亚洲免费av电影一区二区三区,日韩爱爱视频,51精品视频一区二区三区,91视频爱爱,日韩欧美在线播放视频,中文字幕少妇AV,亚洲电影中文字幕,久久久久亚洲av成人网址,久久综合视频网站,国产在线不卡免费播放

        ?

        CRIPTO-1在宮頸鱗癌組織中的表達及臨床意義

        2014-12-09 07:53:14王培智李曉娟
        腫瘤基礎(chǔ)與臨床 2014年1期
        關(guān)鍵詞:內(nèi)瘤鱗癌探針

        王培智,李曉娟

        (1.河南中醫(yī)學(xué)院科技處,河南 鄭州450008;2.河南中醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院,河南 鄭州450008)

        人CRIPTO-1 基因最初在人畸胎癌cDNA 的文庫中鑒定出來,因此也被稱為畸胎癌來源的生長因子-1,定位于染色體3p21.3[1]。已有研究[2]表明,CRIPTO-1 在多種腫瘤組織中呈現(xiàn)高表達。作者采用免疫組化和原位雜交(in situ hybridization,ISH)方法檢測CRIPTO-1 在宮頸鱗癌組織中的表達情況,并分析其表達與宮頸鱗癌臨床病理特征之間的關(guān)系。

        1 材料與方法

        1.1 一般資料 90 例宮頸鱗癌、30 例宮頸上皮內(nèi)瘤變、30 例正常宮頸黏膜組織均來自于2008年5月至2013年8月鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院及第二附屬醫(yī)院病理科存檔蠟塊?;颊咝g(shù)前均未服用任何抗腫瘤藥物,均未接受放、化療。90 例宮頸鱗癌患者年齡為28~77 歲,平均(55.8 ±15.3)歲,其中<50 歲38 例,≥50 歲52 例。依據(jù)WHO(1985)腫瘤細(xì)胞分化程度標(biāo)準(zhǔn),其中高分化22 例,中分化43 例,低分化25 例。依據(jù)國際婦產(chǎn)科聯(lián)盟(2000)修訂的TNM 分期標(biāo)準(zhǔn),其中I~Ⅱ期58 例,Ⅲ~Ⅳ期32 例。依據(jù)淋巴結(jié)情況,其中有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移31 例,無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移59 例。經(jīng)40 g·L-1多聚甲醛溶液固定,常規(guī)脫水,石蠟包埋,連續(xù)切片,切片厚度4 ~6 μm,用于HE、免疫組化及ISH 染色。

        1.2 主要試劑及探針合成 CRIPTO-1 單克隆抗體購自美國Santa Cruz 公司,S-P 免疫組化試劑盒、DAB 顯色劑均購自北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司。SABio-AP、預(yù)雜交液、BCIP/NBT 均購自武漢博士德生物技術(shù)有限公司。探針序列:原位雜交5’端生物素標(biāo)記、全硫代修飾探針均由北京奧科生物技術(shù)有限公司合成。CRIPTO-1 探 針 序 列:5’-TCACAGCCGGGTAGAAATGCCTGAGGAAAGCAGCGGA-3’。

        1.3 免疫組化 嚴(yán)格按照說明書采用免疫組化S-P法進行CRIPTO-1 蛋白檢測。以美國Novus Biologicals公司提供的切片作為陽性對照,以PBS 代替一抗作為陰性對照。

        1.4 ISH 方法 組織切片經(jīng)二甲苯脫蠟和梯度酒精脫水后,用新鮮配制的體積分?jǐn)?shù)0.5% H2O2室溫處理約30 min;用質(zhì)量分?jǐn)?shù)3% 檸檬酸新鮮配制蛋白酶(0.01 g·L-1),消化組織標(biāo)本中DNA 結(jié)合蛋白,37 ℃條件下10 min;每張玻片滴加25 μL 不含探針的預(yù)雜交液,42 ℃條件下預(yù)雜交4 h;加含探針(1 ng·L-1)的雜交液,42 ℃濕盒內(nèi)雜交12 h;0.1 ×標(biāo)準(zhǔn)檸檬酸鹽42 ℃條件下沖洗后,加SA-Bio-AP 37 ℃條件下10 min;漂洗后加BCIP/NBT,避光顯色2~4 h。并以不含探針的標(biāo)本作陰性對照。

        1.5 結(jié)果判定[3]CRIPTO-1 蛋白和mRNA 陽性信號分別為黃色及紫藍色顆粒樣物質(zhì),均位于細(xì)胞核及細(xì)胞質(zhì)內(nèi)。隨機選取5 個高倍鏡視野,每個視野計數(shù)不少于200 個細(xì)胞,按陽性細(xì)胞所占百分比及著色深淺進行結(jié)果判定[8],采用9 分評分制。按照陽性細(xì)胞所占百分比:陽性細(xì)胞<10%為1 分,10% ~50%為2分,>50%為3 分;按染色程度強弱:陰性為0 分,淡黃(藍)色染色為1 分,中度黃(藍)色染色為2 分,棕黃(紫藍)色染色<為3 分。然后將2 項評分的乘積作為總分,<3 分為陰性,≥3 分為陽性。

        1.6 統(tǒng)計學(xué)處理 應(yīng)用SPSS 17.0 進行統(tǒng)計分析,陽性率等比較采用χ2檢驗,相關(guān)性分析用Spearman 相關(guān)分析,檢驗水準(zhǔn)α=0.05。

        2 結(jié)果

        2.1 CRIPTO-1 蛋白表達情況 CRIPTO-1 蛋白陽性表達信號呈不同程度的黃色顆粒樣物質(zhì),主要位于鱗癌細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)(圖1)。CRIPTO-1 蛋白在宮頸鱗癌組織中的陽性表達率(65.6%)高于宮頸上皮內(nèi)瘤變組織(60.0%)及正常宮頸黏膜組織(10. 0%)(χ2=28.571,P <0.001)。CRIPTO-1 蛋白過表達與癌的浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及TNM 分期均關(guān)系密切(χ2分別為10.676、9.718 及11.227;P 均<0.05)。見表1。

        2.2 CRIPTO-1 mRNA 表達情況 CRIPTO-1 mRNA陽性表達信號呈不同程度藍紫色顆粒樣物質(zhì),主要位于鱗癌細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)(圖1)。CRIPTO-1 mRNA 在宮頸鱗癌組織中的陽性表達率(45.6%)高于宮頸上皮內(nèi)瘤變組織(23.3%)及正常宮頸黏膜組織(10.0%)(χ2=14.577,P=0.001)。CRIPTO-1 mRNA 過表達與癌的浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及TNM 分期均關(guān)系密切(χ2分別為13.741、4. 720 及30. 170;P 均<0.05)。見表1。

        圖1 宮頸鱗癌組織中CRIPTO-1 蛋白(A;S-P,×400)及mRNA(B;ISH,×400)的表達

        表1 CRIPTO-1 蛋白和mRNA 表達與宮頸鱗癌臨床病理特征的關(guān)系

        2.3 CRIPTO-1 蛋白及mRNA 在宮頸鱗癌組織中表達的相關(guān)性 在宮頸鱗癌組織中,CRIPTO-1 蛋白和mRNA 的表達呈正相關(guān)關(guān)系(r =0. 287,P <0. 05)。見表2。

        表2 CRIPTO-1 蛋白及mRNA 表達的相關(guān)性

        3 討論

        CRIPTO-1 具有癌基因的特性,其在胚胎發(fā)育和細(xì)胞轉(zhuǎn)化過程中牽涉到許多不同的信號途徑[4],包括Nodal/ALK4/Smad-2 和Glypican-1/c-Src/MAPK/AKT信號途徑,并且CRIPTO-1 持續(xù)的過表達在許多腫瘤的發(fā)生、發(fā)展中發(fā)揮極其重要的作用[5]。許多研究[6-7]報道CRIPTO-1 在正常黏膜和癌前病變組織中表達不同。此外,CRIPTO-1 的表達在癌前病變組織中顯著增加,如結(jié)腸腺瘤、胃黏膜的腸上皮生化和乳腺原位導(dǎo)管癌,并且CRIPTO-1 在結(jié)腸腺瘤組織中的表達水平是直接與不典型增生的程度、大小和組織學(xué)亞型有關(guān)的[8]。CRIPTO-1 的表達在高發(fā)生率的結(jié)腸癌家族的正常結(jié)腸黏膜標(biāo)本中有62%可被檢測到,但低風(fēng)險患者的標(biāo)本中僅20%結(jié)腸腺瘤檢出CRIPTO-1 的陽性表達[9]。

        本文結(jié)果顯示,CRIPTO-1 在宮頸鱗癌及宮頸上皮內(nèi)瘤變組織中的表達則均存在一定程度的升高,且CRIPTO-1 蛋白及mRNA 過表達與宮頸鱗癌的浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及TNM 分期有關(guān),這就提示CRIPTO-1蛋白及mRNA 的過表達可能與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、浸潤、轉(zhuǎn)移及進展過程有密切的關(guān)系。此外,宮頸鱗癌組織中CRIPTO-1 蛋白的表達與CRIPTO-1 mRNA 的表達呈正相關(guān),提示兩者表達具有一致性,聯(lián)合檢測有助于正確評估患者的病情進展,給臨床治療方案的制定提供一定的參考依據(jù)。

        [1]Cohen DJ,Ajani J.An expert opinion on esophageal cancer therapy[J].Expert Opin Pharmacother,2011,12(2):225 -239.

        [2]Jemal A,Bray F,Center MM,et al.Global cancer statistics[J].CA Cancer J Clin,2011,61(2):69 -90.

        [3]高冬玲,李晟磊,趙志華,等.食管鱗癌組織中RECK 和MMP-9基因mRNA 檢測與分析[J].中國腫瘤臨床,2008,35(13):748-751.

        [4]Bianco C,Normanno N,Salomon DS,et al. Role of the cripto(EGF-CFC)family in embryogenesis and cancer[J].Growth Factors,2004,22(3):133 -139.

        [5]Strizzi L,Bianco C,Normanno N,et al.CRIPTO-1:a multifunctional modulator during embryogenesis and oncogenesis[J]. Oncogene,2005,24(37):5731 -5741.

        [6]Zhang JG,Zhao J,Xin Y. Significance and relationship between CRIPTO-1 and p-STAT3 expression in gastric cancer and precancerous lesions[J].World J Gastroenterol,2010,16(5):571 -577.

        [7]Panico L,D'Antonio A,Salvatore G,et al.Differential immunohistochemical detection of transforming growth factor alpha,amphiregulin and CRIPTO in human normal and malignant breast tissues[J].Int J Cancer,1996,65(1):51 -56.

        [8]Saeki T,Salomon D,Gullick W,et al. Expression of CRIPTO-1 in human colorectal adenomas and carcinomas is related to the degree of dysplasia[J].Int J Oncol,1994,5(3):445 -451.

        [9]Saeki T,Salomon D,Normanno N,et al. Immunohistochemical detection of CRIPTO-1,amphiregulin and transforming growth-factoralpha in human gastric carcinomas and intestinal metaplasias[J].Int J Oncol,1994,5(2):215 -223.

        猜你喜歡
        內(nèi)瘤鱗癌探針
        惡性胸膜間皮瘤、肺鱗癌重復(fù)癌一例
        p16/Ki-67雙染檢測在宮頸上皮內(nèi)瘤變2級及以上病變中的應(yīng)用
        基于深度學(xué)習(xí)的宮頸鱗癌和腺鱗癌的識別分類
        多通道Taqman-探針熒光定量PCR鑒定MRSA方法的建立
        LEEP治療中度宮頸上皮內(nèi)瘤變對HPV感染的影響
        癌癥進展(2016年9期)2016-08-22 11:33:10
        BOPIM-dma作為BSA Site Ⅰ特異性探針的研究及其應(yīng)用
        LEEP術(shù)治療宮頸上皮內(nèi)瘤變的效果研究
        透射電子顯微鏡中的掃描探針裝置
        物理實驗(2015年9期)2015-02-28 17:36:47
        整合素αvβ6和JunB在口腔鱗癌組織中的表達及其臨床意義
        陰道鏡在基層醫(yī)院宮頸上皮內(nèi)瘤變診斷中的應(yīng)用探討
        亚洲国产精品嫩草影院久久av| 久久ri精品高清一区二区三区| 无码一区久久久久久久绯色AV| 中文字幕亚洲精品高清| 亚洲女优中文字幕在线观看| 久久无码专区国产精品| 久久AV老司机精品网站导航| 亚洲精品美女久久久久99| 美女免费观看一区二区三区| 欧美亚洲日本国产综合在线美利坚| 亚洲国产人在线播放首页| 国产成人亚洲综合小说区| 日本美女中文字幕第一区| 国产专区一线二线三线码 | 久久96日本精品久久久| 久久久精品一区aaa片| 五月天综合在线| 一区二区三区国产视频在线观看| 国产91精品高潮白浆喷水| 精品少妇人妻av无码专区 | 国产亚洲精品aaaaaaa片| 白白色发布在线播放国产| 中文字幕日本在线乱码| 国产成人小视频| 亚洲爆乳无码专区| 亚洲av人片在线观看调教| 日本高清乱码中文字幕| 色先锋av资源中文字幕| 亚洲国产另类久久久精品小说| 丝袜人妻中文字幕首页| 老子影院午夜伦不卡| 中文乱码人妻系列一区二区| 蜜桃伦理一区二区三区| 91久久精品色伊人6882| 久久人人爽人人爽人人av| 久久久久久久久国内精品影视| 亚洲视频在线观看第一页| 忘忧草社区www日本高清| 麻豆久久五月国产综合| 视频一区二区三区国产| 免费不卡在线观看av|