香多糖組。觀察夜來香多糖對小鼠自發(fā)活動的影響、對閾上劑量戊巴比妥鈉小鼠睡眠時間的影響、對閾下劑量戊巴比妥鈉小鼠睡眠時間的影響。 結果 與生理鹽水組比較，2.0、4.0 mg/kg的夜來香多糖能顯著抑制小鼠自發(fā)活動（P<0.05，P<0.01）；與戊巴比妥鈉組比較，2.0、4.0 mg/kg的夜來香多糖能顯著加速閾上劑量戊巴比妥鈉的入睡時間和延長戊巴比妥鈉的睡眠時間（P<0.05，P<0.01）；與戊巴比妥鈉組比較，1.0、2.0、4.0 mg/kg的夜來香多糖能顯著加速閾下劑量戊巴比妥鈉的入睡時間和延長戊巴比妥鈉的睡眠時間（P<0.05，P<0.01，P<0.01）。 結論 夜來香多糖具有明顯的鎮(zhèn)靜催眠作用。

[關鍵詞] 夜來香；多糖；鎮(zhèn)靜；催眠

[中圖分類號] R961.1 [文獻標識碼] A [文章編號] 1674-4721（2014）11（c）-0112-03

[Abstract] Objective To explore the sedative-hypnotic effect of Cestrum nocturum L. polysaccharide on mice model. Methods The mice were randomly divided into four groups including physiological saline（sodium pentobarbital） control group，1.0，2.0 and 4.0 mg/kg Cestrum nocturum L. polysaccharide groups.The influence of Cestrum nocturum L. polysaccharide on mice，the influence of sleeping time in mice on the above threshold dose of pentobarbital sodium，the influence of sleeping time in mice of subthreshold dose of pentobarbital sodium was observed respectively. Results Compared with the physiological saline group，2.0，4.0 mg/kg of Cestrum nocturum L. polysaccharide could significantly inhibit the spontaneous activity of mice （P<0.05，P<0.01）.Compared with the sodium pentobarbital group，2.0 mg/kg，4.0 mg/kg of Cestrum nocturum L. polysaccharide could significantly accelerate sleeping time on the above threshold dose of pentobarbital sodium and prolong sodium sleep time（P<0.05，P<0.01）.Compared with the sodium pentobarbital group，1.0，2.0，4.0 mg/kg of Cestrum nocturum L. polysaccharide could significantly accelerate the sleep time of subthreshold dose of pentobarbital sodium and prolong the sleep time （P<0.05，P<0.01，P<0.01）. Conclusion Cestrum nocturum L. polysaccharide has obviously sedative-hypnotic effect.

[Key words] Cestrum nocturum L.；Polysaccharide；Sedation；Hypnosis

睡眠是日常生活中最熟悉的活動之一，人的一生大約有1/3的時間是在睡眠中度過的，當處于睡眠狀態(tài)時，大腦和身體可以得到休息、休整和恢復，有助于日常的工作和學習?？茖W提高睡眠質量，是正常工作、學習和生活的保障。夜來香（Cestrum nocturum L.）屬夜來香樹屬植物（夜來香、洋丁香）[1-3]，民間用于驅蚊，國內外有關夜來香藥理作用研究的報道較少。本課題組前期研究顯示，夜來香水提取液有抗實驗性心律失常[4]、局部麻醉[5]和中樞抑制作用[6]，其正丁醇提取物具有鎮(zhèn)痛、中樞抑制、影響離體豚鼠心房肌等作用[7-11]。本文旨在研究夜來香多糖的鎮(zhèn)靜催眠作用。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1夜來香來源 采自江西贛州，由沈陽藥科大學植化教研室邱峰博士鑒定為夜來香屬夜來香樹屬植物。

1.1.2 夜來香多糖的制備 取干燥夜來香根莖粉碎后，加10倍的雙蒸水浸泡24 h后，回流提取3次，30 min/次，過濾，濾液濃縮，加70%乙醇沉淀24 h，抽濾得夜來香粗多糖，夜來香粗多糖依次用30%、50%、80%乙醇分部沉淀得夜來香多糖，得率為1.50%。用蒽酮比色法測多糖含量為67.5%。

1.1.3 實驗材料 實驗前用生理鹽水稀釋至所需濃度；昆明種雄性小鼠（由湖南科學院提供），體重18～22 g；儀器：LMS-2A型二道生理記錄儀，JZ100型肌肉張力換能器，吊籠（寬10 cm，高7.5 cm，質量100 g）；戊巴比妥鈉（福建閩東力捷迅藥業(yè)，批號：131101）

1.2 方法[10-11]

1.2.1 夜來香多糖對小鼠自發(fā)活動的影響（抖籠換能器法） ①給藥前小鼠自發(fā)活動的影響：給藥前將小鼠放入吊籠中，讓其適應3 min后通過拉力換能器，小鼠的自發(fā)活動記錄在LMS-2A型二道生理記錄儀上。觀察指標為小鼠輕度活動（小鼠輕度活動的波形為5 mm內），如舐毛、瘙癢；小鼠中度活動（小鼠中度活動的波形為5～10 mm內），如走動、立起、爬上、爬下；小鼠強度活動（小鼠強度活動的波形在10 mm以上）如跑動、上串下跳等。描記小鼠15 s波形的個數。②給藥后小鼠自發(fā)活動的影響：雄性小鼠40只，隨機分為生理鹽水組、1.0 mg/kg夜來香多糖組、2.0 mg/kg夜來香多糖組、4.0 mg/kg夜來香多糖組。小鼠分別腹腔注射等量生理鹽水和夜來香多糖1.0、2.0、4.0 mg/kg，給藥后25 min后分別放回吊籠中，穩(wěn)定3 min后開始記錄15 s內小鼠自發(fā)活動的影響。

1.2.2 夜來香多糖干預閾上劑量戊巴比妥鈉對睡眠時間的影響 分組同上，對照組腹腔注射等量生理鹽水，給藥組分別腹腔注射1.0、2.0、4.0 mg/kg的夜來香多糖，25 min后4組均腹腔注射閾上劑量的戊巴比妥鈉（2.5 g/L）0.02 ml/g，觀察小鼠翻正反射消失的時間，以及從翻正反射消失至恢復的時間。

1.2.3 夜來香多糖干預閾下劑量戊巴比妥鈉對睡眠時間的影響 分組同上，對照組腹腔注射等量生理鹽水，給藥組分別腹腔注射夜來香多糖1.0、2.0、4.0 mg/kg， 25 min后4組均腹腔注射閾下劑量的戊巴比妥鈉（2.5 g/L）0.01 ml/g，觀察小鼠翻正反射消失的時間，以及從翻正反射消失至恢復的時間。

1.3 統(tǒng)計學處理

采用SPSS 14.0統(tǒng)計學軟件對數據進行分析，計量資料用x±s表示，采用t檢驗，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 夜來香多糖對小鼠自發(fā)活動的影響

與生理鹽水組比較，2.0、4.0 mg/kg的夜來香多糖能使小鼠自發(fā)活動的中波、大波出現次數顯著減少，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05，P<0.01）（表1）。

3 討論

人的一生中大約有1/3的時間在睡眠中度過。當人們處于睡眠狀態(tài)時，大腦和身體可以得到休息、休整和恢復。入睡的指標是翻正反射消失。實驗結果顯示，2.0、4.0 mg/kg的夜來香多糖均能顯著加快閾上劑量戊巴比妥鈉小鼠的入睡時間，同時還能顯著延長閾上劑量戊巴比妥鈉小鼠的睡眠時間（P<0.05，P<0.01），可增強閾下劑量戊巴比妥鈉的催眠時間和增加小鼠入睡動物數（P<0.05，P<0.01，P<0.01），提示夜來香多糖具有鎮(zhèn)靜催眠作用。本研究結果顯示，2.0、4.0 mg/kg的夜來香多糖還能使小鼠自發(fā)活動總次數明顯減少（明顯減少大波和中波出現的次數）（P<0.05，P<0.01），提示夜來香多糖能明顯抑制小鼠自發(fā)活動。研究結果還顯示，夜來香多糖對小鼠睡眠的影響與戊巴比妥鈉有協同作用，劑量越大，作用越明顯，提示夜來香多糖有明顯的中樞抑制作用，同時與戊巴比妥鈉有協同作用，其中樞抑制作用機制有待進一步研究。

[參考文獻]

[1] 陳志行，王仁萍，鄔俊華，等.夜香花揮發(fā)油化學成分研究[J].中草藥，2001，32（6）：498-499.

[2] Mimaki Y，Watanabe K，Ando Y，et al.Flavonol glycosides and steroidal saponins from the leaves of Cestrum nocturnum and their cytotoxicity[J].J Nat Prod，2001，64（1）：17-22.

[3] Mimaki Y，Watanabe K， Sakagami H，et al.Steroidal glycosides from the leaves of Cestrum nocturnum[J].J Nat Prod，2002，65（12）：1683-1688.

[4] 鄒全林，黃真，葉和楊，等.夜來香正丁醇提取物抗心律失常的研究[J].贛南醫(yī)學院學報，2009，29（6）：857-858.

[5] 曾靖，黃賢華，賴飛，等.夜來香水提取液局部麻醉作用[J].贛南醫(yī)學院學報，2003，23（1）：1-3.

[6] 曾靖，李坊貞，葉和楊，等.夜來香正丁醇提取物的中樞抑制作用[J].贛南醫(yī)學院學報，2003，23（3）：237-239.

[7] 曾靖，黃志華，李良東，等.夜來香正丁醇提取物鎮(zhèn)痛作用的研究[J].贛南醫(yī)學院學報，2003，23（5）：475-477.

[8] 葉和楊，陳水親，邱峰，等.夜來香正丁醇提取物對離體豚鼠心房肌電生理特性的影響[J].中成藥，2007，29（4）：575-578.

[9] 葉和楊，黃志華，邱峰，等.夜來香正丁醇提取物對離體豚鼠右心房收縮特性的影響[J].中國臨床康復，2006， 10（15）：99-101.

[10] 鐘星明，蔣紹祖，黃玉珊，等.白花敗醬草提取物對小鼠睡眠功能和自發(fā)活動的影響[J].中國臨床康復，2004，8（30）：6688-6689.

[11] 嚴金玲，鐘有添，曾靖，等.淫羊藿水提取物對小鼠睡眠功能和自發(fā)活動的影響[J].中國臨床康復，2004，8（33）：7460-7461.

（收稿日期：2014-07-23 本文編輯：祁海文）

1.2 方法[10-11]

1.2.1 夜來香多糖對小鼠自發(fā)活動的影響（抖籠換能器法） ①給藥前小鼠自發(fā)活動的影響：給藥前將小鼠放入吊籠中，讓其適應3 min后通過拉力換能器，小鼠的自發(fā)活動記錄在LMS-2A型二道生理記錄儀上。觀察指標為小鼠輕度活動（小鼠輕度活動的波形為5 mm內），如舐毛、瘙癢；小鼠中度活動（小鼠中度活動的波形為5～10 mm內），如走動、立起、爬上、爬下；小鼠強度活動（小鼠強度活動的波形在10 mm以上）如跑動、上串下跳等。描記小鼠15 s波形的個數。②給藥后小鼠自發(fā)活動的影響：雄性小鼠40只，隨機分為生理鹽水組、1.0 mg/kg夜來香多糖組、2.0 mg/kg夜來香多糖組、4.0 mg/kg夜來香多糖組。小鼠分別腹腔注射等量生理鹽水和夜來香多糖1.0、2.0、4.0 mg/kg，給藥后25 min后分別放回吊籠中，穩(wěn)定3 min后開始記錄15 s內小鼠自發(fā)活動的影響。

1.2.2 夜來香多糖干預閾上劑量戊巴比妥鈉對睡眠時間的影響 分組同上，對照組腹腔注射等量生理鹽水，給藥組分別腹腔注射1.0、2.0、4.0 mg/kg的夜來香多糖，25 min后4組均腹腔注射閾上劑量的戊巴比妥鈉（2.5 g/L）0.02 ml/g，觀察小鼠翻正反射消失的時間，以及從翻正反射消失至恢復的時間。

1.2.3 夜來香多糖干預閾下劑量戊巴比妥鈉對睡眠時間的影響 分組同上，對照組腹腔注射等量生理鹽水，給藥組分別腹腔注射夜來香多糖1.0、2.0、4.0 mg/kg， 25 min后4組均腹腔注射閾下劑量的戊巴比妥鈉（2.5 g/L）0.01 ml/g，觀察小鼠翻正反射消失的時間，以及從翻正反射消失至恢復的時間。

1.3 統(tǒng)計學處理

采用SPSS 14.0統(tǒng)計學軟件對數據進行分析，計量資料用x±s表示，采用t檢驗，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 夜來香多糖對小鼠自發(fā)活動的影響

與生理鹽水組比較，2.0、4.0 mg/kg的夜來香多糖能使小鼠自發(fā)活動的中波、大波出現次數顯著減少，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05，P<0.01）（表1）。

3 討論

人的一生中大約有1/3的時間在睡眠中度過。當人們處于睡眠狀態(tài)時，大腦和身體可以得到休息、休整和恢復。入睡的指標是翻正反射消失。實驗結果顯示，2.0、4.0 mg/kg的夜來香多糖均能顯著加快閾上劑量戊巴比妥鈉小鼠的入睡時間，同時還能顯著延長閾上劑量戊巴比妥鈉小鼠的睡眠時間（P<0.05，P<0.01），可增強閾下劑量戊巴比妥鈉的催眠時間和增加小鼠入睡動物數（P<0.05，P<0.01，P<0.01），提示夜來香多糖具有鎮(zhèn)靜催眠作用。本研究結果顯示，2.0、4.0 mg/kg的夜來香多糖還能使小鼠自發(fā)活動總次數明顯減少（明顯減少大波和中波出現的次數）（P<0.05，P<0.01），提示夜來香多糖能明顯抑制小鼠自發(fā)活動。研究結果還顯示，夜來香多糖對小鼠睡眠的影響與戊巴比妥鈉有協同作用，劑量越大，作用越明顯，提示夜來香多糖有明顯的中樞抑制作用，同時與戊巴比妥鈉有協同作用，其中樞抑制作用機制有待進一步研究。

[參考文獻]

[1] 陳志行，王仁萍，鄔俊華，等.夜香花揮發(fā)油化學成分研究[J].中草藥，2001，32（6）：498-499.

[2] Mimaki Y，Watanabe K，Ando Y，et al.Flavonol glycosides and steroidal saponins from the leaves of Cestrum nocturnum and their cytotoxicity[J].J Nat Prod，2001，64（1）：17-22.

[3] Mimaki Y，Watanabe K， Sakagami H，et al.Steroidal glycosides from the leaves of Cestrum nocturnum[J].J Nat Prod，2002，65（12）：1683-1688.

[4] 鄒全林，黃真，葉和楊，等.夜來香正丁醇提取物抗心律失常的研究[J].贛南醫(yī)學院學報，2009，29（6）：857-858.

[5] 曾靖，黃賢華，賴飛，等.夜來香水提取液局部麻醉作用[J].贛南醫(yī)學院學報，2003，23（1）：1-3.

[6] 曾靖，李坊貞，葉和楊，等.夜來香正丁醇提取物的中樞抑制作用[J].贛南醫(yī)學院學報，2003，23（3）：237-239.

[7] 曾靖，黃志華，李良東，等.夜來香正丁醇提取物鎮(zhèn)痛作用的研究[J].贛南醫(yī)學院學報，2003，23（5）：475-477.

[8] 葉和楊，陳水親，邱峰，等.夜來香正丁醇提取物對離體豚鼠心房肌電生理特性的影響[J].中成藥，2007，29（4）：575-578.

[9] 葉和楊，黃志華，邱峰，等.夜來香正丁醇提取物對離體豚鼠右心房收縮特性的影響[J].中國臨床康復，2006， 10（15）：99-101.

[10] 鐘星明，蔣紹祖，黃玉珊，等.白花敗醬草提取物對小鼠睡眠功能和自發(fā)活動的影響[J].中國臨床康復，2004，8（30）：6688-6689.

[11] 嚴金玲，鐘有添，曾靖，等.淫羊藿水提取物對小鼠睡眠功能和自發(fā)活動的影響[J].中國臨床康復，2004，8（33）：7460-7461.

（收稿日期：2014-07-23 本文編輯：祁海文）

1.2 方法[10-11]

1.2.1 夜來香多糖對小鼠自發(fā)活動的影響（抖籠換能器法） ①給藥前小鼠自發(fā)活動的影響：給藥前將小鼠放入吊籠中，讓其適應3 min后通過拉力換能器，小鼠的自發(fā)活動記錄在LMS-2A型二道生理記錄儀上。觀察指標為小鼠輕度活動（小鼠輕度活動的波形為5 mm內），如舐毛、瘙癢；小鼠中度活動（小鼠中度活動的波形為5～10 mm內），如走動、立起、爬上、爬下；小鼠強度活動（小鼠強度活動的波形在10 mm以上）如跑動、上串下跳等。描記小鼠15 s波形的個數。②給藥后小鼠自發(fā)活動的影響：雄性小鼠40只，隨機分為生理鹽水組、1.0 mg/kg夜來香多糖組、2.0 mg/kg夜來香多糖組、4.0 mg/kg夜來香多糖組。小鼠分別腹腔注射等量生理鹽水和夜來香多糖1.0、2.0、4.0 mg/kg，給藥后25 min后分別放回吊籠中，穩(wěn)定3 min后開始記錄15 s內小鼠自發(fā)活動的影響。

1.2.2 夜來香多糖干預閾上劑量戊巴比妥鈉對睡眠時間的影響 分組同上，對照組腹腔注射等量生理鹽水，給藥組分別腹腔注射1.0、2.0、4.0 mg/kg的夜來香多糖，25 min后4組均腹腔注射閾上劑量的戊巴比妥鈉（2.5 g/L）0.02 ml/g，觀察小鼠翻正反射消失的時間，以及從翻正反射消失至恢復的時間。

1.2.3 夜來香多糖干預閾下劑量戊巴比妥鈉對睡眠時間的影響 分組同上，對照組腹腔注射等量生理鹽水，給藥組分別腹腔注射夜來香多糖1.0、2.0、4.0 mg/kg， 25 min后4組均腹腔注射閾下劑量的戊巴比妥鈉（2.5 g/L）0.01 ml/g，觀察小鼠翻正反射消失的時間，以及從翻正反射消失至恢復的時間。

1.3 統(tǒng)計學處理

采用SPSS 14.0統(tǒng)計學軟件對數據進行分析，計量資料用x±s表示，采用t檢驗，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 夜來香多糖對小鼠自發(fā)活動的影響

與生理鹽水組比較，2.0、4.0 mg/kg的夜來香多糖能使小鼠自發(fā)活動的中波、大波出現次數顯著減少，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05，P<0.01）（表1）。

3 討論

人的一生中大約有1/3的時間在睡眠中度過。當人們處于睡眠狀態(tài)時，大腦和身體可以得到休息、休整和恢復。入睡的指標是翻正反射消失。實驗結果顯示，2.0、4.0 mg/kg的夜來香多糖均能顯著加快閾上劑量戊巴比妥鈉小鼠的入睡時間，同時還能顯著延長閾上劑量戊巴比妥鈉小鼠的睡眠時間（P<0.05，P<0.01），可增強閾下劑量戊巴比妥鈉的催眠時間和增加小鼠入睡動物數（P<0.05，P<0.01，P<0.01），提示夜來香多糖具有鎮(zhèn)靜催眠作用。本研究結果顯示，2.0、4.0 mg/kg的夜來香多糖還能使小鼠自發(fā)活動總次數明顯減少（明顯減少大波和中波出現的次數）（P<0.05，P<0.01），提示夜來香多糖能明顯抑制小鼠自發(fā)活動。研究結果還顯示，夜來香多糖對小鼠睡眠的影響與戊巴比妥鈉有協同作用，劑量越大，作用越明顯，提示夜來香多糖有明顯的中樞抑制作用，同時與戊巴比妥鈉有協同作用，其中樞抑制作用機制有待進一步研究。

[參考文獻]

[1] 陳志行，王仁萍，鄔俊華，等.夜香花揮發(fā)油化學成分研究[J].中草藥，2001，32（6）：498-499.

[2] Mimaki Y，Watanabe K，Ando Y，et al.Flavonol glycosides and steroidal saponins from the leaves of Cestrum nocturnum and their cytotoxicity[J].J Nat Prod，2001，64（1）：17-22.

[3] Mimaki Y，Watanabe K， Sakagami H，et al.Steroidal glycosides from the leaves of Cestrum nocturnum[J].J Nat Prod，2002，65（12）：1683-1688.

[4] 鄒全林，黃真，葉和楊，等.夜來香正丁醇提取物抗心律失常的研究[J].贛南醫(yī)學院學報，2009，29（6）：857-858.

[5] 曾靖，黃賢華，賴飛，等.夜來香水提取液局部麻醉作用[J].贛南醫(yī)學院學報，2003，23（1）：1-3.

[6] 曾靖，李坊貞，葉和楊，等.夜來香正丁醇提取物的中樞抑制作用[J].贛南醫(yī)學院學報，2003，23（3）：237-239.

[7] 曾靖，黃志華，李良東，等.夜來香正丁醇提取物鎮(zhèn)痛作用的研究[J].贛南醫(yī)學院學報，2003，23（5）：475-477.

[8] 葉和楊，陳水親，邱峰，等.夜來香正丁醇提取物對離體豚鼠心房肌電生理特性的影響[J].中成藥，2007，29（4）：575-578.

[9] 葉和楊，黃志華，邱峰，等.夜來香正丁醇提取物對離體豚鼠右心房收縮特性的影響[J].中國臨床康復，2006， 10（15）：99-101.

[10] 鐘星明，蔣紹祖，黃玉珊，等.白花敗醬草提取物對小鼠睡眠功能和自發(fā)活動的影響[J].中國臨床康復，2004，8（30）：6688-6689.

[11] 嚴金玲，鐘有添，曾靖，等.淫羊藿水提取物對小鼠睡眠功能和自發(fā)活動的影響[J].中國臨床康復，2004，8（33）：7460-7461.

（收稿日期：2014-07-23 本文編輯：祁海文）