徐艷明+李鐵男+張寧+李建民+王雪+王業(yè)秋+王發(fā)善

[摘要] 目的 篩選五加生化緩釋片的最佳制備工藝，并進(jìn)行體外釋放度研究。 方法 采用正交試驗(yàn)法篩選處方；以羥丙甲基纖維素（HPMC）為骨架材料，制備五加生化緩釋片，并對(duì)優(yōu)化的試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行體外釋放效果考察。 結(jié)果 最優(yōu)處方為HPMC K100M為骨架材料，70%乙醇為黏合劑，MCC為填充劑用量40 mg，淀粉為填充劑用量50 mg，采用最佳工藝制備的五加生化緩釋片體外釋放性能較好，HPMC的規(guī)格對(duì)藥物的釋放影響最大。 結(jié)論 本法制備的緩釋片比普通片具有明顯的緩釋作用。該制備工藝簡(jiǎn)單易行，生產(chǎn)成本低，片劑外觀及可壓性良好。

[關(guān)鍵詞] 五加生化；緩釋片；釋放度

[中圖分類號(hào)] R285.5 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1674-4721（2014）11（b）-0013-03

五加生化緩釋片源于產(chǎn)后圣方《生化湯》，經(jīng)黑龍江省中醫(yī)研究院省名中醫(yī)王克勤、婦科專家王孝瑩結(jié)合多年的臨床經(jīng)驗(yàn)，秉承中醫(yī)藥理論，化裁組方而成。其主要成分為刺五加浸膏、甘草、桃仁、當(dāng)歸、川芎、炮姜等藥物，組成行氣止痛、益氣養(yǎng)血、活血化瘀功效，是治療產(chǎn)后出血癥的療效獨(dú)特的產(chǎn)品[1-3]。目前，五加生化的產(chǎn)品多以片劑和膠囊為主，均為普通制劑，生物半衰期短，血藥濃度起伏大，服藥次數(shù)多、劑量大，患者順應(yīng)性差。本實(shí)驗(yàn)以羥丙甲基纖維素（HPMC）作為主要骨架材料研制五加生化緩釋制劑，減少了普通劑型給藥所呈現(xiàn)血藥濃度峰谷的現(xiàn)象，使血藥濃度保持在比較平穩(wěn)持久的有效范圍內(nèi)，提高了藥物的安全性。

1 儀器與試藥

DP12單沖壓片機(jī)（上海天凡藥機(jī)制造廠）；CJY-2A片劑脆碎、硬度兩用測(cè)定儀（上海新諾儀器設(shè)備有限公司）；電子天平BP121S（賽多利斯公司）；ZX型高效液相色譜儀（美國(guó)戴安公司）；RC-6型智能溶出度測(cè)試儀（上海新諾儀器設(shè)備有限公司）；異嗪皮啶標(biāo)準(zhǔn)品（中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)：110807-200374）；HPMC（金虎羥丙基纖維素公司）；微晶纖維素（藥用，北京化工廠）；乳糖（藥用，北京化工廠）；硬脂酸鎂（藥用，廣州市天潤(rùn)藥業(yè)有限公司）；淀粉（佳木斯市淀粉廠）；乙腈、甲醇（色譜純，美國(guó)DIKMA公司）；超純水（自制）；其他試劑為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 五加生化緩釋片的制備

按處方量取甘草、川芎、當(dāng)歸、干姜、桃仁、刺五加浸膏，川芎、當(dāng)歸、干姜、桃仁揮發(fā)油β-環(huán)糊精飽和物，與HPMC、微晶纖維素（MCC）、淀粉按比例混合，混勻后加入一定比例乙醇制軟材，過20目篩制粒，45℃干燥3 h，再加入3%的硬脂酸鎂混勻后壓片，即得。

2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備

精密稱取異嗪皮啶標(biāo)準(zhǔn)品，置于容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，制成每毫升含異嗪皮啶215 μg的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。精密吸標(biāo)準(zhǔn)品溶液0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2 ml，置于10 ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，配成標(biāo)準(zhǔn)品溶液20 μl注入高效液相色譜儀，以峰面積（mAU×min）積分值為縱坐標(biāo)，標(biāo)準(zhǔn)品濃度（mg/L）為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，異嗪皮啶（λ=343 nm）Y=0.853X-1.0382（r=0.9995），線性范圍5.10～30.60 mg/L[4-5]。

2.3 釋放度試驗(yàn)

依據(jù)2010版中國(guó)藥典（第二部）附錄XD釋放度測(cè)定方法以及XIXD緩釋、控釋制劑指導(dǎo)原則進(jìn)行釋放度試驗(yàn)。蒸餾水900 ml，轉(zhuǎn)速100 r/min，溫度（37±0.5）℃。依法操作，在2、4、6、8、10、12 h分別取樣，并及時(shí)補(bǔ)充空白介質(zhì)，使用0.45 μm微孔濾膜過濾處理后注入液相色譜儀，求算藥物質(zhì)量濃度，計(jì)算累計(jì)溶出釋放。公式如下：Q（%）=（C×V×N/M）×100%，其中，V為溶出介質(zhì)的體積，C為溶出液的質(zhì)量濃度（μg/ml），N為測(cè)定時(shí)稀釋的倍數(shù)，M為片劑標(biāo)示量[6-7]。

2.4 正交試驗(yàn)

對(duì)影響釋藥速度的關(guān)鍵因素：不同種類的HPMC（A）、黏合劑濃度（B）、MCC的用量（C）及淀粉的用量（D）作4個(gè)因素，3水平的L9（34）正交試驗(yàn)。根據(jù)“2.1”項(xiàng)下進(jìn)行五加生化緩釋片的制備，測(cè)定各處方所制緩釋片的體外釋放度，依據(jù)《中國(guó)藥典》（2010年版二部）附錄XIXD緩釋、控釋制劑指導(dǎo)原則，取3個(gè)時(shí)間點(diǎn)評(píng)價(jià)緩釋片的體外釋放度。本試驗(yàn)以2、6、12 h的累積釋放百分率作為評(píng)價(jià)指標(biāo)，綜合評(píng)分法對(duì)正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)的結(jié)果進(jìn)行分析，累積釋放度Q2、Q6、Q12用參數(shù)P來表示。以綜合評(píng)分P=|Q2-0.25|+|Q6-0.05|+|Q12-0.90|為指標(biāo)，得分越低，說明與所定的標(biāo)準(zhǔn)越接近，因素的水平數(shù)越佳。結(jié)果見表1。

2.5 正交試驗(yàn)結(jié)果

A、B、C、D4因素在3個(gè)水平上的變化，影響因素主次為A>D>C>B，即HPMC的種類為最主要影響因素。因此，確定各因素最優(yōu)水平組合為A3B3C1D2，即HPMC K100M為骨架材料，70%乙醇為黏合劑，MCC為填充劑用量40 mg，淀粉為填充劑用量50 mg（表2）。

2.6 最優(yōu)處方的驗(yàn)證試驗(yàn)

按篩選出的最優(yōu)處方制備五加生化緩釋片3批，按照“2.3”項(xiàng)下方法測(cè)定緩釋片的體外釋放度，根據(jù)結(jié)果繪制三批樣品的溶出曲線，結(jié)果如圖1。結(jié)果表明，根據(jù)最優(yōu)處方所制得的五加生化緩釋片各時(shí)間點(diǎn)累積釋放量與設(shè)定標(biāo)準(zhǔn)較為接近，重現(xiàn)性良好。

3 討論

本研究結(jié)果表明，最優(yōu)處方為HPMC K100M為骨架材料，70%乙醇為黏合劑，MCC為填充劑用量40 mg，淀粉為填充劑用量50 mg，該制備工藝簡(jiǎn)單易行，生產(chǎn)成本低，片劑外觀及可壓性良好。其中HPMC的規(guī)格是影響藥物釋放的最主要因素。HPMC為親水凝膠骨架材料，吸水膨脹后可在片劑表面形成凝膠層，HPMC黏度越大，遇水形成凝膠層越厚，骨架溶蝕越慢，藥物釋放速度越慢[8-10]。MCC是填充劑，具有一定的阻滯作用，主要起到調(diào)整緩釋片的釋藥速率的作用；淀粉起到稀釋劑的作用。

釋放度實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，五加生化緩釋片2 h釋放出標(biāo)示量30%左右的藥物，6 h釋放出標(biāo)示量60%左右的藥物，12 h基本釋放藥物，各點(diǎn)累積釋放量滿足緩釋制劑特征。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 何欣欣.五加生化膠囊的藥理及臨床應(yīng)用[J].吉林醫(yī)學(xué)，2014，35（1）：92-93.

[2] 張鳳，董玉國(guó).五加生化膠囊藥理作用及臨床應(yīng)用[J].今日科苑，2009，13（8）：290-291.

[3] 張穎智，路娟，宋婷.五加生化膠囊對(duì)氣虛血瘀模型大鼠血液流變學(xué)和細(xì)胞內(nèi)皮因子的影響[J].中成藥，2013，35（7）：1535-1538.

[4] 耿放，朱魁元，王發(fā)善，等.HPLC同時(shí)測(cè)定五加生化膠囊中3種有效成分的含量[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2012， 18（9）：109-111.

[5] 耿放，朱魁元，王發(fā)善，等.五加生化膠囊的高效液相色譜指紋圖譜研究[J].分析科學(xué)學(xué)報(bào)，2012，28（3）：408-410.

[6] 中華人民共和國(guó)藥典第二部[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2010，附錄.

[7] 葛裕華，程路峰.釋放度測(cè)定研究進(jìn)展[J].新疆醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2008，31（8）：757-758.

[8] 王博，張來華，李苑新，等.親水凝膠骨架緩釋片釋藥機(jī)制評(píng)價(jià)方法和研究進(jìn)展[J].中國(guó)醫(yī)藥工業(yè)雜志，2009，40（10）：782-785.

[9] 陳挺，陳子晟，包泳初，等.國(guó)產(chǎn)HPMC作為鹽酸普萘洛爾緩釋骨架片基質(zhì)的研究[J].中國(guó)醫(yī)藥工業(yè)雜志，1998， 29（1）：10-16.

[10] 徐濟(jì)恒，馬鳳余，周亞球.緩釋片劑的研究概況[J].安徽化工，2011，37（1）：27-30.

（收稿日期：2014-07-28 本文編輯：郭靜娟）

[摘要] 目的 篩選五加生化緩釋片的最佳制備工藝，并進(jìn)行體外釋放度研究。 方法 采用正交試驗(yàn)法篩選處方；以羥丙甲基纖維素（HPMC）為骨架材料，制備五加生化緩釋片，并對(duì)優(yōu)化的試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行體外釋放效果考察。 結(jié)果 最優(yōu)處方為HPMC K100M為骨架材料，70%乙醇為黏合劑，MCC為填充劑用量40 mg，淀粉為填充劑用量50 mg，采用最佳工藝制備的五加生化緩釋片體外釋放性能較好，HPMC的規(guī)格對(duì)藥物的釋放影響最大。 結(jié)論 本法制備的緩釋片比普通片具有明顯的緩釋作用。該制備工藝簡(jiǎn)單易行，生產(chǎn)成本低，片劑外觀及可壓性良好。

[關(guān)鍵詞] 五加生化；緩釋片；釋放度

[中圖分類號(hào)] R285.5 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1674-4721（2014）11（b）-0013-03

五加生化緩釋片源于產(chǎn)后圣方《生化湯》，經(jīng)黑龍江省中醫(yī)研究院省名中醫(yī)王克勤、婦科專家王孝瑩結(jié)合多年的臨床經(jīng)驗(yàn)，秉承中醫(yī)藥理論，化裁組方而成。其主要成分為刺五加浸膏、甘草、桃仁、當(dāng)歸、川芎、炮姜等藥物，組成行氣止痛、益氣養(yǎng)血、活血化瘀功效，是治療產(chǎn)后出血癥的療效獨(dú)特的產(chǎn)品[1-3]。目前，五加生化的產(chǎn)品多以片劑和膠囊為主，均為普通制劑，生物半衰期短，血藥濃度起伏大，服藥次數(shù)多、劑量大，患者順應(yīng)性差。本實(shí)驗(yàn)以羥丙甲基纖維素（HPMC）作為主要骨架材料研制五加生化緩釋制劑，減少了普通劑型給藥所呈現(xiàn)血藥濃度峰谷的現(xiàn)象，使血藥濃度保持在比較平穩(wěn)持久的有效范圍內(nèi)，提高了藥物的安全性。

1 儀器與試藥

DP12單沖壓片機(jī)（上海天凡藥機(jī)制造廠）；CJY-2A片劑脆碎、硬度兩用測(cè)定儀（上海新諾儀器設(shè)備有限公司）；電子天平BP121S（賽多利斯公司）；ZX型高效液相色譜儀（美國(guó)戴安公司）；RC-6型智能溶出度測(cè)試儀（上海新諾儀器設(shè)備有限公司）；異嗪皮啶標(biāo)準(zhǔn)品（中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)：110807-200374）；HPMC（金虎羥丙基纖維素公司）；微晶纖維素（藥用，北京化工廠）；乳糖（藥用，北京化工廠）；硬脂酸鎂（藥用，廣州市天潤(rùn)藥業(yè)有限公司）；淀粉（佳木斯市淀粉廠）；乙腈、甲醇（色譜純，美國(guó)DIKMA公司）；超純水（自制）；其他試劑為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 五加生化緩釋片的制備

按處方量取甘草、川芎、當(dāng)歸、干姜、桃仁、刺五加浸膏，川芎、當(dāng)歸、干姜、桃仁揮發(fā)油β-環(huán)糊精飽和物，與HPMC、微晶纖維素（MCC）、淀粉按比例混合，混勻后加入一定比例乙醇制軟材，過20目篩制粒，45℃干燥3 h，再加入3%的硬脂酸鎂混勻后壓片，即得。

2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備

精密稱取異嗪皮啶標(biāo)準(zhǔn)品，置于容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，制成每毫升含異嗪皮啶215 μg的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。精密吸標(biāo)準(zhǔn)品溶液0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2 ml，置于10 ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，配成標(biāo)準(zhǔn)品溶液20 μl注入高效液相色譜儀，以峰面積（mAU×min）積分值為縱坐標(biāo)，標(biāo)準(zhǔn)品濃度（mg/L）為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，異嗪皮啶（λ=343 nm）Y=0.853X-1.0382（r=0.9995），線性范圍5.10～30.60 mg/L[4-5]。

2.3 釋放度試驗(yàn)

依據(jù)2010版中國(guó)藥典（第二部）附錄XD釋放度測(cè)定方法以及XIXD緩釋、控釋制劑指導(dǎo)原則進(jìn)行釋放度試驗(yàn)。蒸餾水900 ml，轉(zhuǎn)速100 r/min，溫度（37±0.5）℃。依法操作，在2、4、6、8、10、12 h分別取樣，并及時(shí)補(bǔ)充空白介質(zhì)，使用0.45 μm微孔濾膜過濾處理后注入液相色譜儀，求算藥物質(zhì)量濃度，計(jì)算累計(jì)溶出釋放。公式如下：Q（%）=（C×V×N/M）×100%，其中，V為溶出介質(zhì)的體積，C為溶出液的質(zhì)量濃度（μg/ml），N為測(cè)定時(shí)稀釋的倍數(shù)，M為片劑標(biāo)示量[6-7]。

2.4 正交試驗(yàn)

對(duì)影響釋藥速度的關(guān)鍵因素：不同種類的HPMC（A）、黏合劑濃度（B）、MCC的用量（C）及淀粉的用量（D）作4個(gè)因素，3水平的L9（34）正交試驗(yàn)。根據(jù)“2.1”項(xiàng)下進(jìn)行五加生化緩釋片的制備，測(cè)定各處方所制緩釋片的體外釋放度，依據(jù)《中國(guó)藥典》（2010年版二部）附錄XIXD緩釋、控釋制劑指導(dǎo)原則，取3個(gè)時(shí)間點(diǎn)評(píng)價(jià)緩釋片的體外釋放度。本試驗(yàn)以2、6、12 h的累積釋放百分率作為評(píng)價(jià)指標(biāo)，綜合評(píng)分法對(duì)正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)的結(jié)果進(jìn)行分析，累積釋放度Q2、Q6、Q12用參數(shù)P來表示。以綜合評(píng)分P=|Q2-0.25|+|Q6-0.05|+|Q12-0.90|為指標(biāo)，得分越低，說明與所定的標(biāo)準(zhǔn)越接近，因素的水平數(shù)越佳。結(jié)果見表1。

2.5 正交試驗(yàn)結(jié)果

A、B、C、D4因素在3個(gè)水平上的變化，影響因素主次為A>D>C>B，即HPMC的種類為最主要影響因素。因此，確定各因素最優(yōu)水平組合為A3B3C1D2，即HPMC K100M為骨架材料，70%乙醇為黏合劑，MCC為填充劑用量40 mg，淀粉為填充劑用量50 mg（表2）。

2.6 最優(yōu)處方的驗(yàn)證試驗(yàn)

按篩選出的最優(yōu)處方制備五加生化緩釋片3批，按照“2.3”項(xiàng)下方法測(cè)定緩釋片的體外釋放度，根據(jù)結(jié)果繪制三批樣品的溶出曲線，結(jié)果如圖1。結(jié)果表明，根據(jù)最優(yōu)處方所制得的五加生化緩釋片各時(shí)間點(diǎn)累積釋放量與設(shè)定標(biāo)準(zhǔn)較為接近，重現(xiàn)性良好。

3 討論

本研究結(jié)果表明，最優(yōu)處方為HPMC K100M為骨架材料，70%乙醇為黏合劑，MCC為填充劑用量40 mg，淀粉為填充劑用量50 mg，該制備工藝簡(jiǎn)單易行，生產(chǎn)成本低，片劑外觀及可壓性良好。其中HPMC的規(guī)格是影響藥物釋放的最主要因素。HPMC為親水凝膠骨架材料，吸水膨脹后可在片劑表面形成凝膠層，HPMC黏度越大，遇水形成凝膠層越厚，骨架溶蝕越慢，藥物釋放速度越慢[8-10]。MCC是填充劑，具有一定的阻滯作用，主要起到調(diào)整緩釋片的釋藥速率的作用；淀粉起到稀釋劑的作用。

釋放度實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，五加生化緩釋片2 h釋放出標(biāo)示量30%左右的藥物，6 h釋放出標(biāo)示量60%左右的藥物，12 h基本釋放藥物，各點(diǎn)累積釋放量滿足緩釋制劑特征。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 何欣欣.五加生化膠囊的藥理及臨床應(yīng)用[J].吉林醫(yī)學(xué)，2014，35（1）：92-93.

[2] 張鳳，董玉國(guó).五加生化膠囊藥理作用及臨床應(yīng)用[J].今日科苑，2009，13（8）：290-291.

[3] 張穎智，路娟，宋婷.五加生化膠囊對(duì)氣虛血瘀模型大鼠血液流變學(xué)和細(xì)胞內(nèi)皮因子的影響[J].中成藥，2013，35（7）：1535-1538.

[4] 耿放，朱魁元，王發(fā)善，等.HPLC同時(shí)測(cè)定五加生化膠囊中3種有效成分的含量[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2012， 18（9）：109-111.

[5] 耿放，朱魁元，王發(fā)善，等.五加生化膠囊的高效液相色譜指紋圖譜研究[J].分析科學(xué)學(xué)報(bào)，2012，28（3）：408-410.

[6] 中華人民共和國(guó)藥典第二部[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2010，附錄.

[7] 葛裕華，程路峰.釋放度測(cè)定研究進(jìn)展[J].新疆醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2008，31（8）：757-758.

[8] 王博，張來華，李苑新，等.親水凝膠骨架緩釋片釋藥機(jī)制評(píng)價(jià)方法和研究進(jìn)展[J].中國(guó)醫(yī)藥工業(yè)雜志，2009，40（10）：782-785.

[9] 陳挺，陳子晟，包泳初，等.國(guó)產(chǎn)HPMC作為鹽酸普萘洛爾緩釋骨架片基質(zhì)的研究[J].中國(guó)醫(yī)藥工業(yè)雜志，1998， 29（1）：10-16.

[10] 徐濟(jì)恒，馬鳳余，周亞球.緩釋片劑的研究概況[J].安徽化工，2011，37（1）：27-30.

（收稿日期：2014-07-28 本文編輯：郭靜娟）

[摘要] 目的 篩選五加生化緩釋片的最佳制備工藝，并進(jìn)行體外釋放度研究。 方法 采用正交試驗(yàn)法篩選處方；以羥丙甲基纖維素（HPMC）為骨架材料，制備五加生化緩釋片，并對(duì)優(yōu)化的試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行體外釋放效果考察。 結(jié)果 最優(yōu)處方為HPMC K100M為骨架材料，70%乙醇為黏合劑，MCC為填充劑用量40 mg，淀粉為填充劑用量50 mg，采用最佳工藝制備的五加生化緩釋片體外釋放性能較好，HPMC的規(guī)格對(duì)藥物的釋放影響最大。 結(jié)論 本法制備的緩釋片比普通片具有明顯的緩釋作用。該制備工藝簡(jiǎn)單易行，生產(chǎn)成本低，片劑外觀及可壓性良好。

[關(guān)鍵詞] 五加生化；緩釋片；釋放度

[中圖分類號(hào)] R285.5 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1674-4721（2014）11（b）-0013-03

五加生化緩釋片源于產(chǎn)后圣方《生化湯》，經(jīng)黑龍江省中醫(yī)研究院省名中醫(yī)王克勤、婦科專家王孝瑩結(jié)合多年的臨床經(jīng)驗(yàn)，秉承中醫(yī)藥理論，化裁組方而成。其主要成分為刺五加浸膏、甘草、桃仁、當(dāng)歸、川芎、炮姜等藥物，組成行氣止痛、益氣養(yǎng)血、活血化瘀功效，是治療產(chǎn)后出血癥的療效獨(dú)特的產(chǎn)品[1-3]。目前，五加生化的產(chǎn)品多以片劑和膠囊為主，均為普通制劑，生物半衰期短，血藥濃度起伏大，服藥次數(shù)多、劑量大，患者順應(yīng)性差。本實(shí)驗(yàn)以羥丙甲基纖維素（HPMC）作為主要骨架材料研制五加生化緩釋制劑，減少了普通劑型給藥所呈現(xiàn)血藥濃度峰谷的現(xiàn)象，使血藥濃度保持在比較平穩(wěn)持久的有效范圍內(nèi)，提高了藥物的安全性。

1 儀器與試藥

DP12單沖壓片機(jī)（上海天凡藥機(jī)制造廠）；CJY-2A片劑脆碎、硬度兩用測(cè)定儀（上海新諾儀器設(shè)備有限公司）；電子天平BP121S（賽多利斯公司）；ZX型高效液相色譜儀（美國(guó)戴安公司）；RC-6型智能溶出度測(cè)試儀（上海新諾儀器設(shè)備有限公司）；異嗪皮啶標(biāo)準(zhǔn)品（中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)：110807-200374）；HPMC（金虎羥丙基纖維素公司）；微晶纖維素（藥用，北京化工廠）；乳糖（藥用，北京化工廠）；硬脂酸鎂（藥用，廣州市天潤(rùn)藥業(yè)有限公司）；淀粉（佳木斯市淀粉廠）；乙腈、甲醇（色譜純，美國(guó)DIKMA公司）；超純水（自制）；其他試劑為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 五加生化緩釋片的制備

按處方量取甘草、川芎、當(dāng)歸、干姜、桃仁、刺五加浸膏，川芎、當(dāng)歸、干姜、桃仁揮發(fā)油β-環(huán)糊精飽和物，與HPMC、微晶纖維素（MCC）、淀粉按比例混合，混勻后加入一定比例乙醇制軟材，過20目篩制粒，45℃干燥3 h，再加入3%的硬脂酸鎂混勻后壓片，即得。

2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備

精密稱取異嗪皮啶標(biāo)準(zhǔn)品，置于容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，制成每毫升含異嗪皮啶215 μg的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。精密吸標(biāo)準(zhǔn)品溶液0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2 ml，置于10 ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，配成標(biāo)準(zhǔn)品溶液20 μl注入高效液相色譜儀，以峰面積（mAU×min）積分值為縱坐標(biāo)，標(biāo)準(zhǔn)品濃度（mg/L）為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，異嗪皮啶（λ=343 nm）Y=0.853X-1.0382（r=0.9995），線性范圍5.10～30.60 mg/L[4-5]。

2.3 釋放度試驗(yàn)

依據(jù)2010版中國(guó)藥典（第二部）附錄XD釋放度測(cè)定方法以及XIXD緩釋、控釋制劑指導(dǎo)原則進(jìn)行釋放度試驗(yàn)。蒸餾水900 ml，轉(zhuǎn)速100 r/min，溫度（37±0.5）℃。依法操作，在2、4、6、8、10、12 h分別取樣，并及時(shí)補(bǔ)充空白介質(zhì)，使用0.45 μm微孔濾膜過濾處理后注入液相色譜儀，求算藥物質(zhì)量濃度，計(jì)算累計(jì)溶出釋放。公式如下：Q（%）=（C×V×N/M）×100%，其中，V為溶出介質(zhì)的體積，C為溶出液的質(zhì)量濃度（μg/ml），N為測(cè)定時(shí)稀釋的倍數(shù)，M為片劑標(biāo)示量[6-7]。

2.4 正交試驗(yàn)

對(duì)影響釋藥速度的關(guān)鍵因素：不同種類的HPMC（A）、黏合劑濃度（B）、MCC的用量（C）及淀粉的用量（D）作4個(gè)因素，3水平的L9（34）正交試驗(yàn)。根據(jù)“2.1”項(xiàng)下進(jìn)行五加生化緩釋片的制備，測(cè)定各處方所制緩釋片的體外釋放度，依據(jù)《中國(guó)藥典》（2010年版二部）附錄XIXD緩釋、控釋制劑指導(dǎo)原則，取3個(gè)時(shí)間點(diǎn)評(píng)價(jià)緩釋片的體外釋放度。本試驗(yàn)以2、6、12 h的累積釋放百分率作為評(píng)價(jià)指標(biāo)，綜合評(píng)分法對(duì)正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)的結(jié)果進(jìn)行分析，累積釋放度Q2、Q6、Q12用參數(shù)P來表示。以綜合評(píng)分P=|Q2-0.25|+|Q6-0.05|+|Q12-0.90|為指標(biāo)，得分越低，說明與所定的標(biāo)準(zhǔn)越接近，因素的水平數(shù)越佳。結(jié)果見表1。

2.5 正交試驗(yàn)結(jié)果

A、B、C、D4因素在3個(gè)水平上的變化，影響因素主次為A>D>C>B，即HPMC的種類為最主要影響因素。因此，確定各因素最優(yōu)水平組合為A3B3C1D2，即HPMC K100M為骨架材料，70%乙醇為黏合劑，MCC為填充劑用量40 mg，淀粉為填充劑用量50 mg（表2）。

2.6 最優(yōu)處方的驗(yàn)證試驗(yàn)

按篩選出的最優(yōu)處方制備五加生化緩釋片3批，按照“2.3”項(xiàng)下方法測(cè)定緩釋片的體外釋放度，根據(jù)結(jié)果繪制三批樣品的溶出曲線，結(jié)果如圖1。結(jié)果表明，根據(jù)最優(yōu)處方所制得的五加生化緩釋片各時(shí)間點(diǎn)累積釋放量與設(shè)定標(biāo)準(zhǔn)較為接近，重現(xiàn)性良好。

3 討論

本研究結(jié)果表明，最優(yōu)處方為HPMC K100M為骨架材料，70%乙醇為黏合劑，MCC為填充劑用量40 mg，淀粉為填充劑用量50 mg，該制備工藝簡(jiǎn)單易行，生產(chǎn)成本低，片劑外觀及可壓性良好。其中HPMC的規(guī)格是影響藥物釋放的最主要因素。HPMC為親水凝膠骨架材料，吸水膨脹后可在片劑表面形成凝膠層，HPMC黏度越大，遇水形成凝膠層越厚，骨架溶蝕越慢，藥物釋放速度越慢[8-10]。MCC是填充劑，具有一定的阻滯作用，主要起到調(diào)整緩釋片的釋藥速率的作用；淀粉起到稀釋劑的作用。

釋放度實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，五加生化緩釋片2 h釋放出標(biāo)示量30%左右的藥物，6 h釋放出標(biāo)示量60%左右的藥物，12 h基本釋放藥物，各點(diǎn)累積釋放量滿足緩釋制劑特征。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 何欣欣.五加生化膠囊的藥理及臨床應(yīng)用[J].吉林醫(yī)學(xué)，2014，35（1）：92-93.

[2] 張鳳，董玉國(guó).五加生化膠囊藥理作用及臨床應(yīng)用[J].今日科苑，2009，13（8）：290-291.

[3] 張穎智，路娟，宋婷.五加生化膠囊對(duì)氣虛血瘀模型大鼠血液流變學(xué)和細(xì)胞內(nèi)皮因子的影響[J].中成藥，2013，35（7）：1535-1538.

[4] 耿放，朱魁元，王發(fā)善，等.HPLC同時(shí)測(cè)定五加生化膠囊中3種有效成分的含量[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2012， 18（9）：109-111.

[5] 耿放，朱魁元，王發(fā)善，等.五加生化膠囊的高效液相色譜指紋圖譜研究[J].分析科學(xué)學(xué)報(bào)，2012，28（3）：408-410.

[6] 中華人民共和國(guó)藥典第二部[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2010，附錄.

[7] 葛裕華，程路峰.釋放度測(cè)定研究進(jìn)展[J].新疆醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2008，31（8）：757-758.

[8] 王博，張來華，李苑新，等.親水凝膠骨架緩釋片釋藥機(jī)制評(píng)價(jià)方法和研究進(jìn)展[J].中國(guó)醫(yī)藥工業(yè)雜志，2009，40（10）：782-785.

[9] 陳挺，陳子晟，包泳初，等.國(guó)產(chǎn)HPMC作為鹽酸普萘洛爾緩釋骨架片基質(zhì)的研究[J].中國(guó)醫(yī)藥工業(yè)雜志，1998， 29（1）：10-16.

[10] 徐濟(jì)恒，馬鳳余，周亞球.緩釋片劑的研究概況[J].安徽化工，2011，37（1）：27-30.

（收稿日期：2014-07-28 本文編輯：郭靜娟）