王宗平(重慶市萬(wàn)州食品藥品檢驗(yàn)所 404000)

植物油主要是從植物種子、果肉以及其它部分提取所得的脂肪酯[1]，由脂肪酸和甘油化合而成的一種天然高分子化合物。食用植物油常見(jiàn)的種類有花生油、菜籽油、大豆油、棉籽油、以及香油等。目前，一些不法商家將地溝油按照一定的比例添加入新鮮的食用植物油，從而獲取暴利，使消費(fèi)者的健康受到嚴(yán)重的威脅。食用油脂是人們?nèi)粘Ｉ钪械闹匾匦杵?。市?chǎng)上食用植物油摻假主要有兩種類型：第一種類型是將非食用油、甚至有毒植物油摻入食用植物油[2]。第二種類型是食用植物油摻入低附加值食用油。其中，前者是食用植物油摻假的主要方式。

一、材料與方法

1.實(shí)驗(yàn)材料

本次實(shí)驗(yàn)的材料主要有動(dòng)物組織：豬、羊、馬、雞、鴨、鵝、魚(yú)和狗。植物種子主要包括常見(jiàn)的油料作物玉米、花生、大豆。油菜籽以及葵花籽等。制備樣品有地溝油、豬油、花生油以及大豆油等。

2.實(shí)驗(yàn)試劑

適量的無(wú)水乙醇、石油醚、氫氧化鉀、無(wú)水硫酸鈉、膽固醇標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。

3.實(shí)驗(yàn)儀器

（1）氣相色譜儀儀器條件

氣相色譜儀是由美國(guó)的PerkinElmer公司生產(chǎn)[3]。色譜柱的規(guī)格為H P-5毛細(xì)血管：30mX0.32umX0.25um。柱溫的起始溫度為150攝氏度，柱箱的起始溫度為160攝氏度，分別保持1分鐘。然后，程序開(kāi)始逐漸地升溫，直至290攝氏度。同時(shí)，進(jìn)樣口的溫度應(yīng)該為290攝氏度。以氮?dú)鉃檩d氣，試驗(yàn)人員要保證總流速度為60ml/min，尾吹氣的流速為20ml/min，氫氣的流速為3060ml/min，空氣的流速為39060ml/min。進(jìn)樣量為3ul。

（2）氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀儀器條件

氣相色譜條件：本次實(shí)驗(yàn)選擇的是D B-4M S色譜柱：30mX0.25umX0.25um毛細(xì)管柱。進(jìn)樣口的溫度為290攝氏度，進(jìn)樣的體積為3.0ul，流速為3.0ml/min，載氣為N2。經(jīng)過(guò)程序不斷升溫之后，150攝氏度恒定一分鐘。

4.實(shí)驗(yàn)方法

首先，實(shí)驗(yàn)人員分別將膽固醇標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)存液用適量比例的乙醇溶液進(jìn)行稀釋，然后上機(jī)進(jìn)行測(cè)定，并繪制成標(biāo)準(zhǔn)的工作曲線（如下圖1所示）。

注：本次實(shí)驗(yàn)中膽固醇的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)存液選定量為1.0000mg/ml，稀釋后的濃度系列分別為 0.0200mg/ml、0.0400mg/ml、0.0800mg/ml、0.1000mg/ml、0.1600mg/ml，線性方程為 R2=0.9997，Y=1810.8X-0.2252。

圖1：膽固醇標(biāo)準(zhǔn)工作曲線

其次，實(shí)驗(yàn)人員抽取0.5油樣放置于100毫升的容量瓶中，然后用比例為4:3乙醇溶液進(jìn)行稀釋溶解，振搖1分鐘左右，然后再次加入1.0ml的水，靜置20分鐘使之明顯分層抽取上層液注入色譜儀中，并保留時(shí)間的定性。根據(jù)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)《食品衛(wèi)生檢驗(yàn)方法理化部分總則》，色譜儀的最低響應(yīng)值為3，得出檢出限=S/B（其中，S表示的是最低響應(yīng)值，B表示的是標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程中的斜率）。由此可知，氣相色譜儀法檢測(cè)膽固醇加標(biāo)的回收率結(jié)果（如下表1所示）

表1：氣相色譜儀法檢測(cè)膽固醇加標(biāo)的回收率結(jié)果

最后，實(shí)驗(yàn)人員對(duì)氣相色譜法測(cè)定膽固醇的方法進(jìn)行分析。從上表1可知，加標(biāo)回收率最低為86.4%，最高為94.9%，表明該檢測(cè)方法具有良好的準(zhǔn)確性。膽固醇的濃度最小為0.002mg/ml，最大為0.5mg/ml，正好與色譜峰面積呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系

二、結(jié)果

樣品油中膽固醇含量測(cè)定數(shù)據(jù)以及實(shí)驗(yàn)觀察結(jié)果如下表2所示，其中地溝油中膽固醇的含量為100.6，且明顯高于菜籽油、玉米油以及大豆油。

表2：樣品油中膽固醇含量測(cè)定數(shù)據(jù)以及實(shí)驗(yàn)觀察結(jié)果

結(jié)論

從以上研究結(jié)果表明，相對(duì)于地溝油，各種類型的食用植物油中膽固醇的含量極少。同時(shí)，由于不同的油樣會(huì)直接地影響摻偽檢驗(yàn)定量與定性的準(zhǔn)確性，因此需要對(duì)不同的油種中的膽固醇含量與資料中的相應(yīng)膽固醇的含量進(jìn)行仔細(xì)地對(duì)比，經(jīng)過(guò)配對(duì)檢驗(yàn)，差異不具有顯著性。

由此可知，筆者認(rèn)為氣相色譜法是一種能夠?qū)⒑袆?dòng)物油脂的食用植物油與正常的食用植物油有效區(qū)分的檢測(cè)方法。其中，動(dòng)物油脂中常常含有大量的膽固醇，并且一些餐飲廢棄物中提取的地溝油也因?yàn)楹恳欢ǖ膭?dòng)物油脂，因而也具有一定量的膽固醇。相反，正常食用植物油中所含有的膽固醇極少。

綜上所述，氣相色譜法是鑒別食用植物油是否摻入動(dòng)物油脂的有效途徑。

[1]陳初良,張惠琴,甘云娟.高肅君食用植物油摻入動(dòng)物油脂鑒別方法的研究.糧油食品科技.2009(05).

[2]趙琳娜,王丹,胡鳳月,吳鵬,韓月貝,楊紅蓮.食用植物油中動(dòng)物源性成分PCR檢測(cè)方法的建立.現(xiàn)代食品科技.2012(15).

[3]王立平,劉曉莉,曹悅,張帆.PCR法檢測(cè)食用植物油中動(dòng)物源性成分.食品工業(yè).2013(03).